"МУК 4.1.3905-23. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств крезоксим-метила в яблочном соке методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 29.06.2023)

1. Разработаны ФГБОУ ВО "Российский государственный аграрный университет - МСХА имени К.А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов" Минсельхоза России (А.В. Довгилевич, О.И. Рыбакова, Е.Н. Тестова, П.В. Рязанцев).

2. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 29 июня 2023 г.

3. Введены впервые.

1.1. Настоящие методические указания (далее - МУК) устанавливают порядок применения метода капиллярной газожидкостной хроматографии (далее - ГЖХ) для определения уровня остаточных количеств крезоксим-метила в яблочном соке в диапазоне (0,01 - 0,10) мг/кг.

1.2. МУК носят рекомендательный характер.

2.1. Физико-химические свойства крезоксим-метила.

Название вещества по ИЮПАК: (E)-метил-2-метоксиимино-2-[2-(o-толил-окси-метил)фенил]ацетат.

Эмпирическая формула: C₁₈H₁₉NO₄.

Молекулярная масса: 313,35.

Агрегатное состояние: белое кристаллическое твердое вещество.

Цвет, запах: белый, со слабым ароматным запахом.

Давление насыщенного пара при плюс 20 °C: 2,3 x 10^-3 МПа.

Температура плавления: плюс 97,2 - 101,7 °C.

Растворимость в воде (в г/дм³, при плюс 20 °C): 0,002.

Растворимость в органических растворителях (в г/дм³, при плюс 20 °C): дихлорметан - 939; ацетон - 217; этилацетат - 123; толуол - 111; метанол - 14,9; н-гептан - 1,7.

Стабильность к гидролизу при плюс 20 °C: ДТ₅₀ 34 дня (pH 7), 7 часов (pH 9).

В биологически активных почвах в аэробных условиях крезоксим-метил быстро разрушается: ДТ₉₀ менее 3 дней.

2.2. Крезоксим-метил относится к мало опасным веществам по острой оральной (ЛД50 для крыс более 5000 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД₅₀ для крыс более 2000 мг/кг), но к умеренно опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛК₅₀ для крыс (4 часа) более 5600 мг/м³ воздуха). Не оказывает раздражающего действия на кожу и слизистую оболочку глаз кролика, не обладает мутагенными и сенсибилизирующими свойствами.

2.3. Крезоксим-метил - синтетический фунгицид из класса стробилуринов, являющихся продуцентами гриба Strobilurus tenacellus. Вещество эффективно против широкого круга грибных патогенов хлебных злаков, овощных, кормовых, технических и плодовых культур. Обладает защитным, лечебным и искореняющим действием.

3.1. Метод основан на определении крезоксим-метила методом капиллярной ГЖХ с использованием электронозахватного детектора.

Определение крезоксим-метила в яблочном соке проводится после его экстракции из образцов ацетонитрилом и дальнейшей очистки экстракта на колонках с флорисилом.

Идентификация вещества проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором колонки и условий хроматографирования.

4.1. При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в таблице 2.

5.1. Средства измерений:

- весы аналитические класса точности по ГОСТ Р 53228 - специальный (I), с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г;

- весы лабораторные общего назначения класса точности по ГОСТ Р 53228 - средний (III) с наибольшим пределом взвешивания до 400 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,5 г;

- колбы мерные на 10, 100 см³, ГОСТ 1770;

- пипетки мерные на 1,0, 2,0, 5,0 и 10,0 см³, ГОСТ 29227;

- цилиндры мерные на 10, 25, 50, 100, 250, 500 и 1000 см³, ГОСТ 1770;

- хроматографическая система, включающая:

- хроматограф газовый с микроэлектронозахватным детектором (микро-ЭЗД) с пределом детектирования по линдану меньше 0,8 x 10^-14 г/с, снабженный приспособлениями для капиллярной колонки и с возможностью использования стандартного автосамплера с дозирующим объемом от 1 до 10 мм³ для автоматического ввода пробы в хроматографическую систему;

- компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения хроматографического анализа, обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ.

5.2. Реактивы:

- крезоксим-метил, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,9%;

- азот, особой чистоты, ГОСТ 9293;

- ацетон, химически чистый;

- ацетонитрил, особой чистоты, УФ-200 нм;

- вода дистиллированная по ГОСТ 6709 и (или) бидистиллированная (вода дистиллированная, перегнанная повторно в стеклянной емкости);

- гелий, очищенный;

- n-Гексан, химически чистый;

- калий марганцовокислый, чистый для анализа, ГОСТ 20490;

- кальций хлористый, чистый;

- натрий сернокислый, безводный, химически чистый, ГОСТ 4166;

- натрий хлористый, химически чистый, ГОСТ 4233;

- этилацетат, чистый для анализа, ГОСТ 22300;

- флорисил (магния силикат, 99%) для колоночной хроматографии, зернение 60/100 меш.

5.3. Вспомогательные устройства, материалы:

- аппарат для встряхивания проб с возвратно-поступательным направлением колебаний, с максимальной загрузкой 10 кг, с амплитудой колебаний 30 мм и скоростью от 10 до 300 колебаний в минуту;

- банки полипропиленовые с крышками для экстракции вместимостью 250 см³;

- ванна ультразвуковая с потребляемой мощностью 140 Вт, рабочей частотой 50 Гц, рабочим объемом 4,5 дм³;

- вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная, ГОСТ 5556;

- виалы объемом 2 см³, закрываемые завинчивающейся или запрессовывающейся крышкой с тефлонированной резиновой прокладкой, прокалываемой микрошприцем для автоматического дозатора проб;

- виалы с тефлоновыми прокладками, стеклянные, объемом не менее 40 см³;

- воронки делительные на 250 и 500 см³, ГОСТ 25336;

- воронки лабораторные, стеклянные, ГОСТ 25336;

- испаритель ротационный вакуумный с ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы от 50 до 3000 см³, с изменяемой скоростью вращения штока испарителя от 5 до 240 об/мин, с водяной баней с антикоррозионным покрытием объемом 5 дм³ и с диапазоном температур от плюс 20 до плюс 100 °C;

- колбы конические плоскодонные на 100, 250 и 1000 см³, ГОСТ 25336;

- колбы круглодонные со шлифом объемом 100, 250 см³ и 4000 см³ ТС;

- колонка хроматографическая капиллярная из кварцевого стекла, с внутренним диаметром 0,32 мм, длиной 30 м, с неподвижной фазой, содержащей 5% дифенила и 95% диметилполисилоксана и толщиной пленки 0,25 мкм;

- колонки хроматографические, стеклянные или пластиковые, длиной 150 - 250 мм и диаметром 15 мм;

- насос диафрагменный, химически стойкий на 100%, с мощностью электропривода 245 Вт, предельным вакуумом 100 мбар/абс, с избыточным давлением 1 бар и скоростью откачки 34 дм³/мин;

- стаканы стеклянные, термостойкие объемом 100 - 1000 см³, ГОСТ 25336;

- установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4000 см³ и приемной конической колбой объемом 1000 см³;

- фильтры обеззоленные нейтральные, быстро фильтрующие, диаметром 11 см, зольность одного фильтра 0,00072 г.

6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

7.1. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на газовом хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.

8.1. Отбор проб производится в соответствии с правилами <1>.

--------------------------------

<1> Унифицированные правила отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, утвержденные заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 N 2051-79.

Пробы яблочного сока хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 5 суток.

9.1. При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха плюс (20 +/- 5) °C, относительной влажности не более 80%;

- выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

10.1. Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка колонок с флорисилом для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонках с флорисилом, установление градуировочной характеристики.

Подготовка органических растворителей.

10.1.1. Очистка ацетонитрила.

Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм³. Выдерживают его над осушителем в течение 5 - 6 часов. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см³ аппарата для перегонки растворителей.

Ацетонитрил перегоняют при температуре плюс 81,5 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 81,5 °C, отбрасывают.

10.1.2. Очистка ацетона.

Ацетон, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм³. Выдерживают его над осушителем в течение 5 - 6 часов. Затем ацетон сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см³ аппарата для перегонки растворителей, прибавляют туда марганцовокислый калий из расчета 100 мг/дм³. Ацетон перегоняют при температуре плюс 56,2 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 56,2 °C, отбрасывают.

10.1.3. Очистка этилацетата.

Этилацетат, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм³. Выдерживают его над осушителем в течение 5 - 6 часов. Затем этилацетат сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см³ аппарата для перегонки растворителей.

Этилацетат перегоняют при температуре плюс 77,1 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 77,1 °C, отбрасывают.

10.1.4. Очистка гексана.

Гексан, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм³. Выдерживают его над осушителем в течение 5 - 6 часов. Затем гексан сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см³ аппарата для перегонки растворителей.

Гексан перегоняют при температуре плюс 68,7 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 68,7 °C, отбрасывают.

10.1.5. Приготовление бидистиллированной воды.

Дистиллированную воду помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 см³ от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к ней марганцовокислый калий из расчета 1 г/дм³ и кипятят в течение 6 часов.

Собирают фракции, отогнанные при температуре плюс 100,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше плюс 100,0 °C, отбрасывают.

10.2. Приготовление растворов для проведения анализа.

10.2.1. Приготовление рабочих растворов.

10.2.1.1. Приготовление насыщенного раствора хлорида натрия.

400 г хлорида натрия переносят в стеклянную емкость объемом 1000 см³, доливают 800 см³ дистиллированной воды, ставят на 15 минут в ультразвуковую ванну, а затем на 30 минут на аппарат для встряхивания проб. Получают насыщенный раствор хлорида натрия над слоем нерастворившейся соли.

10.2.1.2. Приготовление смеси гексана с этилацетатом в соотношении 95:5 (по объему).

В мерную колбу объемом 100 см³ помещают 5 см³ этилацетата и доводят гексаном объем в колбе до метки. Раствор в колбе перемешивают и используют при очистке экстракта на колонках с флорисилом.

10.2.1.3. Приготовление смеси гексана с этилацетатом в соотношении 9:1 (по объему).

В мерную колбу объемом 100 см³ помещают 10 см³ этилацетата и доводят гексаном объем в колбе до метки. Раствор в колбе перемешивают и используют при очистке экстракта на колонках с флорисилом.

10.2.2. Приготовление градуировочных растворов.

10.2.2.1. Стандартный раствор N 1 с концентрацией крезоксим-метила 100,0 мкг/см³.

Взвешивают 10 мг крезоксим-метила в мерной колбе объемом 100 см³. Навеску растворяют в ацетоне и доводят объем до метки ацетоном. Полученный стандартный раствор N 1 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 1 хранится в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 1 месяца.

10.2.2.2. Стандартный раствор N 2 с концентрацией крезоксим-метила 10,0 мкг/см³.

Из стандартного раствора N 1 отбирают пипеткой 1 см³, помещают в мерную колбу объемом 10 см³ и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 2 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 2 хранится в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 3-х дней.

10.2.2.3. Стандартный раствор N 3 с концентрацией крезоксим-метила 1,0 мкг/см³.

Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 см³, помещают в мерную колбу объемом 10 см³ и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 3 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор N 3 хранится в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 3-х дней.

10.2.2.4. Стандартный раствор N 4 с концентрацией крезоксим-метила 0,1 мкг/см³.

Из стандартного раствора N 3 отбирают пипеткой 1 см³, помещают в мерную колбу объемом 10 см³ и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 4 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 3-х дней.

10.2.2.5. Стандартный раствор N 5 с концентрацией крезоксим-метила 0,05 мкг/см³.

Из стандартного раствора N 4 отбирают пипеткой 5 см³, помещают в мерную колбу объемом 10 см³ и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 5 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 3-х дней.

10.2.2.6. Стандартный раствор N 6 с концентрацией крезоксим-метила 0,02 мкг/см³.

Из стандартного раствора N 4 отбирают пипеткой 2 см³, помещают в мерную колбу объемом 10 см³ и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 6 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 3-х дней.

10.2.2.7. Стандартный раствор N 7 с концентрацией крезоксим-метила 0,01 мкг/см³.

Из стандартного раствора N 4 отбирают пипеткой 1 см³, помещают в мерную колбу объемом 10 см³ и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 7 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 3-х дней.

10.2.2.8. Стандартный раствор N 8 с концентрацией крезоксим-метила 0,005 мкг/см³.

Из стандартного раствора N 7 отбирают пипеткой 5 см³, помещают в мерную колбу объемом 10 см³ и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор N 8 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 3-х дней.

10.2.2.9. Стандартные растворы крезоксим-метила с концентрацией 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/см³ для внесения в контрольные образцы яблочного сока.

Методом последовательного разведения ацетоном стандартного раствора N 2 готовят растворы, содержащие по 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/см³ крезоксим-метила и используют эти растворы для внесения в контрольные образцы яблочного сока. Стандартные растворы для внесения хранятся в холодильнике при температуре плюс (4 +/- 2) °C не более 3-х дней.

10.3. Установление градуировочной характеристики.

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации крезоксим-метила в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 5-и растворам для градуировки с концентрацией 0,100; 0,050; 0,020 и 0,010 и 0,005 мкг/см³.

В инжектор хроматографа вводят по 1 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 11.2. Осуществляют не менее 5-ти параллельных измерений.

10.4. Подготовка колонки с 5 г флорисила для очистки экстракта и проверка хроматографического поведения крезоксим-метила на ней.

10.4.1. Подготовка колонки с 5 г флорисила для очистки экстракта.

В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 5 г флорисила с зернением 60/100 меш и, аккуратно постукивая по стенкам колонки, формируют слой адсорбента. На слой флорисила наносят слой безводного сернокислого натрия толщиной 1 см.

В день использования колонку последовательно промывают 10 см³ этилацетата и 20 см³ гексана, смыв отбрасывают.

10.4.2. Проверка хроматографического поведения крезоксим-метила на колонке с 5 г флорисила.

В отгонную колбу объемом 100 см³ вносят 1 см³ стандартного раствора крезоксим-метила в ацетоне с концентрацией 0,1 мкг/см³ и выпаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 30 °C. Сухой остаток растворяют в 5 см³ смеси гексана с этилацетатом в соотношении 95:5, тщательно обмывают стенки колбы и наносят на подготовленную колонку. Элюат собирают в чистую отгонную колбу объемом 100 см³, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 30 °C.

Колонку последовательно промывают 15 см³ смеси гексана с этилацетатом в соотношении 95:5 и четырьмя порциями объемом 10 см³ каждая смеси гексан с этилацетатом в соотношении 9:1. Каждую порцию собирают отдельно в чистые отгонные колбы объемом по 100 см³ и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 30 °C.

Сухой остаток каждой фракции растворяют в 1 см³ ацетона и 1 мм³ хроматографируют.

Определяют фракции, содержащие крезоксим-метил, полноту смывания с колонки и необходимый объем элюата.

Изучение поведения крезоксим-метила на колонке проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии флорисила.

11.1. Яблочный сок.

11.1.1. Экстракция.

Образец яблочного сока массой 10 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 см³, прибавляют 20 см³ насыщенного раствора хлорида натрия, 50 см³ ацетонитрила и помещают на 10 минут на аппарат для встряхивания проб.

Далее экстракт переносят в делительную воронку объемом 250 см³ и после разделения фаз в делительной воронке, нижний водный слой возвращают в полипропиленовую банку для экстракции, а верхний ацетонитрильный слой собирают в отгонную колбу объемом 250 см³ через слой безводного сульфата натрия.

Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 30 см³ ацетонитрила и помещая пробы на 5 минут на аппарат для встряхивания проб. Ацетонитрильные экстракты, объединяют в отгонной колбе объемом 250 см³ и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 30 °C.

11.1.2. Очистка экстракта на колонке с флорисилом.

Сухой остаток, полученный по п. 10.1.1, растворяют в 5 см³ смеси гексана с этилацетатом в соотношении 95:5, тщательно обмывают стенки колбы и вносят на подготовленную колонку. Колонку промывают 15 см³ смеси гексана с этилацетатом в соотношении 95:5. Элюаты отбрасывают.

Крезоксим-метил элюируют с колонки 30 см³ смеси гексан с этилацетатом в соотношении 9:1, элюат собирают в отгонную колбу объемом 100 см³ и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше плюс 30 °C.

Сухой остаток растворяют в 10 см³ ацетона и 1 мм³ хроматографируют.

11.2. Условия хроматографирования.

11.3.1. Хроматографическая система, включающая:

- хроматограф газовый с микроэлектронозахватным детектором (микро-ЭЗД) с пределом детектирования по линдану менее 0,8 x 10^-14 г/с, снабженный приспособлениями для капиллярной колонки и с возможностью использования стандартного автосамплера с дозирующим объемом от 1 до 10 мм³ для автоматического ввода пробы в хроматографическую систему;

- компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения хроматографического анализа, обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ.

Колонка хроматографическая капиллярная из кварцевого стекла, с внутренним диаметром 0,32 мм, длиной 30 м, с неподвижной фазой, содержащей 5% дифенила и 95% диметилполисилоксана и толщиной пленки 0,25 мкм.

Температура детектора - плюс 300 °C, поток газа поддувки (азот) - 30,0 см³/мин.

Температура испарителя - плюс 260 °C, газ-носитель - гелий, режим с делением потока (сплит), деление потока 30:1, общий поток 83,6 см³/мин, поток обдува септы - 3,0 см³/мин.

Температура колонки: градиентный нагрев колонки, начиная с плюс 180 °C (выдержка 1 мин) по 10 град/мин до плюс 260 °C (выдержка 2 мин). Поток газа-носителя (гелий) - 2,6 см³/мин, скорость 48,6 см/сек.

Объем вводимой пробы: 1 мм³.

Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 0,100 - 0,005 нг.

Образцы, дающие пики больше, чем стандартный раствор крезоксим-метила с концентрацией 0,1 мкг/см³, соответственно разбавляют.

12.1. Для обработки результатов хроматографического анализа используется компьютерное программное обеспечение химического анализа, которое входит в хроматографическую систему.

Альтернативная обработка результатов.

Содержание крезоксим-метила в пробах рассчитывают по формуле, без учета полноты извлечения вещества из проб (1):

где X - содержание крезоксим-метила в пробе, мг/кг;

S_ст - высота (площадь) пика стандарта, мм;

S_пр - высота (площадь) пика образца, мм;

A - концентрация стандартного раствора, мкг/см³;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³;

m - масса анализируемого образца, г;

P - содержание крезоксим-метила в аналитическом стандарте, %.

13.1. За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (2):

где X₁, X₂ - результаты параллельных определений, мг/кг или мг/дм³;

r - значение предела повторяемости (таблица 1), при этом .

При невыполнении условия (2) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

14.1. Результат анализа представляют в виде:

где - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

- граница абсолютной погрешности, мг/кг:

где - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %.

В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

15.1. Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений, а также контроль стабильности градуировочной характеристики осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1 - 6.

Контроль стабильности градуировочной характеристики.

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.

При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее двух образцов концентраций для градуировки, содержание крезоксим-метила в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,005 до 0,100 мкг/см³.

Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение (3):

где X - концентрация крезоксим-метила контрольного измерения, мкг/см³;

C - известная концентрация градуировочного раствора крезоксим-метила в ацетоне, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см³;

10 - погрешность градуировочной характеристики, %.

Если величина расхождения (A) превышает 10%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов крезоксим-метила, предусмотренных методикой выполнения измерений. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики определяют ее заново согласно п. 10.3.

15.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Величина добавки C_д должна удовлетворять условию (4):

где - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно) мг/кг, при этом:

где - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

где - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %.

Результат контроля процедуры К_к рассчитывают по формуле:

где , , C_д - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 13.1), содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки, соответственно, мг/кг.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле (5):

Проводят сопоставление результата контроля процедуры (К_к) с нормативом контроля (К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию (6):

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (6) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (6) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

15.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.

Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):

где X₁, X₂ - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;

R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %.

1. Федеральный закон от 30.03.1999 N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения".

2. ГОСТ Р 8.563 "Государственная система обеспечения единства измерений. Методики (методы) измерений".

3. ГОСТ Р ИСО 5725-(1 - 6) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

4. ГОСТ 12.0.004 "Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда. Общие положения".

5. ГОСТ 12.1.007 "Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".

6. ГОСТ 12.1.019 "Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".

7. ГОСТ 12.1.004 "Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования".

8. ГОСТ 12.4.009 "Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание".

9. ГОСТ 12.0.004 "Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда. Общие положения".

10. ГОСТ Р 53228 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".

11. ГОСТ 1770 (ИСО 1042, ИСО 4788) "Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия".

12. ГОСТ 29227 "Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования".

13. ГОСТ 25336 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".

14. ГОСТ 6709 "Вода дистиллированная. Технические условия".

15. ГОСТ Р 52501 "Вода для лабораторного анализа. Технические условия".

16. ГОСТ 5556 "Вата медицинская гигроскопическая. Технические условия".

17. ГОСТ 9293 "Азот газообразный и жидкий. Технические условия".

18. ГОСТ 2603 "Реактивы. Ацетон. Технические условия".

19. ГОСТ 20490 "Реактивы. Калий марганцовокислый. Технические условия".

20. ГОСТ 4166 "Реактивы. Натрий сернокислый. Технические условия".

21. ГОСТ 4201 "Реактивы. Натрий углекислый кислый. Технические условия".

22. ГОСТ 4233 "Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия".

23. Унифицированные правила отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, утвержденные заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 N 2051-79.

24. ГОСТ 32101-2013 "Консервы. Продукция соковая. Соки фруктовые прямого отжима. Общие технические условия".