"ФС.2.1.0177. Фармакопейная статья. Спиронолактон"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

(2'R)--(Ацетилсульфанил)-3',4'-дигидро-5'H-спиро[андрост-4-ен-17,2'-фуран]-3,5'-дион.

Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% спиронолактона C₂₄H₃₂O₄S в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белый или желтовато-белый порошок.

<*> Проявляет полиморфизм.

--------------------------------

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Растворим в спирте 96%, практически нерастворим в воде.

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца спиронолактона.

Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объемах метанола, растворы наносят на диски калия бромида, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях"). Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимум поглощения при 238 нм (раздел "Количественное определение").

3. Качественная реакция. К 0,01 г субстанции прибавляют 2 мл серной кислоты раствора 50% и встряхивают. Раствор должен окраситься в оранжевый цвет с интенсивной желтовато-зеленой флуоресценцией. Осторожно нагревают раствор; окраска должна измениться с оранжевой на интенсивно красную и должен выделиться сероводород, вызывающий почернение свинцово-ацетатной бумаги. Прибавляют 10 мл воды; должно появиться зелено-желтое окрашивание с флуоресценцией или должен выпасть осадок.

Удельное вращение. От -41 до -46 ° в пересчете на сухое вещество (1% раствор субстанции в этаноле 96%, ОФС "Оптическое вращение").

Меркаптосоединения. Встряхивают 2,0 г субстанции с 20 мл воды в течение 1 мин и фильтруют. К 10 мл фильтрата прибавляют 0,05 мл 0,01 М йода раствора и 0,1 мл крахмала раствора 0,1% и перемешивают; должно появиться голубое окрашивание.

Хром. Не более 0,005%.

Раствор сравнения. В цилиндр помещают 0,5 мл свежеприготовленного раствора калия бихромата (концентрация 28,3 мг/л), 10 мл воды и перемешивают. Прибавляют 1 мл серной кислоты разведенной 16%, выдерживают до комнатной температуры, доводят объем раствора водой до 20 мл и прибавляют 0,5 мл раствора дифенилкарбазида.

Помещают 0,2 г субстанции в платиновый тигель, прибавляют 1,0 г калия карбоната и 0,3 г калия нитрата. Осторожно нагревают до расплавления и прокаливают при температуре от 600 до 650 °C до сгорания углерода. Полученный остаток охлаждают, растворяют при осторожном нагревании в 10 мл воды, фильтруют и доводят объем раствора водой до 20,0 мл. В цилиндр помещают 10 мл полученного раствора, прибавляют 0,5 г мочевины и затем серной кислоты разведенной 16% до получения кислой реакции среды (по лакмусовой индикаторной бумаге). После прекращения газовыделения прибавляют 1 мл серной кислоты разведенной 16%, выдерживают до комнатной температуры, доводят объем раствора водой до 20 мл и прибавляют 0,5 мл раствора дифенилкарбазида. Интенсивность окраски полученного раствора не должна превышать интенсивность окраски раствора сравнения.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография"). Растворы готовятся непосредственно перед использованием.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил - тетрагидрофуран - вода 80:180:740.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 62,5 мг субстанции растворяют в 2,5 мл тетрагидрофурана и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца канренона ((2'R)--3',4'-дигидро-5'H-спиро[андрост-4,6-диен-17,2'-фуран]-3,5'-дион [976-71-6)]), растворяют в 1 мл тетрагидрофурана и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения В. В мерную колбу объемом 100 мл помещают 1 мл раствора сравнения Б и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы 1. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора и 1 мл раствора сравнения Б и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы 2. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл раствора сравнения А и доводят объем раствора ПФ до метки.

Хроматографируют растворы для проверки пригодности хроматографической системы 1 (детектирование при 283 нм) и 2 (детектирование при 254 нм), растворы сравнения А (детектирование при 254 нм) и В (детектирование при 283 нм), а также испытуемый раствор (детектирование при 254 и 283 нм).

Относительное время удерживания соединений. Спиронолактон - 1 (около 30 мин); канренон - около 1,2.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы 1 разрешение (R_S) между пиками канренона и спиронолактона должно быть не менее 1,4.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы 2 отношение сигнал/шум (S/N) для пика спиронолактона должно быть не менее 6.

На хроматограмме раствора сравнения А относительное стандартное отклонение площади пика спиронолактона должно быть не более 5% (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика канренона не должна превышать 0,3 площади пика спиронолактона на хроматограмме раствора сравнения В (не более 0,3%);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,3 площади пика спиронолактона на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,3%);

- сумма площадей пиков примесей, определенных при двух волнах детектирования, должна быть не более 1,0%.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС "Потеря в массе при высушивании", способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях").

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,05 г (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора метанолом до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 238 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

Содержание спиронолактона C₂₄H₃₂O₄S в пересчете на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;

a - навеска субстанции, г;

470 - удельный показатель поглощения спиронолактона ;

W - потеря в массе при высушивании, %.

В защищенном от света месте.