"Методические указания по определению цидиала (фентоата) в почве хроматографическими методами"
(утв. Минздравом СССР 08.06.1989 N 5030-89)

Цидиал - O,O-Диметил-S-[альфа-(этоксикарбонил)бензил]дитиофосфат - (фентоат, эдоан, паптион).

Структурная формула:

Выпускается в виде 50-процентного концентрата эмульсии, смачивающегося порошка, дуста, гранул ПДК в воздухе рабочей зоны 0,15 мг/куб. м, МДУ в плодах 0,1 мг/кг, ОДК в почве 0,4 мг/кг.

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении цидиала из почвы смесью ацетон - 0,05 н водный раствор хлористого кальция (1:1) с последующей реэкстракцией в н-гексан и дальнейшем определении методами газожидкостной (ГЖХ) и тонкослойной (ТСХ) хроматографии.

ГЖХ определение проводят с термоионным детектором (ТИД), колонка стеклянная 1000 х 3,5 мм, фаза 5% SE-30 на хроматоне N-AW-НМДS.

ТСХ определение проводят после очистки экстракта углем ОУ-А. Хроматографирование проводят в тонком слое пластинок "Силуфол", подвижная фаза гексан - ацетон 3:1; проявляющий реагент либо на основе бромфенолового синего с азотнокислым серебром, либо на основе 4-(п-нитробензил)пиридина с тетраэтиленпентамином.

2.1.2. Метрологическая характеристика методов

ГЖХ. Диапазон линейной зависимости величины хроматографического сигнала от количества введенного в хроматограф препарата цидиала 0,5 - 15 нг. Нижний предел обнаружения цидиала 0,5 нг. Нижний предел обнаружения цидиала в почве 0,004 мг/кг.

C - среднее значение определения 93%.

S - стандартное отклонение 95%.

Доверительный интервал среднего при р = 0,95, n = 15 +/- 5,6%.

ТСХ. Нижний предел обнаружения цидиала на пластинке обоими реагентами 1 мкг. Нижний предел обнаружения цидиала в почве 0,04 мг/кг.

Среднее значение определения 94%.

S - стандартное отклонение 7,8%.

Доверительный интервал среднего при р = 0,95, n = 10 +/- 6%.

2.1.3. Избирательность метода

Ацетон, х.ч., ГОСТ 2603-79

н-Гексан, х.ч., ТУ 6-09-3375-73

Бензол, х.ч., ГОСТ 5955-81

Кальций хлористый, ч., ГОСТ 4468-77

Уголь активированный ОУ-А

Натрия сульфат безводный, ч., ГОСТ 4166-76

Пластинки "Силуфол" (15 х 25 см), "Хемапол", ЧССР

Бумажные фильтры легко фильтрующие (красная лента)

Хроматон N-AW-НМДS (0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30 (Хемапол, ЧССР)

Водород из баллона или получаемый из генератора водорода

Воздух из баллона или нагнетаемый компрессором

Основной стандартный раствор (ОСР) цидиала в ацетоне 500 мкг/мл (0,5 мг/мл) готовят растворением 50 мг пестицида в мерной колбе в 100 мл ацетона. Хранят в холодильнике не более 6 месяцев.

Рабочие стандартные растворы цидиала 50 мкг/мл (а), 5 мкг/мл (б) и 1 мкг/мл (в) готовят разведением основного стандартного раствора:

а) 1 мл ОСР до 10 мл ацетоном; б) 1 мл раствора "а" до 10 мл ацетоном; в) 1 мл раствора "б" до 5 мл ацетоном. Рабочие стандартные растворы хранят в холодильнике не более 1 месяца.

Проявляющие реагенты:

N 1 - а) Раствор 0,05 г бромфенолового синего в 10 мл ацетона разбавляют до 100 мл 1-процентным водно-ацетоновым (вода - ацетон 1:3) раствором азотнокислого серебра; б) 5-процентный водный раствор уксусной кислоты. Реактивы устойчивы в течение 2-х месяцев.

N 2 - а) 1-процентный раствор 4-(п-нитробензил)пиридина в ацетоне; б) 10-процентный раствор тетраэтиленпентамина в ацетоне. Используют свежеприготовленные растворы.

Хроматограф марки "Цвет" или аналогичный с ТИД

Колонка хроматографическая стеклянная (1000 х 3,5 мм), заполненная хроматоном N-AW-НМДS с 5% SE-30

Прибор для отгонки растворителей (ротационный вакуумный испаритель), тип ИР-1М, ТУ 25-11-917-76

Аппарат для встряхивания колб АВУ-60, ТУ 64-1-2451-78

Колбы мерные вместимостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74

Колбы конические с притертыми пробками вместимостью 50, 250 мл, ГОСТ 10394-72

Колбы грушевидные вместимостью 50 мл ОКШ 50-14/23 ТС, ГОСТ 10394-72

Воронки химические, ГОСТ 8613-75

Воронки делительные вместимостью 250 мл

Пипетки на 0,1; 1; 5; 10 мл, ГОСТ 1770-74

Микрошприцы на 10 мкл МШ-10, ТУ Е-2.833.024

Хроматографическая камера, ГОСТ 10565-75

Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10391-74

2.4.1. Отбор, хранение и доставка проб

Отбор проб почвы производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 N 2051-79.

2.4.2. Подготовка образца для установления воздушно-сухого веса анализируемой почвы

Почву перед анализом просеивают через почвенное сито и анализируют в естественно-влажном состоянии. Параллельно с анализируемым образцом готовят навеску почвы и высушивают ее на воздухе при комнатной температуре для установления содержания влаги.

2.5.1. Экстракция

2.5.2. Очистка экстракта

Для определения цидиала методом ТСХ полученный экстракт необходимо очистить, н-гексан (1 мл) упарить досуха. К сухому остатку прибавить 2 мл смеси бензол - ацетон 1:3 и 0,1 г угля ОУ-А, встряхнуть 2 - 3 мин., отфильтровать через фильтр "красная лента", промыть уголь смесью растворителей (бензол - ацетон 1:3) - общий объем 30 мл. Упарить экстракт до ~ 0,3 мл и анализировать методом ТСХ.

2.5.3. Определение цидиала

2.5.3.1. Условия ГЖХ определения

Хроматограф "Цвет" с ТИД:

- колонка стеклянная, длина 1 м, диаметр 3,5 мм, заполненная Хроматоном N-AW-НМДS (0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30;

- температура термостата колонки 210 °С;

- температура испарителя 230 °С;

- расход газа-носителя 22 мл/мин., водорода 14 - 17 мл/мин., воздуха - 400 мл/мин.;

- скорость протяжения ленты 240 мм/час.

Вводят в хроматограф последовательно по 3 - 5 мкл стандартного раствора цидиала, содержащего 0,5 - 2 мкг/мл пестицида, а затем такой же объем пробы. Нижний предел обнаружения 0,5 нг. Время удерживания цидиала 3,0 мин.

Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки по высоте или площади хроматографических пиков.

2.5.3.2. Условия ТСХ определения

На пластинку "Силуфол" с помощью капилляра или микропипетки наносят пробу, ополаскивая колбу 3 - 4 раза небольшими количествами (0,1 мл) н-гексана. На эту же пластинку наносят стандартные растворы (2 - 20 мкг) цидиала. Пластинку хроматографируют в подвижной фазе (ПФ) гексан - ацетон 3:1 (подъем ПФ на 10 см). После удаления растворителя с пластинки ее опрыскивают проявляющим реагентом.

При использовании реагента N 2 опрыскивают пластинку 1-процентным ацетоновым раствором 4-(п-нитробензил)пиридина, нагревают 5 мин. при 150 °С и опрыскивают 10-процентным ацетоновым раствором тетраэтиленпентамина. Цидиал обнаруживается в виде синих пятен на белом фоне. Нижний предел обнаружения 1 мкг.

Количественное определение цидиала проводят путем сравнения интенсивности окраски и размера пятен проб с пятнами стандартных растворов на одной пластинке.

2.6.1. ГЖХ. Расчет результатов анализа проводят по следующей формуле:

где:

А - количество пестицида в анализируемой навеске, найденное на пластинке по сравнению со стандартами, мкг;

Р - масса образца, взятого для анализа, г.

Соблюдать все необходимые требования при работе в химических лабораториях с органическими растворителями и токсическими веществами.

ВНИИГИНТОКС.