"ФС.2.1.0068.18. Фармакопейная статья. Бетаметазон"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)

Содержит не менее 97,0% и не более 103,0% бетаметазона C₂₂H₂₉FO₅ в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в этаноле, очень мало растворим в метиленхлориде, практически нерастворим в воде.

1. ИК-спектрометрия. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца бетаметазона.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F₂₅₄.

Подвижная фаза (ПФ). Бутанол, насыщенный водой - толуол - эфир 5:10:85.

Испытуемый раствор. 10 мг субстанции растворяют в 10,0 мл смеси метанол - метиленхлорид 1:9.

Раствор сравнения. 10 мг стандартного образца бетаметазона растворяют в 10,0 мл смеси метанол - метиленхлорид 1:9.

Контрольный раствор. 10 мг стандартного образца бетаметазона и 10 мг стандартного образца дексаметазона растворяют в 10,0 мл смеси метанол - метиленхлорид 1:9.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора, раствора сравнения и контрольного раствора. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт подвижной фазы пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в ультрафиолетовом свете при 254 нм.

На хроматограмме испытуемого раствора должна наблюдаться зона адсорбции, по положению, интенсивности поглощения и величине соответствующая зоне адсорбции на хроматограмме раствора сравнения. Результаты испытания считаются достоверными, если на хроматограмме контрольного раствора наблюдаются две зоны адсорбции, которые могут быть не полностью разделены.

3. Качественная реакция. К 2 мг субстанции прибавляют 2 мл серной кислоты концентрированной и перемешивают. В течение 5 мин должно появиться интенсивное красно-коричневое окрашивание. Раствор осторожно выливают при перемешивании в 10 мл воды. Окрашивание должно исчезнуть и должен остаться прозрачный раствор.

Удельное вращение. От +118 до +126 в пересчете на сухое вещество (0,5% раствор субстанции в метаноле, ОФС "Поляриметрия").

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Подвижная фаза А (ПФА). К 250 мл ацетонитрила прибавляют 700 мл воды, выдерживают до уравновешивания объема и доводят объем раствора водой до 1000 мл.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. 63 мг субстанции растворяют в 25,0 мл смеси ацетонитрил - метанол (1:1).

Раствор сравнения А. 1,0 мл испытуемого раствора доводят ПФА до 100,0 мл.

Раствор сравнения Б. 2 мг стандартного образца бетаметазона и 2 мг стандартного образца метилпреднизолона растворяют в 100,0 мл ПФА.

Режим хроматографирования

В течение не менее 30 мин колонку промывают ацетонитрилом, затем ПФА. В градиентном режиме хроматографируют смесь ацетонитрил - метанол 1:1 (холостой опыт), испытуемый раствор и растворы сравнения А и Б.

метилпреднизолон - около 0,92; бетаметазон - 1,0 (около 12,5 мин).

Пригодность хроматографической системы: На хроматограмме раствора сравнения Б разрешение (R) между пиками метилпреднизолона и бетаметазона должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика бетаметазона на хроматограмме раствора сравнения А (не более 1,0%);

- не более одного такого пика может превышать 0,5 площади пика бетаметазона на хроматограмме раствора сравнения А (более 0,5%);

- сумма площадей всех пиков примесей не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика бетаметазона на хроматограмме раствора сравнения А (не более 2,0%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади пика бетаметазона на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,1%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС "Потеря в массе при высушивании", способ 1). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Испытание проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания "Родственные примеси".

Испытуемый раствор. Около 50 мг (точная навеска) субстанции растворяют в 30 мл смеси ацетонитрил - метанол 1:1, доводят объем раствора ПФА до 100,0 мл и перемешивают.

Стандартный раствор. Около 50 мг (точная навеска) стандартного образца бетаметазона растворяют в 30 мл смеси ацетонитрил - метанол 1:1, доводят объем раствора ПФА до 100,0 мл и перемешивают.

В изократическом режиме при использовании ПФА не менее 5 раз хроматографируют стандартный и испытуемый растворы.

Время хроматографирования - не менее чем 1,5-кратное от времени удерживания основного пика.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора относительное стандартное отклонение площади пика бетаметазона должно быть не более 1,0% (6 определений).

Содержание бетаметазона C₂₂H₂₉FO₅ в субстанции в пересчете на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика бетаметазона на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика бетаметазона на хроматограмме стандартного раствора;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска стандартного образца бетаметазона, мг;

W - потеря в массе при высушивании субстанции, %;

P - содержание основного вещества в стандартном образце бетаметазона, %.

Хранение. В защищенном от света месте.