"ФС.2.1.0101.18. Фармакопейная статья. Изониазид"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том III")

Содержит не менее 99,0% и не более 101,0% изониазида C₆H₇N₃O в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96%, очень мало растворим в хлороформе.

1. ИК-спектрометрия. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца изониазида или рисунку (Приложение).

2. Спектрофотометрия. Ультрафиолетовый спектр поглощения 0,002% раствора субстанции в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты в области от 290 до 350 нм должен иметь максимум при 266 нм и минимум при 234 нм.

3. Качественная реакция. К нескольким кристаллам субстанции прибавляют 0,05 г 2,4-динитрохлорбензола, 3 мл спирта 96% и кипятят в течение 1,5 мин. После охлаждения прибавляют 2 капли 10% раствора натрия гидроксида; должно появиться буро-красное окрашивание, быстро переходящее в красновато-коричневое.

4. Качественная реакция. 0,01 г субстанции растворяют в 5 мл воды и прибавляют 1 мл 5% аммиачного раствора серебра нитрата; должен появиться темный осадок. При нагревании на водяной бане на стенках пробирки должно образоваться серебряное зеркало.

Температура плавления. От 170 до 174 °C (ОФС "Температура плавления").

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС "Прозрачность и степень мутности жидкостей").

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании "Прозрачность раствора", не должна превышать эталон сравнения BY₇ (ОФС "Степень окраски жидкостей", метод 2).

pH От 6,0 до 8,0 (5% раствор, ОФС "Ионометрия", метод 3).

Гидразин и родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС "Тонкослойная хроматография").

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF₂₅₄.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетон-метанол-этилацетат 2:2:5.

Испытуемый раствор. 1 г субстанции растворяют в смеси ацетон-вода (1:1) и доводят той же смесью до 10 мл.

Раствор сравнения. 0,08 г гидразина сульфата растворяют в 50 мл воды и доводят ацетоном до 100 мл. К 10 мл полученного раствора прибавляют 0,2 мл испытуемого раствора и доводят смесью ацетон-вода (1:1) до 100 мл.

На линию старта пластинки наносят 10 мкл испытуемого раствора (1000 мкг) и 10 мкл раствора сравнения (2 мкг изониазида и эквивалент 0,2 мкг гидразина). Пластинку с нанесенными пробами высушивают на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ свете при длине волны 254 нм.

На хроматограмме испытуемого раствора любая зона адсорбции примеси по совокупности величины и интенсивности поглощения не должна превышать зону адсорбции изониазида (2 мкг) на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%).

Пластинку опрыскивают 1% раствором диметиламинобензальдегида в спирте 96% и сушат в течение 5 мин при температуре от 100 до 105 °C.

На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции примеси по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать соответствующую по положению зону адсорбции гидразина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,02%).

Зона адсорбции на линии старта не учитывается.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС "Потеря в массе при высушивании", способ 1). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,01% (ОФС "Хлориды"). 0,5 г субстанции растворяют в 25 мл воды. Для определения используют 10 мл раствора.

Сульфаты. Не более 0,05% (ОФС "Сульфаты", метод 1). Для определения используют 10 мл раствора, полученного в испытании "Хлориды".

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют около 3,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС "Тяжелые металлы", метод 2, в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

<*> Бактериальные эндотоксины. Не более 0,3 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС "Бактериальные эндотоксины").

--------------------------------

<*> Контроль по показателю качества "Бактериальные эндотоксины" проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Определение проводят методом титриметрии.

Около 0,1 г субстанции (точная навеска) растворяют в 20 мл уксусной кислоты ледяной, прибавляют 5 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до появления зеленого окрашивания (индикатор - кристаллического фиолетового раствор 0,1%).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 13,71 мг изониазида C₆H₇N₃O.

Хранение. В защищенном от света месте при температуре не выше 25 °C.