"Методические указания по определению фуратиокарба (промета) в растительном материале хроматографическими методами"
(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 N 6143-91)

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

Фуратиокарб (промет) - O-п-бутил-о(2,2-диметил-2,3-дигидробензофуран-7-ил)-N,N-диметил-N,N-тиодикарбомат.

МДУ в сахарной свекле - не допускается.

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении промета из анализируемого образца органическим растворителем, затем проводят гидролиз при pH II и продукт гидролиза определяют методом реакционной газожидкостной хроматографии в виде производного динитробензола, а именно 7-(2,4-динитрофенокси)-2,2-диметил-2,3-дигидро-бензофурана, с использованием детектора постоянной скорости рекомбинации (ДПР), а также в тонком слое силикагеля с последующим применением для обнаружения зон локализации препарата проявляющего реагента.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

2.1.3. Условия концентрации, очистки и последующего хроматографического определения промета позволяют избирательно определять препарат в присутствии ФОС, пиретроидов.

Ацетон, осч, ТУ 6-09-3513-86.

Гексан, ч, ТУ 6-09-3375-78.

Этилацетат, чда, ГОСТ 22300-81.

2,4-динитрофторбензол, 1-процентный раствор в ацетоне.

NaOH, хч, ГОСТ 4328-77.

Азот в баллоне, особой чистоты, ГОСТ 9293-74.

Неподвижная фаза 5% SE-30 на Хроматоне N-AW-DMCS.

Силикагель марки КСК.

Основной стандартный раствор (ОСР) фуратиокарба с концентрацией 100 мкг/мл готовят взятием навески 10 мг (0,0100 г) хч и растворением в ацетоне в мерной колбе емкостью 100 мл. Хранят в холодильнике в течение 6-ти месяцев.

Рабочие стандартные растворы с содержанием 10 мкг/мл, 1 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением ОСР ацетоном. Хранить в холодильнике в течение 2-х месяцев.

Буферный раствор - pH = 11 - готовят следующим образом: смешивают 50 мл 0,05 М водного раствора двузамещенного фосфата натрия и 4,1 мл 0,1 М раствора NaOH в мерной колбе на 100 мл.

Марганцевокислый калий, хч, ГОСТ 20490-75.

Соляная кислота, конц., ч, ГОСТ 3118-67.

о-Толидин, ТУ 6-09-2232-75, 1-процентный раствор в ацетоне.

Газовый хроматограф серии "Цвет" с ДПР.

Колонки стеклянные длиной 1 м, диаметр 3,5 мм.

Ротационный испаритель типа ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.

Колбы грушевидные (круглодонные), ГОСТ 25336-82, емкостью 500 мл, 250 мл, 100 мл, 50 мл ОКШ 500-29/50-14.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, емкостью 50, 100 мл.

Пробирки мерные на шлифах, ГОСТ 1770-74, емкостью 5 и 10 мл.

Аппарат для встряхивания, ТУ 25-11-917-79.

Колба Бунзена, ГОСТ 25336-82.

Делительные воронки, ГОСТ 25336-82, емкостью 1000 мл, 25 мл.

Колбы конические, ГОСТ 25336-82, емкостью 500 мл.

Пипетки, ГОСТ 1770-74, на 0,1; 0,2; 1; 5; 10 мл.

Микрошприц на 10 мкл МШ-10, ТУ Е-2833024.

Секундомер СД Спр 1.2000, ГОСТ 5072-79.

Пластинки для хроматографии "Силуфол" (ЧССР, Хемапол).

Камера хроматографическая, ГОСТ 25336-82.

Камера для хлорирования.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.

2.4.1. Отбор проб

Отбор, хранение и доставка проб производятся в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Минздравом СССР, N 2057-79 от 21.08.79.

2.4.2. Подготовка колонки для ГЖХ

Колонку заполняют стандартной фазой (5% SE-30 на Хроматоне N-AW-DMCS), подключив ее к вакууму водоструйного насоса. Заполненную колонку кондиционируют в термостате колонок в течение 6 часов без подключения к детектору, продувая азотом (60 мл/мин.) и постепенно поднимая температуру от 100 °C до 250 °C. Затем колонку присоединяют к детектору.

2.5.1. Экстракция, очистка и получение 2,4-динитробензольного производного промета

Кукуруза. 25 г подготовленной пробы кукурузы (зерно с початком) помещают в плоскодонную колбу емкостью 500 мл, заливают 100 мл ацетона или метанола, перемешивают тщательно в течение 20 мин. Затем фильтруют на воронке Бюхнера с фильтром "синяя лента", остаток на фильтре промывают 2 x 30 мл ацетона или метанола. Объединенный фильтрат разбавляют 300 мл воды и 100 мл гексана. Энергично встряхивают в делительной воронке, верхний гексановый слой, содержащий промет, собирают в круглодонную колбу на 300 мл. Экстракцию повторяют еще 2 x 30 мл. Объединенный гексановый экстракт упаривают на ротационном испарителе в вакууме водоструйного насоса при температуре бани ~ 40 °C досуха.

В случае необходимости проводят очистку проб следующим образом. Остаток после упаривания растворяют в 5 - 10 мл гексана и пропускают через слой силикагеля марки КСК, слой 2 см. Элюированный гексан отбрасывают. Промет извлекают 10 мл смеси гексан:этилацетат (1:1). Элюат собирают в грушевидную колбочку на 50 мл и упаривают на ротационном испарителе при температуре бани 40 °C досуха. К сухому остатку прибавляют 15 мл буферного раствора с pH 11. Колбу закрывают плотно пробкой и проводят гидролиз в течение 60 мин. на водяной бане при температуре 60 °C. Затем колбу быстро охлаждают в ледяной воде. К охлажденной реакционной смеси прибавляют 0,5 мл 1-процентного раствора 2,4-динитрофторбензола в ацетоне, закрывают пробкой и нагревают содержимое колбы на водяной бане при 60 °C в течение 30 мин. Спустя 30 мин. колбу с реакционной смесью охлаждают в ледяной воде, прибавляют 5 - 10 мл гексана, энергично встряхивают и отделяют гексановый слой в делительной воронке. Раствор гексана используют для определения промета методом газожидкостной хроматографии.

Хроматографический анализ

Газовый хроматограф серии "Цвет" с ДПР.

Колонка хроматографическая стеклянная длиной 1,0 м, внутренний диаметр 3,5 мм.

Неподвижная фаза - 5% SE-30 на Хроматоне N-AW-DMCS.

Температура колонки - 215 °C.

Температура испарителя - 250 °C.

Температура детектора - 260 °C.

Газ-носитель с расходом 65 - 70 мл/мин.

Скорость диаграммной ленты - 240 мм/час.

Вводимый объем - 3 мкл.

Время удерживания - 4,0 мин.

Нижний предел измерения фуратиокарба 0,3 нг.

Количественную оценку проводят методом соотношения со стандартом.

Расчет результатов проводят по формуле:

где:

A - количество препарата, найденное на хроматограмме при сравнении со стандартом, мкг;

P - навеска пробы, г.

Соблюдать все необходимые требования при работе в химических лабораториях.