"Методические указания по фотометрическому измерению концентраций эритромицина в воздухе рабочей зоны"
(утв. Минздравом СССР 21.12.1987 N 4531-87)

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для работников санитарно-эпидемиологических станций и санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов Министерства здравоохранения СССР и других заинтересованных министерств и ведомств.

Методические указания разработаны и утверждены с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны к их предельно допустимым концентрациям (ПДК) - санитарно-гигиеническим нормативам, утвержденным Министерством здравоохранения СССР, оценки эффективности внедренных санитарно-гигиенических мероприятий, установления необходимости использования средств индивидуальной защиты органов дыхания, оценки влияния вредных веществ на состояние здоровья работающих.

Включенные в данный выпуск Методические указания подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны" и ГОСТ 12.1.016-79 "ССБТ. Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентрации вредных веществ" и одобрены Проблемной комиссией "Научные основы гигиены труда и профессиональной патологии". Методические указания являются обязательными при осуществлении вышеуказанного контроля.

Редакционная коллегия: Е.К. Прохорова, Л.А. Гребенникова, З.В. Зайцева, А.Г. Осипова, Г.А. Дьякова, Р.М. Македонская, В.Г. Овечкин.

Эритромицин (C₃₇H₆₇NO₁₃) - белый кристаллический порошок горького вкуса, без запаха. Антибиотик ограниченно растворим в воде (до 2 мг/мл), хорошо растворим в метиловом и этиловом спиртах, хлороформе, ацетоне, умеренно - в эфире, дихлорэтане и амилацетате. Плавится при 135 - 140 °C, а затем при 190 - 193 °C. Устойчив в твердом состоянии.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Общетоксическое действие эритромицина выражено незначительно, является аллергеном.

ПДК - 0,4 мг/м³.

Метод основан на образовании комплекса при взаимодействии эритромицина с метиловым оранжевым, экстракции его хлороформом и фотометрировании окрашенного в желтый цвет раствора.

Отбор пробы с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания эритромицина в анализируемом объеме пробы 12,5 мкг.

Нижний предел измерения в воздухе 0,2 мг/м³ (при отборе 85 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций от 0,2 до 3,0 мг/м³.

Измерению не мешает присутствие пенициллиновых антибиотиков и веществ кислого характера, мешают вещества основного характера, способные образовывать растворимые в хлороформе комплексы с метиловым оранжевым.

Суммарная погрешность измерения +/- 15%.

Время выполнения измерения 40 минут, включая отбор пробы.

Спектрофотометр или фотоэлектроколориметр.

Аспирационное устройство.

Фильтродержатели, ТУ 95.72.05-77.

Водоструйный насос.

Колба для вакуумного фильтрования со стеклянными пористыми пластинками N 1-ПС-1, диаметр пор 90 - 150 мк.

Воронки делительные вместимостью 25 - 50 мл.

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 250, 500 и 1000 мл.

Пробирки градуированные, ГОСТ 10515-75, вместимостью 20 - 25 мл с пришлифованными пробками.

Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 1, 2, 5 и 20 мл с делениями.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 и 1000 мл.

Фильтры обеззоленные, ТУ 6-09-1678-77.

Пинцет.

Секундомер, ГОСТ 5072-79.

Хлороформ, ГОСТ 215-74, х.ч.

Индикатор метиловый оранжевый, ГОСТ 10816-64, ч.д.а., 0,1%-ный раствор в воде, насыщенный хлороформом. Для этого встряхивают в делительной воронке в течение 3 мин равные объемы хлороформа и 0,1%-ного водного индикатора. После расслаивания жидкостей нижний хлороформный слой сливают и отбрасывают. Верхний слой фильтруют через бумажный фильтр. Раствор устойчив длительное время.

Натрий фосфорнокислый двузамещенный, ГОСТ 4172-76, х.ч. или ч.д.а., 0,2 М раствор.

Лимонная кислота, ГОСТ 3652-69, х.ч., 0,1 М раствор.

Цитратно-фосфатная буферная смесь, pH 3,8 +/- 0,1; готовят смешиванием 355 мл 0,2 М раствора двузамещенного фосфорнокислого натрия и 646 мл 0,1 М раствора лимонной кислоты.

Эритромицин фармакопейный с содержанием основного вещества 88,5%. Стандартный раствор N 1 готовят растворением в хлороформе навески 0,050 г эритромицина в мерной колбе на 50 мл. Концентрацию эритромицина в растворе рассчитывают с учетом содержания основного вещества в препарате. Стандартный раствор N 2 концентрации эритромицина 50 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением хлороформом стандартного раствора N 1. Растворы устойчивы 2 недели при хранении в холодильнике.

Фильтры АФА-ВП-20.

Воздух с объемным расходом 15 л/мин аспирируют через фильтр, помещенный в фильтродержатель АФА-ВП-20. Для измерения 0,5 ПДК следует отобрать 85 л воздуха. Отобранные пробы устойчивы длительно.

Градуировочные растворы (устойчивы в течение рабочего дня) готовят согласно таблице.

15 мл градуировочного раствора переносят в делительную воронку (или в пробирку с пришлифованной пробкой на 20 мл), добавляют 1,5 мл 0,1%-ного раствора метилового оранжевого и 1,5 мл цитратно-фосфатной буферной смеси, pH 3,8, закрывают пробкой и встряхивают в течение 1 мин. В присутствии эритромицина хлороформный слой окрашивается в желтый цвет. После расслаивания жидкостей верхний водный слой отбрасывают. Нижний хлороформный слой фильтруют в пробирку при помощи слабой струи водоструйного насоса через пористую пластинку N 1. Оптическую плотность желтых растворов измеряют на спектрофотометре при длине волны 420 нм или на фотоэлектроколориметре в области длин волн 400 - 500 нм со светофильтром, соответствующим этой области спектра. Измерение проводят в кюветах с толщиной поглощающего слоя 20 мм по отношению к раствору сравнения, не содержащему эритромицин.

Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им величины содержания эритромицина в градуировочном растворе (в мкг).

Проверка градуировочного графика проводится 1 раз в месяц или в случае использования новой партии реактивов.

Фильтр с пробой переносят в пробирку с пришлифованной пробкой и заливают 20 мл хлороформа, закрывают пробкой и растворяют антибиотик вместе с фильтром при перемешивании в течение 5 мин.

15 мл полученного раствора переносят в делительную воронку и проводят обработку, измерение оптических плотностей аналогично и одновременно с градуировочными растворами.

Содержание эритромицина в фотометрируемом растворе пробы находят по градуировочному графику.

Концентрацию эритромицина C в воздухе (в мг/м³) вычисляют по формуле:

где а - количество эритромицина, найденное по градуировочному графику в анализируемом объеме пробы, мкг;

в - общий объем раствора пробы, мл;

б - объем раствора пробы, взятый для анализа, мл;

V - объем воздуха (в л), взятый для анализа и приведенный к стандартным условиям (см. Приложение 1).

Приведение объема воздуха к условиям по ГОСТ 12.1.016-79 (температура 20 °C, давление 760 мм рт. ст.) проводят по следующей формуле:

где V_t - объем воздуха, отобранный для анализа, л;

P - барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);

t° - температура воздуха в месте отбора пробы, °C.

Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей коэффициентов (Приложение 2). Для приведения объема воздуха к температуре 20 °C и к давлению 760 мм рт. ст. надо умножить V_t на соответствующий коэффициент.