"МУК 4.1.3724-21. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций ипродиона в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе населенных мест методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 27.12.2021)

1. Разработаны ФБУН "Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора (В.Н. Ракитский, Н.Е. Федорова, Л.П. Мухина).

2. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 27 декабря 2021 г.

3. Введены впервые.

1.1. Настоящие методические указания (далее - МУК) устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее - ВЭЖХ) для определения в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе населенных мест массовой концентрации ипродиона в диапазонах 0,1 - 1,0 мг/м³ и 0,0008 - 0,0080 мг/м³ соответственно.

1.2. МУК предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, осуществляющих контроль загрязнения воздушной среды, а также могут быть использованы организациями, осуществляющими контроль качества и безопасности объектов окружающей среды, а также условий безопасности труда работающих.

1.3. МУК носят рекомендательный характер.

2.1. Ипродион-3-(3,5-дихлорфенил)-N-изопропил-2, диоксоимидазолидинI-карбоксамид <1>. Брутто формула C₁₃H₁₃Cl₂N₃O₃. Молекулярная масса 330,2.

--------------------------------

<1> В соответствии с Международным союзом теоретической и прикладной химии (ИЮПАК, англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).

2.2. Физические и химические свойства:

- белое порошкообразное вещество без запаха;

- температура плавления 134 °C;

- давление паров 5·10^-4 мПа (при 25 °C);

- растворимость в органических растворителях при 20 °C (в г/дм³): ацетонитрил - 168; ацетон - 342; н-гексан - 0,59; дихлорметан - 450; н-октанол - 10; толуол - 147; этилацетат - 225;

- растворимость в воде при 20 °C 0,013 г/дм³;

- стабилен в кислой среде, но гидролизуется в водных растворах при pH 7 (DT₅₀ 1 - 7 дней) и значительно быстрее в щелочной среде: при pH 9 DT₅₀ < 1 часа. В водных растворах ипродион разрушается под действием ультрафиолетовых лучей, но относительно стабилен на солнечном свету.

2.3. Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность (LD₅₀) для крыс и мышей > 2000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD₅₀) для крыс и кроликов > 2000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC₅₀) для крыс > 5,16 мг/дм³ (4 часа).

2.4. Область применения. Контактный фунгицид с защитным и лечебным действием, ингибирует прорастание грибных спор и блокирует развитие мицелия, рекомендуется к использованию на подсолнечнике, рапсе, рисе, хлопке, овощных, плодовых, ягодных и зерновых культурах против широкого спектра патогенов и как протравитель семян.

3.1 При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 3.1, для соответствующих диапазонов концентраций.

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (n = 20) приведены в табл. 3.2.

4.1. Измерения концентраций ипродиона выполняют методом ВЭЖХ на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

4.2. Концентрирование ипродиона из воздушной среды осуществляют на бумажный фильтр высокой плотности, экстракцию с фильтров выполняют ацетонитрилом.

4.3. Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 1 нг. Средняя полнота извлечения с фильтров 98,1%.

5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы, приведенные в табл. 5.1 - 5.3.

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

6.3. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на жидкостном хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.

7.1. При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;

- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

8.1. Очистка ацетонитрила. Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм³ ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 часа, после чего перегоняют. Непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм³ ацетонитрила 10 г карбоната калия).

8.2. Приготовление растворов.

8.2.1. Приготовление раствора ортофосфорной кислоты с массовой долей 0,1% (0,1%-й раствор). В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 500 см³ бидистиллированной или деионизованной воды, 1,0 см³ ортофосфорной кислоты, перемешивают, доводят до метки бидистиллированной или деионизованной водой и еще раз тщательно перемешивают.

8.2.2. Приготовление подвижной фазы. В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 600 см³ ацетонитрила и 400 см³ 0,1%-го раствора ортофосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

Подвижную фазу хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

8.3. Кондиционирование хроматографической колонки для ВЭЖХ.

Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 8.2.2) при скорости подачи растворителя 0,9 см³/мин до установления стабильной базовой линии.

8.4. Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения.

8.4.1. Исходный раствор ипродиона для градуировки (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,0100 +/- 0,0005 г ипродиона, добавляют 50 - 70 см³ ацетонитрила, перемешивают, доводят ацетонитрилом до метки, вновь перемешивают. Раствор хранят в морозильной камере при температуре не выше минус 18 °C не более месяца.

Растворы N 1 - 7 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.

8.4.2. Раствор N 1 ипродиона для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ исходного раствора ипродиона с концентрацией 100 мкг/см³ (п. 8.4.1), доводят ацетонитрилом до метки, перемешивают. Градуировочный раствор N 1 хранят в морозильной камере при температуре не выше минус 18 °C в течение месяца.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом "внесено-найдено", а также контроля качества результатов методом "добавок".

8.4.3. Рабочие растворы N 2 - 6 ипродиона для градуировки (концентрация 0,05 - 1,0 мкг/см³). В 5 мерных колб вместимостью 100 см³ помещают по 0,5; 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 см³ градуировочного раствора N 1 с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 7.4.2), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по п. 8.2.2, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 6 с концентрацией ипродиона 0,05; 0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 мкг/см³ соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике при температуре 4 - 6 °C не более 7 дней.

8.5. Установление градуировочной характеристики.

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика от концентрации ипродиона в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 5 растворам для градуировки.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного раствора N 2 - 6 и анализируют в условиях хроматографирования, указанных ниже. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Устанавливают площади пиков ипродиона, на основании которых строят градуировочную зависимость.

8.6. Условия хроматографирования. Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:

- жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны;

- хроматографическая колонка стальная длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18, зернение 5 мкм;

- рабочая длина волны 225 и 240 <*> нм;

- температура колонки комнатная;

- подвижная фаза: ацетонитрил - 0,1% ортофосфорная кислота (60:40, по объему);

- скорость потока элюента 0,9 см³/мин;

- объем вводимой пробы 20 мм³;

- линейный диапазон детектирования 1 - 20 нг.

--------------------------------

<*> Хроматографирование пробы при 2 длинах волн увеличивает надежность идентификации вещества.

8.7. Подготовка фильтров для отбора проб воздуха. Диаметр бумажного фильтра должен соответствовать внутреннему диаметру фильтродержателя.

Фильтры последовательно по 3 раза промывают на воронке Бюхнера этанолом, затем ацетонитрилом порциями по 25 - 30 см, сушат с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, затем на воздухе при комнатной температуре. До использования фильтры хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

9.1. Воздух рабочей зоны. Отбор проб осуществляют в соответствии с методическими документами <2>. Воздух с объемным расходом 1 дм³/мин аспирируют через бумажный фильтр, помещенный в фильтродержатель.

--------------------------------

<2> ГОСТ 17.2.4.02 "Охрана природы (ССОП). Атмосфера. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ", ГОСТ 12.1.005 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны", ГОСТ 17.23.01 "Охрана природы. Атмосфера. Правила контроля качества воздуха населенных пунктов".

Для измерения концентрации ипродиона на уровне 0,1 мг/м³ необходимо отобрать 2,5 дм³ воздуха.

Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильнике при температуре (4 +/- 2) °C не более 10 дней. Для длительного хранения пробы помещают в морозильную камеру при температуре не выше минус 18 °C.

9.2. Атмосферный воздух. Отбор проб осуществляют в соответствии с методическими документами <3>. Воздух с объемным расходом 5 дм³/мин аспирируют через бумажный фильтр, помещенный в фильтродержатель.

--------------------------------

<3> ГОСТ 17.2.4.02 "Охрана природы (ССОП). Атмосфера. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ", ГОСТ 12.1.005 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны", ГОСТ 17.23.01 "Охрана природы. Атмосфера. Правила контроля качества воздуха населенных пунктов".

Для измерения концентрации ипродиона на уровне предела обнаружения (0,0008 мг/м³) необходимо отобрать 125 дм³ воздуха.

Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильнике при температуре (4 +/- 2) °C не более 10 дней. Для длительного хранения пробы помещают в морозильную камеру при температуре не выше минус 18 °C.

10.1. Воздушная среда. Экспонированный фильтр переносят в химический стакан вместимостью 150 см³, заливают 10 см³ ацетонитрила, помещают на встряхиватель на 10 минут. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетонитрила объемом 10 см³, выдерживая на встряхивателе по 10 минут.

Объединенный экстракт переносят (через воронку) в круглодонную колбу, упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °C почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха и остаток растворяют в 5 см³ (воздух рабочей зоны) или 2 см³ (атмосферный воздух) подвижной фазы (подготовленной по п. 8.2.2), тщательно перемешивают и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 8.5.

Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор с концентрацией 1,0 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой (не более чем в 50 раз).

11.1. Воздушная среда. Концентрацию ипродиона в пробе воздуха (X), мг/м³, рассчитывают по формуле:

где C - концентрация вещества в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³;

V_t - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20 °C) или нормальным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 0 °C), дм³.

где T - температура воздуха при отборе проб (на входе в аспиратор), °C;

P - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;

u - расход воздуха при отборе пробы, дм³/мин;

t - длительность отбора пробы, мин;

R - коэффициент, равный 0,386 для воздуха рабочей зоны и 0,357 для атмосферного воздуха.

Примечание: идентификация и расчет концентрации вещества в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.

12.1. Результат количественного анализа представляют в виде:

- результат анализа в мг/м³, характеристика погрешности , % (табл. 3.1), P = 0,95 или

где - среднее арифметическое результатов определений, мг/м³;

- граница абсолютной погрешности, мг/м³.

где - граница относительной погрешности методики (показатель точности по диапазону концентраций, табл. 3.1), %.

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность. Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: "Содержание ипродиона в пробе воздуха рабочей зоны менее 0,1 мг/м³; в пробе атмосферного воздуха - менее 0,0008 мг/м³" <4>.

--------------------------------

<4> - 0,1 мг/м³; 0,0008 мг/м³ - пределы обнаружения ипродиона при отборе 2,5 дм³ воздуха рабочей зоны; при отборе 125 дм³ атмосферного воздуха соответственно.

13.1. Организация контроля качества результатов определения осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725(1 - 6).

13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Образцами для контроля являются реальные пробы воздушной среды. Объем отобранных для контроля процедуры выполнения анализа проб воздуха должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. После отбора проб экстракт с фильтра или трубки делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики и получают результат анализа исходной рабочей пробы - X.

Во вторую часть делают добавку анализируемого компонента (величина добавки C_д должна соответствовать 50 - 150% от содержания компонента в пробе, общая концентрация не должна превышать верхнюю границу диапазона измерения) и анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы с добавкой - X'. Результаты анализа исходной рабочей пробы (X) и рабочей пробы с добавкой (X') получают в условиях повторяемости (один аналитик, использование одного набора мерной посуды, одной партии реактивов и т.д.).

Величина добавки C_д должна удовлетворять условию:

где - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой), мг/м³, мкг/смыв;

- граница абсолютной погрешности, мг/м³, мкг/смыв.

где - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 3.1), %.

Контроль проводят путем сравнения результата контрольной процедуры К_к с нормативом контроля К.

Результат контрольной процедуры К_к рассчитывают по формуле:

где , , C_д - среднее значение массовой концентрации анализируемого компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки соответственно (мг/м³, мкг/смыв).

Норматив оперативного контроля точности К рассчитывают по формуле:

Проводят сопоставление результата контрольной процедуры (К_к) с нормативом контроля (К).

Если результат контрольной процедуры удовлетворяет условию

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (1) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (1) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.

Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):

где (воздух рабочей зоны);

(атмосферный воздух);

, где X₁, X₂ - результаты измерений в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), мг/м³;

R - предел воспроизводимости (табл. 3.1, указан наибольший предел воспроизводимости для ипродиона), мг/м³.

Если выполняется условие (2), то воспроизводимость измерений считается удовлетворительной.

При превышении норматива контроля вопроизводимости эксперимент повторяют, при повторном превышении указанного норматива выясняют причины и по возможности их устраняют.

1. ГОСТ Р 53228 "Весы неавтоматического действия".

2. ГОСТ OIML R 111-1 "Государственная система обеспечения единства измерений. Гири классов точности E (индекса 1), E (индекса 2), F (индекса 1), F (индекса 2), M (индекса 1), M (индекса 1-2), M (индекса 2), M (индекса 2-3) и M (индекса 3). Часть 1. Метрологические и технические требования".

3. ГОСТ 1770 "Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия".

4. ГОСТ 29227 "Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования".

5. ГОСТ Р 52501 "Вода для лабораторного анализа. Технические условия".

6. ГОСТ 4221 "Реактивы. Калий углекислый. Технические условия".

7. ГОСТ 20490 "Реактивы. Калий марганцовокислый. Технические условия".

8. ГОСТ 83 "Реактивы. Натрий углекислый. Технические условия".

9. ГОСТ 5962 "Спирт этиловый ректификованный из пищевого сырья. Технические условия".

10. ГОСТ 18300 "Спирт этиловый ректификованный технический. Технические условия".

11. ГОСТ 6552 "Кислота ортофосфорная. Технические условия".

12. ГОСТ 9737 "Посуда лабораторная стеклянная. Шлифы сферические взаимозаменяемые".

13. ГОСТ 427 "Линейки измерительные металлические. Технические условия".

14. ГОСТ 12026 "Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия".

15. ГОСТ 25336 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".

16. ГОСТ 21241 "Пинцеты медицинские. Общие технические требования и методы испытаний".

17. ГОСТ 12.1.007 "Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".

18. ГОСТ 12.1.019 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".

19. ГОСТ 12.1.019 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".

20. ГОСТ 12.1.004 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Пожарная безопасность. Общие требования".

21. ГОСТ 12.4.009 "Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание".

22. ГОСТ 17.2.4.02 "Охрана природы. Атмосфера. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ".

23. ГОСТ 12.1.005 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".

24. ГОСТ Р ИСО 5725 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

25. Р 2.2.2006 "Общие методические требования к организации и проведению контроля содержания вредных веществ в воздухе рабочей зоны".