"Методические указания по измерению концентраций красителей - кубозолей серого С и ярко-розового Ж методом тонкослойной хроматографии в воздухе рабочей зоны"
(утв. Минздравом СССР 10.10.1991 N 5980-91)

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов системы здравоохранения России и других заинтересованных министерств и ведомств.

Методические указания разрабатываются и утверждаются с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны их предельно допустимым концентрациям (ПДК) - санитарно-гигиеническим нормативам, утвержденным Министерством здравоохранения СССР, оценки эффективности внедренных санитарно-гигиенических мероприятий, установления необходимости использования средств индивидуальной защиты органов дыхания, оценки влияния вредных веществ на состояние здоровья работающих и др.

Включенные в данный выпуск Методические указания подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны" и ГОСТ 12.1.016-79 "ССБТ. Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ" и обеспечивают избирательное измерение концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны в присутствии сопутствующих компонентов на уровне 0,5 ПДК. Погрешность измерений концентраций вредного вещества, состоящая из суммы неисключенных систематической и случайной погрешностей, не превышает 25%.

Методические указания одобрены Проблемной комиссии "Научные основы гигиены труда и профессиональной патологии" и являются обязательными при осуществлении вышеуказанного контроля.

Ответственные за выпуск: С.И. Муравьева, Г.А. Дьякова, К.М. Грачева.

Кубозоль серый С - динатриевая соль кислого дисернокислого эфира лейкосоединения бенз-1-хлор-6,7-бензо-2-тионафтен-5-бром-2-инзолиндиго.

Кубозоль ярко-розовый Ж - динатриевая соль кислого дисерно-кислого эфира лейкосоединения 4,4-диметил-6,6-дихлортиоиндиго.

Кубозоль серый С (КСС) представляет собой порошок от серого до коричневого цвета, ярко-розовый Ж (КРЖ) - порошок бледно-розового цвета. Хорошо растворимы в воде, 50-процентном этиловом и метиловом спирте, практически нерастворимы в кислотах, щелочах и органических растворителях.

В производстве каждый из кубозолей нарабатывают на отдельных технологических линиях.

В воздухе находятся в виде аэрозоля.

КСС и КРЖ относятся к малотоксичным и малоопасным соединениям. При длительном воздействии влияют на общеобменные процессы.

ПДК в воздухе рабочей зоны - 1 мг/куб. м.

Определение основано на хроматографировании КСС и КРЖ в тонком слое силикагеля на пластинках Силуфол ИУ-254.

Отбор проб воздуха проводят с концентрированием на фильтры.

Нижний предел измерения концентрации веществ в анализируемом растворе: хроматографическим методом - 2 мкг, спектрофотометрическим - 8 мкг.

Нижний предел измерения содержания веществ в воздухе - 0,25 мг/куб. м (при отборе 160 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций от 0,25 до 2,5 мг/куб. м.

Измерению не мешает присутствие пиридина.

Суммарная погрешность измерения методом тонкослойной хроматографии не превышает 20%, методом спектрофотометрии - 17%.

Время выполнения измерения для каждого кубозоля, включая отбор проб, 2,5 часа.

Аспирационное устройство.

Камеры хроматографические с притертой крышкой, ГОСТ 20565-75.

Фильтродержатель.

Фильтр АФА-ВП-20.

Микрошприц МШ-10, ГОСТ 8043-74.

Пластины хроматографические Силуфол-254.

Бюксы с притертыми крышками.

Осветитель ОЛД, ГОСТ 12.2.025-76.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 25, 100 мл.

Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 0,1; 0,2; 1,0; 5,0 мл.

Пробирки, ГОСТ 10515-69.

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74.

Спектрофотометр СФ-46 или другой марки.

КСС, КРЖ - кубозоли серый С и ярко-розовый Ж, выпускные формы.

Спирт этиловый, ГОСТ 5963-67, 50-процентный раствор.

Спирт п-бутиловый, ГОСТ 6006-61, х.ч.

Ацетон, ГОСТ 2603-79, х.ч.

Аммиак, ГОСТ 3760-64, х.ч.

Подвижный растворитель - н-бутан-ацетон-аммиак-вода (50:50:40:10).

Стандартные растворы ККС и КРЖ с содержанием 1,0 мг/мл готовят путем растворения 0,1 г КСС (или КРЖ) в 100 мл 50-процентного этилового спирта. Растворы устойчивы 7 дней в темном месте.

Стандартные растворы с содержанием 0,1 мг/мл готовят путем разбавления основного стандартного раствора 50-процентным этиловым спиртом. Растворы устойчивы 5 дней в темном месте.

Рабочие стандартные растворы с содержанием КСС (или КРЖ) от 0,2 - 0,4 - 0,6 - 0,8 - 1,0 до 2,0 мг/мл готовят путем соответствующего разбавления основных стандартных растворов. Растворы готовят в день анализа.

Воздух с объемным расходом 10 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-20, помещенный в фильтродержатель. Для измерения 1/2 ПДК каждого из растворителей следует отобрать 80 л воздуха. Пробы сохраняются в течение 5 дней в закрытых бюксах.

Хроматографическую камеру заполняют системой подвижного растворителя - н-бутан-ацетон-аммиак-вода (5:5:4:1 по объему). Объем подвижного растворителя должен быть в таком количестве, чтобы пластина была погружена в него не более чем на 0,6 - 0,8 см над уровнем дна.

Фильтр с отобранной пробой КСС или КРЖ промывают трижды по 5 мл 50-процентного этилового спирта и упаривают с помощью ротационного испарителя до объема 0,2 мл. Степень десорбции с фильтра КСС - 97,1%, КРЖ - 92,1%.

Пробу в количестве 0,01 мл наносят на хроматографическую пластинку так, чтобы диаметр пятна не превышал 0,5 см. Параллельно на пластину наносят серию стандартных растворов с содержанием от 2 до 20 мкг КСС или КРЖ.

Пластину помещают в хроматографическую камеру, содержащую подвижный растворитель. Хроматограмму развивают до поднятия растворителя на уровень 10 мм от верхнего края пластин и влажную облучают УФ-светом. На пластине проявляются красители, которые светятся ярко-голубым цветом, КРЖ при высыхании приобретает ярко-розовое окрашивание.

КСС - 0,89 +/- 0,05

КРЖ - 0,80 +/- 0,05

Количественное определение можно проводить двумя способами:

1 способ. Количественное содержание КСС (КРЖ) в хроматографируемой пробе проводят путем измерения площадей пятен и сравнения их с площадью пятна стандарта.

Площадь пятен измеряют планиметром или с помощью прозрачной бумаги, которую накладывают на миллиметровую бумагу и вычисляют площадь обведенного пятна.

Концентрацию КСС (КРЖ) "С" в воздухе (в мг/куб. м) вычисляют по формуле:

где:

А - содержание КСС, КРЖ на пятне стандарта, мкг;

в - общий объем пробы, мл;

б - объем пробы, взятый для анализа, мл;

V - объем воздуха (в л), отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям (см. Приложение 1).

2 способ. Спектрофотометрическое определение КСС и КРЖ.

Светящиеся пятна обводят на пластине карандашом, счищают в химический стаканчик, заливают 4 мл 50-процентного этилового спирта. Через 30 минут определяют оптическую плотность исследуемых растворов при длине волны для КСС - 270 нм, КРЖ - 350 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения нулевой стандарт, не содержащий определяемого вещества.

Для построения калибровочного графика измеряют оптическую плотность стандартных растворов КСС (или КРЖ) от 2 до 20 мкг. По калибровочному графику находят содержание красителя КСС (или КРЖ) в анализируемой пробе.

Концентрацию КСС (КРЖ) "С" в воздухе (в мг/куб. м) вычисляют по формуле:

где:

а - количество КСС (или КРЖ), найденное в анализируемом объеме раствора пробы, мл;

б - объем раствора пробы, взятый для анализа, мл;

в - общий объем раствора пробы, мл;

V - объем воздуха (в л), отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям (см. Приложение 1).

Приведение объема воздуха к условиям по ГОСТ 12.1.016-79 (температура 20 °С, давление 760 мм рт. ст.) проводят по следующей формуле: