Границы относительной погрешности при доверительной вероятности P = 0,95 соответствуют относительной расширенной неопределенности измерений при коэффициенте охвата k = 2.
Значения показателя точности используют при:
- оформлении результатов измерений, выдаваемых лабораторией;
- оценке деятельности лабораторий на качество проведения измерений;
- оценке возможности использования результатов измерений при реализации методики измерений в конкретной лаборатории.
4.1. Измерение массовой концентрации N-нитрозоаминов (N-диметилнитрозоамин, N-метилэтилнитрозоамин, N-диэтилнитрозоамин, N-дибутилнитрозоамин, N-дипропилнитрозоамин, N-пиперидиннитрозоамин, N-пирролидиннитрозоамин, N-морфолиннитрозоамин, N-дифенилнитрозоамин) в пищевой продукции (копченые мясные, мясо- и птицепродукты) выполняют методом газохроматографического анализа с масс-спектрометрическим детектированием. Извлечение и концентрирование N-нитрозоаминов из пищевой продукции проводят с добавлением калия гидроокиси, последующей дистилляцией N-нитрозоаминов с перегретым водяным паром и концентрированием дистиллята на картриджах автоматической системы твердофазной экстракции (далее - ТФЭ), идентификации веществ по масс-спектрам и времени выхода; количественном хромато-масс-спектрометрическом определении по градуировочному графику.
Определению не мешают углеводороды, спирты. Длительность измерений 40 мин.
устройства, материалы, реактивы
5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы, приведенные в табл. 2.
Таблица 2
устройства, материалы и реактивы
6.1. При выполнении работ необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007.
6.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией и соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004, и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009.
6.3. При выполнении измерений с использованием хромато-масс-спектрометра соблюдают правила электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019 и инструкцией по эксплуатации прибора.
6.4. При работе с сосудами, работающими под давлением, необходимо соблюдать правила их безопасной эксплуатации <1>.
--------------------------------
<1> Правила промышленной безопасности опасных производственных объектов, на которых используется оборудование, работающее под избыточным давлением, утвержденные приказом Ростехнадзора от 25.03.2014 N 116.
6.5. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать гигиенические нормативы <2>, а также соответствовать ГОСТ 12.1.005.
--------------------------------
<2> ГН 2.2.5.3532-18 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны"; ГН 2.2.5.2308-07 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".
6.6. Работу с N-нитрозоаминами, стандартами, другими химическими соединениями и растворителями следует проводить в вытяжном шкафу по ТУ 25-11.1630 с использованием индивидуальных средств защиты (очки, перчатки и др.).
6.7. В лаборатории, где проводится работа с летучими N-нитрозоаминами необходимо всегда иметь 2 - 3% раствор газообразного бромоводорода (HBr) в уксусной кислоте для разрушения N-нитрозоаминов при попадании их на рабочие места и пол.
6.8. В целях разрушения летучих N-нитрозоаминов в воздухе по окончании работы помещение необходимо обработать ультрафиолетовым светом.
6.9. N-нитрозоамины хранят в специальном холодильнике в отсутствие анализируемых проб.
6.10. Работа с продуктами питания осуществляется в соответствии с санитарно-эпидемиологическими правилами <3>.
--------------------------------
<3> СанПиН 2.3.2.1078-01 "Продовольственное сырье и пищевые продукты. Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов".
7.1. К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие квалификацию не ниже инженера-химика и опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения хромато-масс-спектрометрического анализа.
8.1. При выполнении измерений в лаборатории соблюдают следующие условия:
- температура окружающего воздуха (20 +/- 5) °C;
- атмосферное давление от 84,0 до 106,7 кПа (630 - 800 мм рт. ст.);
- относительная влажность воздуха от 30 до 80%;
- напряжение в сети (220 +/- 10) В;
- частота переменного тока (50 +/- 10) Гц.
Выполнение измерений на хромато-масс-спектрометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
Контроль температуры и относительной влажности воздуха проводят по показаниям термогигрометра, контроль атмосферного давления - по показаниям барометра-анероида.
9.1. Подготовка посуды.
9.1.1. Используемую посуду замачивают в свежеприготовленном 3% растворе калия двухромовокислого в серной кислоте, промывают проточной водопроводной водой, ополаскивают бидистиллированной водой и сушат в сушильном шкафу при температуре (105 - 110) °C.
9.2. Подготовка хроматографической системы.
Подготовку хроматографа к работе осуществляют в соответствии с инструкцией по эксплуатации хроматографа.
9.2.1. Кондиционирование кварцевой капиллярной колонки.
Новую кварцевую капиллярную колонку предварительно кондиционируют, нагревая в термостате хроматографа ступенчато, начиная с 70 °C до 250 °C в течение 2 часов и выдерживают при 250 °C в течение суток. После охлаждения термостата до комнатной температуры выход колонки подсоединяют к устройству сопряжения с масс-спектрометром и проверяют стабильность нулевой линии при рабочей температуре термостата колонок.
Таблица 3
Параметры и условия режима работы хромато-масс-спектрометра
Записывают нулевую линию при установленных режимных параметрах. При отсутствии флуктуации приступают к работе.
9.3.1. Приготовление 3%-го раствора калия двухромовокислого в серной кислоте.
В термостойкий стакан вместимостью 2 дм3 помещают 50 г калия двухромовокислого, осторожно приливают 1 дм3 концентрированной серной кислоты по палочке порциями по 5 - 7 см3, тщательно перемешивая. Раствор используют в день приготовления.
9.3.2. Приготовление 60%-го раствора серной кислоты.
В термостойкий химический стакан стеклянным цилиндром помещают 36 см3 бидистиллированной воды, при непрерывном помешивании стеклянной палочкой приливают стеклянным цилиндром 60 см3 концентрированной серной кислоты. Раствор охлаждают. Срок хранения неограничен (хранят в посуде из темного стекла).
9.3.3. Приготовление 2 - 3%-го раствора бромисто-водородной кислоты.
В мерную колбу вместимостью 1000 см3 цилиндром помещают 43,5 см3 бромисто-водородной кислоты (46% раствор), содержимое колбы доводят до метки бидистиллированной водой и тщательно перемешивают. Срок хранения - месяц (хранят в посуде из темного стекла).
Исходный раствор N-нитрозоаминов готовят из ГСО C = 2 мг/см3 или 2000 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 25 см3 дозатором добавляют метилового спирта в объеме 10 см3, вводят микрошприцем по 0,002 см3 ГСО N-нитрозоаминов (C = 2 мг/см3). Массовая концентрация N-нитрозоаминов в исходном растворе составляет 0,16 мкг/см3. Срок хранения раствора не более пяти часов.
9.3.5. Приготовление градуировочных растворов.
Градуировочные растворы N-нитрозоаминов готовят в мерных колбах вместимостью 100 см3. Для этого в каждую колбу вносят дозатором по 50 см3 бидистиллированной воды и добавляют микрошприцом или дозатором исходный раствор для градуировки в соответствии с табл. 4, содержимое колбы доводят до метки бидистиллированной водой и тщательно перемешивают. Срок хранения растворов при температуре от 4 до 10 °C не более 5 часов.
Таблица 4
Концентрация (мкг/г) рассчитана на навеску колбасного продукта 20 г.
9.4. Построение градуировочной характеристики.
Градуировочные характеристики в виде линейной зависимости между площадью пика молекулярных ионов N-нитрозоаминов на хроматограмме (мВ) и количеством определяемого компонента в растворе (нг) устанавливают методом абсолютной градуировки. Установление градуировочной характеристики для каждого компонента, обработка и хранение результатов градуировки проводят автоматически с использованием программно-аппаратного комплекса.
Градуировочный раствор (табл. 4) помещают в перегонную колбу объемом 500 см3 установки для перегонки ((tпарообразователя = (100 +/- 5) °C и tколбы с градуировочным раствором = (80 +/- 5) °C), добавляют 1,5 г калия гидроокиси. С помощью перегретого водяного пара, образуемого в парообразователе, выполняют процедуру отгонки. Нагрев перегонной колбы с пробой продукта и паровика осуществляют с помощью закрытых электрических плиток. Дистиллят, сконденсированный в холодильнике, собирают в объеме 70 см3 в коническую колбу-приемник. Затем дистиллят пропускают через угольный картридж объемом 6 см3 автоматической системы ТФЭ, элюирование осуществляют хлористым метиленом объемом 2,5 см3.
По истечении 30 мин экстракт хлористого метилена объемом 0,002 см3 через испаритель вводят с помощью автосамплера в хроматографическую колонку хроматографа и анализируют при условиях по п. 9.2.2. Каждый градуировочный раствор хроматографируют два раза. Процедуру повторяют аналогично для каждого градуировочного раствора в порядке возрастания содержания N-нитрозоаминов. На полученной хроматограмме определяют площади пиков (безразмерные компьютерные единицы, бке) молекулярных ионов для N-нитрозоаминов m/z, рассчитывают средние значения площади пиков N-нитрозоаминов для каждого градуировочного раствора и проверяют приемлемость результатов параллельных определений площадей пиков.
Выходные сигналы считают приемлемыми при выполнении условия:
Smax - максимальная площадь пика для соответствующего градуировочного раствора, мВ;
Smin - минимальная площадь пика для соответствующего градуировочного раствора, мВ;
rs - предел повторяемости площади пика градуировочного раствора, rs = %.
Предел повторяемости площади пика представляют в виде рассчитанного относительного стандартного отклонения.
Результат проверки признается положительным при выполнении условия (1). Если условие не выполняется, то измерение градуировочных растворов повторяют, устранив причину неудовлетворительных результатов.
По полученным результатам рассчитывают среднее значение площади пика для каждого раствора и строят градуировочную характеристику.
Градуировочная характеристика признается приемлемой, если коэффициент корреляции градуировочной характеристики не менее значения 0,995, в противном случае измерение градуировочных растворов повторяют, устранив причину неудовлетворительных результатов.
Процедуру градуировки проводят 1 раз в 3 месяца, а также при внедрении методики в практику лаборатории, после ремонта хромато-масс-спектрометра или при получении отрицательных результатов контроля стабильности градуировочной характеристики по п. 9.5.
Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят 1 раз в квартал в анализируемой серии измерений. Образцами для контроля стабильности являются градуировочные растворы, выбранные таким образом, чтобы массовая концентрация N-нитрозоаминов соответствовала нижней, верхней границам и середине диапазона построения градуировочной характеристики. Градуировка признается стабильной при выполнении условия:
|mГХ m - mГХ| <= 0,08·mГХ, где (2)
mГХ - расчетное содержание N-нитрозоаминов в градуировочном растворе, нг;
mГХm - результат измерения содержания N-нитрозоаминов в образце для градуировки, нг.
При невыполнении условия стабильности градуировочной характеристики измерения повторяют с другим градуировочным раствором. При повторном невыполнении условия стабильности градуировочной характеристики выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики.
9.6. Отбор и хранение проб.
Отбор проб проводят в соответствии с нормативно-технической документацией на конкретный вид анализируемой продукции.
Допускается хранение отобранных образцов в морозильной камере при температуре минус 18 до минус 8 °C от 1 до 3 суток в зависимости от сроков реализации продукции.
10.1. Выполнение измерений пробы пищевого продукта (копченые мясные, мясо- и птицепродукты).
От пробы отбирают две навески массой 20 - 50 г. Массу навесок регистрируют до второго знака после запятой. Каждую навеску помещают в перегонную колбу вместимостью 500 см3 установки для перегонки ((tпарообразователя = (100 +/- 5) °C и tколбы с образцом пищевого продукта = (80 +/- 5) °C), соединенную с паровиком и прямым холодильником, добавляют 1,5 г калия гидроокиси, 50 - 100 см3 бидистиллированной воды и N-нитрозоамины отгоняют с перегретым водяным паром, собирая 70 см3 дистиллята. Нагрев перегонной колбы с пробой продукта и паровика осуществляют с помощью закрытых электрических плиток. Затем дистиллят пропускают через угольный картридж объемом 6 см3 автоматической системы ТФЭ, элюирование осуществляют хлористым метиленом объемом 2,5 см3. По истечении 30 мин экстракт хлористого метилена объемом 0,002 см3 через испаритель вводят в хроматографическую колонку хроматографа.
На хроматограмме с помощью программного обеспечения вычисляют площадь пика и по градуировочным характеристикам находят массу каждого компонента (mГХ, нг) в растворе хлористого метилена.
11.1. Массовую концентрацию (C, мкг/г) каждого определяемого компонента (N-нитрозоамина) в пробе пищевого продукта (копченые мясные, мясо- и птицепродукты) рассчитывают по формуле:
, где (3)mГХ - масса каждого N-нитрозоамина, установленная по градуировочной характеристике, нг;
m - масса пробы пищевого продукта, взятая для анализа, г;
1000 - коэффициент перевода нг в мкг.
11.2. За окончательный результат измерения принимают среднее арифметическое значение двух результатов измерений (
r - предел повторяемости, %. Значение предела повторяемости для каждого определяемого N-нитрозоамина приведено в табл. 5.
При невыполнении условия (4) получают дополнительно еще два результата измерений. За результат измерений принимают среднее арифметическое четырех результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, для которых выполняется условие:
CR0,95(4) - критический диапазон, %. Значение критического диапазона N-нитрозоамина приведено в табл. 5.
При невыполнении условия (5) в качестве окончательного результата измерений принимают медиану четырех результатов измерений, полученных в условиях повторяемости (параллельных определений). Дополнительно выявляют и устраняют причины, приводящие к невыполнению условий (4) и (5).
Таблица 5
пищевой продукции, значения пределов повторяемости,
критического диапазона, внутрилабораторной прецизионности
при доверительной вероятности P = 0,95
12.1. Результат измерений в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде:
, мкг/г, где , где (6)Численное значение
13.1. Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории организуют и проводят путем проведения:
- проверки приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях повторяемости;
- контроля внутрилабораторной прецизионности;
- оперативный контроль правильности процедуры выполнения измерений (с применением метода добавок);
- контроля стабильности результатов измерений.
13.2. Контроль внутрилабораторной прецизионности.
Образцами для контроля результатов измерений, получаемых в условиях внутрилабораторной прецизионности, являются образцы продукта (копченые мясные, мясо- и птицепродукты) с внесенными в них добавками растворов N-нитрозоаминов, подготовленные в соответствии с п. 9.3.
При контроле внутрилабораторной прецизионности абсолютное расхождение двух результатов анализа одной и той же пробы, при вариации факторов время, оператор, не должно превышать предела внутрилабораторной прецизионности Rл:
C1 и C2 - результаты измерений концентраций N-нитрозоаминов, полученные в условиях внутрилабораторной прецизионности при вариации факторов время, оператор, мкг/г;
Rл - предел внутрилабораторной прецизионности, значение предела внутрилабораторной прецизионности приведено в табл. 5.
Если условие (7) не выполняется, процедуру повторяют. При повторном превышении предела внутрилабораторной прецизионности измерения приостанавливают до выяснения причин, приводящих к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
13.3. Оперативный контроль процедуры измерений с использованием метода добавок.
Оперативный контроль процедуры выполнения измерений с использованием метода добавок проводят путем сравнения результата отдельно взятой контрольной процедуры Кк с нормативом контроля К.
Результат контрольной процедуры Кк рассчитывают по формуле:
, где (8)Cд - величина добавки.
В качестве добавки используют растворы N-нитрозоаминов, приготовленные по п. 9.3.4.
Норматив контроля К рассчитывают по формуле:
, где (9)Процедуру измерений признают удовлетворительной, при выполнении условия:
При невыполнении условия (10) контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении условия (10) измерения приостанавливают до выяснения причин, приводящих к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
13.4. Оперативный контроль процедуры измерений, а также реализуемые процедуры контроля стабильности результатов выполняемых измерений, приводят в документах лаборатории, устанавливающих порядок и содержание работ по организации методов контроля стабильности результатов измерений в пределах лаборатории.
1. СанПиН 2.3.2.1078-01 "Продовольственное сырье и пищевые продукты. Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов".
2. ГН 2.2.5.3532-18 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".
3. ГН 2.2.5.2308-07 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".
4. Приказ Ростехнадзора от 25.03.2014 N 116 "Об утверждении Федеральных норм и правил в области промышленной безопасности "Правила промышленной безопасности опасных производственных объектов, на которых используется оборудование, работающее под избыточным давлением".
5. ГОСТ Р ИСО 5725-6 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике".
6. ГОСТ Р 53228 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".
7. ГОСТ 12.1.019 "Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".
8. ГОСТ 12.0.004 "Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда. Общие положения".
9. ГОСТ 12.1.004 "Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования".
10. ГОСТ 12.1.005 "Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".
11. ГОСТ 12.1.007 "Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".
12. ГОСТ 12.4.009 "Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание".
13. ГОСТ Р 53228 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".
14. ГОСТ Р 52501 "Вода для лабораторного анализа. Технические условия".
15. ГОСТ 25336 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".
16. ГОСТ 2062 "Реактивы. Кислота бромистоводородная. Технические условия".
17. ГОСТ 61 (СТ СЭВ 5375) "Реактивы. Кислота уксусная. Технические условия".
ГОСТ 9293 (ИСО 2435) "Азот газообразный и жидкий. Технические условия".
19. ГОСТ 1770 "Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия".
20. ГОСТ 3022 "Водород технический. Технические условия".
21. ГОСТ 4204 (СТ СЭВ 3856) "Реактивы. Кислота серная. Технические условия".
22. ГОСТ 12026 "Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия".
23. ГОСТ 24363 "Реактивы. Калия гидроокись. Технические условия".
24. ГОСТ 28311 "Дозаторы медицинские лабораторные. Общие технические требования и методы испытаний".
25. ГОСТ 9792 "Колбасные изделия и продукты из свинины, баранины, говядины и мяса других видов убойных животных и птиц. Правила приемки и методы отбора проб".
26. ТУ 2.833.106 "Микрошприцы серии МШ-10".
27. ТУ 2121-278-00204197 "Сульфаминовая кислота".
28. ТУ 16-531.743 "Электрошкаф СНВ С-4,5.4,5.4/3-И1. Технические условия".
29. ТУ 25-11.1630 "Шкаф вытяжной химический".
30. ТУ 0271-001-45905715 "Гелий газообразный высокой чистоты (сжатый). Технические условия".
31. ТУ 3645-032-00220531 "Редукторы баллонные одноступенчатые малогабаритные для газопламенной обработки".
Вернуться в "Каталог нормативных документов"
Источник информации: https://internet-law.ru/documents/prod/metodicheskie-ukazaniya/1/muk_4_98702.html
На правах рекламы:
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||