"МУК 4.1.3622-20. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций спиродиклофена в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 04.08.2020)

1. Разработаны ФБУН "Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора (В.Н. Ракитский, Н.Е. Федорова, О.Е. Егорченкова).

2. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 4 августа 2020 г.

3. Введены впервые.

1.1. Настоящие методические указания (далее - МУК) устанавливают порядок применения метода капиллярной газожидкостной хроматографии (далее - ГЖХ) для определения в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов массовой концентрации спиродиклофена в диапазонах 0,05 - 0,5 мг/м³; 0,0008 - 0,008 мг/м³ и 0,05 - 0,5 мкг/смыв, соответственно.

1.2. МУК предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут быть использованы организациями, осуществляющими исследования в области качества и безопасности атмосферного воздуха населенных мест, воздуха рабочей зоны, а также условий безопасности труда работающих.

1.3. МУК носят рекомендательный характер.

2.1. Спиродиклофен - [3-(2,4-дихлорфенил)-2-оксо-1-оксаспиро[4,5]дек-3-ен-4-ил] 2,2-диметилбутаноат <1>. Брутто-формула - C₂₁H₂₄Cl₂O₄. Молекулярная масса - 401,3. Порошок белого цвета без запаха. Плотность - 1,29 г/см³ при 20 °C. Температура плавления 94,8 °C. Температура кипения - разлагается до кипения. Давление паров при 20 °C 7,0·10^-4 мПа. Растворимость в органических растворителях (в г/дм³ при 20 °C): н-гептан - 20, ксилол более 250, дихлорметан более 250, изопропанол - 47, н-октанол - 44, полиэтиленгликоль - 24, ацетон более 250; этилацетат более 250; ацетонитрил более 250, диметилсульфоксид - 75. Растворимость в воде (в мг/дм³ при 20 °C): 0,05 (pH 5); 0,19 pH 7). Коэффициент распределения октанол/вода: K_owlogP = 5,83 (при 20 °C и pH 4); 5,1 (при 23 °C и pH 7).

--------------------------------

<1> В соответствии с Международным союзом теоретической и прикладной химии (ИЮПАК, англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).

2.2. Острая оральная токсичность (LD₅₀) для крыс более 2500 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD₅₀) для крыс более 2000 мг/кг.

2.3. Спиродиклофен - акарицид, обладающий высокой активностью против растительноядных клещей (Panonychus, Tetranychus, Phyllocoptruta, Brevipalpus и Aculus) при нормах расхода 50 - 200 г/га, а также высокой остаточной эффективностью, но безопасен для клещей-хищников. Спиродиклофен может использоваться для борьбы с устойчивыми к ингибиторам митохондриального транспорта электронов, например, пиридабену, популяциями клещей на косточковых культурах, яблонях, виноградной лозе.

3.1. При соблюдении всех регламентированных условии проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности p = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 3.1 для соответствующих диапазонов концентраций.

3.2. Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (n = 20) приведены в табл. 3.2.

4.1. Измерения концентраций спиродиклофена выполняют методом капиллярной ГЖХ с масс-селективным детектором.

4.2. Концентрирование вещества из воздушной среды осуществляют на бумажный фильтр, экстракцию с фильтров проводят ацетоном. Смыв с кожных покровов осуществляют этиловым спиртом.

4.3. Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 0,01 нг. Средняя полнота извлечения с фильтров - 95,2% (воздух рабочей зоны), 90,2% (атмосферный воздух); с поверхности кожи - 97,9%.

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовые хроматографы.

6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Организация обучения работников безопасности труда по ГОСТ 12.0.004.

6.3. При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/см²), необходимо соблюдать нормы и правила <2>. Запрещается открывать вентиль баллона, не установив в нем понижающий редуктор.

--------------------------------

<2> Правила промышленной безопасности опасных производственных объектов, на которых используется оборудование, работающее под избыточным давлением, утвержденные приказом Ростехнадзора от 25.03.2014 N 116.

6.4. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на газовом хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.

7.1. При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;

- выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

8.1. Очистка органических растворителей.

8.1.1. Ацетон. Ацетон перегоняют над небольшим количеством перманганата калия и прокаленным карбонатом калия или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30.

8.1.2. Ацетонитрил. Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм³ ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 часа, после чего перегоняют. Непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм³ ацетонитрила 10 г карбоната калия).

8.2. Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения.

8.2.1. Исходный раствор спиродиклофена для градуировки (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают (0,01 +/- 0,0001) г спиродиклофена, растворяют в 50 - 60 см³ ацетона, доводят ацетоном до метки, тщательно перемешивают.

Раствор хранят в холодильнике при температуре (2 - 6) °C не более 6 месяцев.

8.2.2. Рабочий раствор N 1 спиродиклофена для градуировки и внесения (концентрация 1,0 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 1,0 см³ исходного градуировочного раствора с концентрацией 100,0 мкг/см³ (п. 8.2.1), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочий растворы N 1 с концентрацией спиродиклофена 1,0 мкг/см³.

Раствор хранят в холодильнике при температуре (2 - 6) °C не более месяца.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом "внесено-найдено" и контроля качества результатов измерений методом добавок.

8.2.3. Рабочие растворы N 2 - 6 спиродиклофена для градуировки (концентрация 0,01 - 0,1 мкг/см³). В 5 мерных колб вместимостью 100 см³ помещают 1,0; 2,0; 5,0; 8,0 и 10,0 см³ рабочего раствора N 1 с концентрацией 1,0 мкг/см³ (п. 8.2.2), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 6 с концентрациями спиродиклофена 0,01; 0,02; 0,05; 0,08 и 0,1 мкг/см³.

Растворы хранят в холодильнике при температуре (2 - 6) °C не более 14 дней.

8.3. Установление градуировочной характеристики. Градуировочную характеристику, выражающую линейную зависимость площади пика от концентрации спиродиклофена в растворе, устанавливают методом абсолютной калибровки по 5 растворам для градуировки N 2 - 6.

В испаритель хроматографа вводят по 1 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 10.3. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Устанавливают площади пика спиродиклофена, на основании которых строят градуировочную зависимость.

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.

При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее двух образцов растворов для градуировки, содержание спиродиклофена в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,01 до 0,1 мкг/см³.

Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

X - концентрация спиродиклофена в пробе при контрольном измерении, мкг/см³;

C - известная концентрация градуировочного раствора спиродиклофена, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см³;

B - норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (B = 20% при P = 0,95).

8.4. Подготовка фильтров для отбора проб воздуха. Диаметр бумажного фильтра должен соответствовать внутреннему диаметру фильтродержателя.

Фильтры последовательно по 3 раза промывают на воронке Бюхнера этанолом, затем ацетонитрилом порциями 25 - 30 см³, сушат с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, затем на воздухе при комнатной температуре. До использования фильтры хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

8.5. Подготовка салфеток для проведения смыва.

8.5.1. Приготовление раствора натрия углекислого с массовой долей 5% (5%-й раствор). Навеску (25 +/- 0,1) г натрия углекислого помещают в мерную колбу вместимостью 500 см³, растворяют в деионизированной воде, доводят водой до метки, перемешивают.

8.5.2. Подготовка салфеток для проведения смыва. Вырезают салфетки (лоскуты) из белой бязи размером 10 x 10 см, затем их последовательно обрабатывают 5 процентным раствором углекислого натрия (при кипячении), водой до нейтральной реакции промывных вод, 2-кратно промывают этиловым спиртом, сушат на воздухе при комнатной температуре. До использования салфетки хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

9.1. Воздушная среда. Отбор проб воздуха рабочей зоны осуществляют в соответствии с приложением 9 пункт 2 Р 2.2.2006-05 и ГОСТ 12.1.005.

Воздух рабочем зоны с объемным расходом 1,0 дм³/мин аспирируют через бумажный фильтр, помещенный в фильтродержатель. Для измерения концентрации спиродиклофена на уровне предела обнаружения (0,05 мг/м³) необходимо отобрать 2,0 дм³ воздуха.

9.2. Отбор проб атмосферного воздуха осуществляют в соответствии с ГОСТ 17.23.01.

Атмосферный воздух с объемным расходом 5,0 дм³/мин аспирируют через бумажный фильтр, помещенный в фильтродержатель. Для определения вещества на уровне предела обнаружения (0,0008 мг/м³) необходимо отобрать 25 дм³ воздуха.

Отобранные пробы раздельно помещают в полиэтиленовые пакеты и хранят в холодильнике при температуре (2 - 6) °C не более 16 дней.

9.3. Условия проведения смыва. Смывы проводят в конце работы или после выполнения отдельных операций с открытых и закрытых спецодеждой или другими средствами индивидуальной защиты участков тела (лоб, лицо, шея, грудь, предплечье, голень, кисти рук, включая межпальцевые промежутки).

До работы выбирают участок кожи, обрабатывают его для удаления загрязнений, фиксируют площадь (не менее 200 см²). При необходимости отбирают фоновые смывы.

Смыв выполняют способом обмыва фиксированного участка кожи смесью этилового спирта с водой (8 : 2, по объему), помещая 20 см³ в стеклянную емкость с металлической крышкой. Тканевой салфеткой, смоченной растворителем, с помощью пинцета (индивидуально) обмывают этот участок сверху вниз. Операцию повторяют дважды.

Срок хранения отобранных проб смывов, помещенных в герметично закрытые емкости, в холодильнике при температуре (2 - 6) °C не более 21 дня.

10.1. Воздушная среда. Экспонированный фильтр переносят в химический стакан вместимостью 100 см³, заливают 15 см³ ацетона, помещают на встряхиватель на 10 минут. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 10 см³, выдерживая на встряхивателе по 10 минут.

Объединенный экстракт переносят (через воронку) в круглодонную колбу, упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °C почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в 10 см³ (воздух рабочей зоны) или 2 см³ (атмосферный воздух) ацетона, тщательно перемешивают и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 10.3.

Пробу вводят в испаритель хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика действующего вещества, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию спиродиклофена в хроматографируемом растворе.

10.2. Смывы с кожных покровов. Пробу смыва сливают (через воронку) в колбу для упаривания, с помощью пинцета извлекают салфетку, помещают в конусную химическую воронку, установленную в муфту колбы для упаривания, тщательно отжимают и промывают этанолом дважды порциями по 10 см³, предварительно ополаскивая растворителем емкость, в которой находилась проба.

Объединенный раствор упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °C почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в 5 см³ ацетона и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 10.3.

Пробу вводят в испаритель хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика действующего вещества, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию спиродиклофена в хроматографируемом растворе.

10.3. Условия хроматографирования:

- газовый хроматограф с масс-селективным детектором;

- хроматографическая капиллярная кварцевая колонка длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, содержащая сорбент 5%-фенил и 95%-диметилполисилоксан (толщина пленки сорбента 0,25 мкм);

- температура детектора: квадруполя 150 °C, источника 230 °C, переходной камеры 280 °C;

- температура испарителя 250 °C;

- температура термостата колонки программированная. Начальная температура 160 °C, выдержка 2 мин, нагрев колонки со скоростью 10 градусов в минуту до температуры 260 °C, выдержка 5 мин, нагрев колонки со скоростью 10 градусов в минуту до температуры 270 °C, выдержка 7 мин;

- газ 1 (гелий): поток в колонке 1,5 см³/мин;

- давление 140,05 кПа;

- средняя линейная скорость 46,8 см/сек;

- хроматографируемый объем 1 мм³;

- режим регистрации индивидуальных ионов: отношение масса-заряд 71 (количественный), 99, 109, 157;

- линейный диапазон детектирования 0,01 - 0,1 нг.

Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор спиродиклофена с концентрацией 0,1 мкг/см³, разбавляют ацетоном (не более чем в 50 раз).

11.1. Воздушная среда. Концентрацию вещества в пробе воздуха (X), мг/м³, рассчитывали по формуле:

C - концентрация вещества в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочной зависимости в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³;

V_t - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 0 °C), дм³:

T - температура воздуха при отборе проб (на входе в аспиратор), °C;

P - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;

u - расход воздуха при отборе пробы, дм³/мин;

t - длительность отбора пробы, мин;

R - коэффициент, равный 0,386 (для воздуха рабочей зоны) и 0,357 (для атмосферного воздуха), соответственно.

11.2. Смывы с кожных покровов. Концентрацию вещества в пробе смыва X, мкг/смыв, рассчитывают по формуле:

C - концентрация вещества в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³.

Примечание. Идентификация и расчет концентрации вещества в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.

12.1. Результат количественного анализа представляют в виде:

X - результат определения, мг/м³ (мкг/смыв);

- граница абсолютной погрешности, мг/м³ (мкг/смыв).

- граница относительной погрешности методики (табл. 3.1), %.

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: "Содержание спиродиклофена в пробе воздуха рабочей зоны менее 0,05 мг/м³; в пробе атмосферного воздуха менее 0,0008 мг/м³; в пробе смыва менее 0,05 мкг/смыв" <3>.

--------------------------------

<3> 0,05 мг/м³; 0,0008 мг/м³; 0,05 мкг/смыв - пределы обнаружения при отборе 2,0 дм³ воздуха рабочей зоны; 25 дм³ атмосферного воздуха; в пробе смыва (фиксированная площадь смыва, 200 см²), соответственно.

13.1. Организация контроля качества измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-(1 - 6).

13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Величина добавки C_д должна удовлетворять условию:

- характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

- граница абсолютной погрешности, мг/кг;

- граница относительной погрешности методики (табл. 3.1), %.

Результат контроля процедуры К_к рассчитывают по формуле:

, , C_д - среднее арифметическое результатов параллельных определений содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/кг;

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

Проводят сопоставление результата контроля процедуры (К_к) с нормативом контроля (К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (1) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (1) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости. Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):

X₁, X₂ - результаты измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), мг/кг;

R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 3.1), %.

1. ГОСТ Р ИСО 5725-(1 - 6) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

2. ГОСТ Р 53228 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".

3. ГОСТ 29227 "Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования".

4. ГОСТ 28498 "Термометры жидкостные стеклянные. Общие технические требования. Методы испытаний".

5. ГОСТ 1770 "Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия".

6. ГОСТ OIML R 111-1 "Государственная система обеспечения единства измерений (ГСИ). Гири классов E(1), E(2), F(1), F(2), M(1), M(1-2), M(2), M(2-3) и M(3). Часть 1. Метрологические и технические требования".

7. ГОСТ 2603 "Реактивы. Ацетон. Технические условия".

8. ГОСТ Р 52501 "Вода для лабораторного анализа. Технические условия".

9. ГОСТ 20490 "Реактивы. Калий марганцовокислый. Технические условия".

10. ГОСТ 4221 "Реактивы. Калий углекислый. Технические условия".

11. ГОСТ 83 "Реактивы. Натрий углекислый. Технические условия".

12. ГОСТ 5962 "Спирт этиловый ректификованный из пищевого сырья. Технические условия".

13. ГОСТ 25336 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".

14. ГОСТ 21241 "Пинцеты медицинские. Общие технические требования и методы испытаний".

15. ГОСТ 9737 "Посуда лабораторная стеклянная. Шлифы сферические взаимозаменяемые".

16. ГОСТ 9147 "Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия".

17. ГОСТ 12.1.007 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".

18. ГОСТ 12.1.019 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".

19. ГОСТ 12.1.004 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Пожарная безопасность. Общие требования".

20. ГОСТ 12.4.009 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание".

21. ГОСТ 12.0.004 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Организация обучения безопасности труда. Общие положения".

22. Правила промышленной безопасности опасных производственных объектов, на которых используется оборудование, работающее под избыточным давлением, утвержденные приказом Ростехнадзора от 25.03.2014 N 116.

23. ГОСТ 17.2.3.01 "Охрана природы. Атмосфера. Правила контроля качества воздуха населенных пунктов".

24. ГОСТ 12.1.005 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".

25. Р 2.2.2006 "Гигиена труда. Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда".