"МУК 4.1.3194-14. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций пропинеба в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом газохроматографического парофазного анализа. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 29.07.2014)

1. Разработаны ФБУН "Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора (Т.В. Юдина, М.В. Ларькина).

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 26 июня 2014 г. N 1).

3. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 29 июля 2014 г.

4. Введены впервые.

Свидетельство об аттестации МВИ от 24.12.13 N 01.00282-2008/0194.24.12.13.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода капиллярной газожидкостной хроматографии для измерения концентрации пропинеба в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов в диапазонах 0,1 - 1,0 мг/м³; 0,5 - 5,0 мкг/смыв соответственно.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Пропинеб - полимеризованный цинк 1,2пропиленбис (дитиокарбамат).

Эмпирическая формула: (C₅H₈N₂S₄Zn)_x.

Молекулярная масса: 289,8 г/моль (мономер).

Химически чистый пропинеб представляет собой белое кристаллическое вещество со слабовыраженным характерным запахом. Температура плавления не определена, так как разрушается выше 150 °C. Давление паров не установлено вследствие разложения вещества. Растворимость в воде < 0,01 г/л (практически не растворим в воде). Определить растворимость в воде практически невозможно в связи с разложением при гидролизе. Растворимость (г/л): гексан, толуол, 2-пропанол, ацетон, ацетонитрил, полиэтиленгликоль < 0,1; диметилформамид, диметилсульфоксид > 100. Разрушается при температуре > 150 °C.

Острая пероральная токсичность (LD₅₀) для крыс (самцы, самки) > 5 000 мг/кг; острая кожная токсичность (LD₅₀) для крыс > 5 000 мг/кг.

Пропинеб - фунгицид, в сочетании с фунгицидами из разных химических групп сводит риск возникновения резистентности к минимуму.

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице для соответствующих диапазонов концентраций.

- среднее значение массовой концентрации анализируемого компонента в пробе (мг/м³, мкг/смыв).

Измерения концентраций пропинеба выполняют методом газожидкостной хроматографии (ГЖХ) путем измерения концентраций сероуглерода в равновесной паровой фазе, образующегося в результате кислотного гидролиза пробы, помещенной в герметически закрытый сосуд при температуре 80 - 90 °C, с применением электронно-захватного детектора (ДЭЗ) или пламенно-фотометрического детектора (ПФД).

Концентрирование пропинеба из воздушной среды осуществляют на фильтры высокой плотности, смыв с кожных покровов - 0,1 М раствором бикарбоната натрия.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 0,5 нг. Средняя полнота извлечения с трубок - 92,2%, поверхности кожи - 93,0%.

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующей дополнительной очистки растворителей.

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.

4.3. При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/см²), необходимо соблюдать "Правила устройства и безопасной эксплуатации стационарных компрессорных установок, воздухопроводов и газопроводов под давлением", ПБ-03-576-03. Запрещается открывать вентиль баллона, не установив на нем понижающий редуктор.

К выполнению измерений допускают специалиста, прошедшего обучение, освоившего методику, владеющего техникой, имеющего опыт работы на газовом хроматографе и подтвердившего соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;

- выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: приготовление растворов, градуировочных растворов, установление градуировочной характеристики, подготовка фильтров и салфеток для отбора проб, отбор проб.

В мерную колбу вместимостью 250 см³, содержащую 100 - 150 см³ деионизованной воды, помещают (1 +/- 0,1) г гидроксида натрия, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

Для приготовления раствора соляной кислоты с молярной концентрацией 0,1 моль/дм³ (0,1 М раствор) в мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают 8,3 см³ соляной кислоты, доводят до метки водой, тщательно перемешивают.

В мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают (17,8 +/- 0,1) г двухлористого олова, растворяют ее в 1 000 см³ раствора соляной кислоты с молярной концентрацией 0,1 моль/дм³ (0,1 М раствор, по п. 7.2) при нагревании на водяной бане.

В мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают 21 г бикарбоната натрия, растворяют в 500 - 600 см³ дистиллированной воды, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

7.5.1. Исходный раствор пропинеба для градуировки N 1 (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,01 г пропинеба, растворяют в 50 - 70 см³ 0,1 М растворе гидроксида натрия, доводят до метки этим же раствором, тщательно перемешивают в ультразвуковой ванне 30 мин при температуре 35 °C.

Раствор хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °C в течение месяца.

7.5.2. Рабочие растворы пропинеба N 2 - 5 для градуировки и внесения (концентрация 1,0 - 10,0 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 1, 2, 4 и 10 см³ исходного раствора для градуировки с концентрацией 100 мкг/см³ (п. 7.5.1), доводят до метки 0,1 М раствором гидроксида натрия, тщательно перемешивают на ультразвуковой бане, получают рабочие растворы N 2 - 5 для градуировки и внесения (концентрации 1,0; 2,0; 4,0 и 10,0 мкг/см³).

Растворы используют в день приготовления.

Градуировочные характеристики, выражающие зависимость площади пика (мв·с) от содержания пропинеба в хроматографируемом объеме паровой фазы (мкг), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки N 2 - 5.

В 4 стеклянные виалы вместимостью 20 см³ помещают по 0,1 см³ градуировочных растворов N 2 - 5 (п. 7.5.2), вносят 5,0 см³ 0,25 М раствора бикарбоната натрия и 5,0 см³ раствора двухлористого олова с молярной концентрацией 0,15 моль/дм³ (0,15 М) (п. 7.3). Виалы закрывают силиконовыми самоуплотняющимися прокладками, обжимают алюминиевые крышки с отверстиями и помещают на 1 ч в термостат дозатора равновесного пара при 90 °C. В процессе термостатирования несколько раз виалы интенсивно встряхивают по 1 мин. Дозирование паровой фазы в хроматограф осуществляют с помощью специального пневматического дозатора. Анализ проводят в условиях хроматографирования по п. 7.5.1. Осуществляют 3 параллельных измерения. Устанавливают площади пиков сероуглерода в равновесной паровой фазе, образующегося в результате кислотного гидролиза пробы.

Газовый хроматограф, снабженный детектором электронного захвата.

Хроматографическая, капиллярная, кварцевая колонка длиной 15 м, внутренним диаметром 0,53 мм, содержащая сорбент: 5% - фенилполисилоксан и 95% - диметилполисилоксан (толщина пленки сорбента 0,5 мкм).

Температура детектора: 60 °C.

Температура испарителя: 60 °C.

Температура термостата колонки: 40 °C.

Газ-носитель: азот, поток - 2,824 см³/мин, средняя линейная скорость - 21,653 см/с, давление - 7 кПа. Деление потока - 1,0 : 2,9.

Газовый хроматограф, снабженный пламенно-фотометрическим детектором (ПФД).

Хроматографическая капиллярная кварцевая колонка длиной 30 м, внутренним диаметром 0,32 мм, содержащая сорбент: 5% - фенилполисилоксан и 95% - диметилполисилоксан (толщина пленки сорбента 0,5 мкм).

Температура детектора: 200 °C.

Температура испарителя: 150 °C.

Температура термостата колонки - 130 °C.

Газ 1 (азот): скорость - 37,676 см³/с, давление - 80 кПа, поток - 1,926 см³/мин.

Газ 2 (азот): деление потока 1 : 2,6.

Скорость потока водорода - 140 см³/мин; скорость потока воздуха - 40 см³/мин.

Вырезают салфетки (лоскуты) из белой бязи размером 10 x 10 см, затем их последовательно обрабатывают 0,25 М раствором бикарбоната натрия (при кипячении) (приготовленного по п. 7.4), водой до нейтральной реакции промывных вод, 2-кратно промывают этиловым спиртом, сушат на воздухе при комнатной температуре. До использования салфетки хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

Отбор проб осуществляют в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны" и Р 2.2.2006-05 (прилож. 9, обязательное) "Общие методические требования к организации и проведению контроля содержания вредных веществ в воздухе рабочей зоны", п. 2 "Контроль соответствия максимальным ПДК".

Воздух с объемным расходом 1 - 2 дм³/мин аспирируют через бумажный фильтр высокой плотности, помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации пропинеба на уровне предела обнаружения (0,1 мг/м³) для воздуха рабочей зоны необходимо отобрать 5,0 дм³ воздуха. Срок хранения отобранных проб, раздельно помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильнике при температуре 4 - 6 °C - 15 дней.

Смывы проводят в конце работы или после выполнения отдельных операций с открытых и закрытых спецодеждой или другими СИЗ участков тела (лоб, лицо, шея, спина, грудь, предплечье, голень, кисти рук, включая межпальцевые промежутки).

До работы выбирают участки кожи, обрабатывают их для удаления загрязнений и фиксируют площадь (не менее 200 см²). При необходимости отбирают фоновые смывы.

Смыв выполняют способом обмыва фиксированного участка кожи 0,25 М раствором бикарбоната натрия, помещая 20 см³ в стеклянную емкость с металлической крышкой. Тканевой салфеткой, смоченной растворителем, с помощью пинцета (индивидуально) обмывают этот участок сверху вниз. Операцию повторяют дважды.

Срок хранения отобранных проб смывов, помещенных в герметично закрытые емкости, в холодильнике при температуре 4 - 6 °C - 15 дней.

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 см³, заливают 10 см³ 0,25 М раствора бикарбоната натрия (п. 7.4), помещают на ультразвуковую баню на 5 мин. Раствор собирают в мерный цилиндр объемом 25 см³, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями 0,25 М раствора бикарбоната натрия объемом 10 и 5 см³. Измеряют объем полученного раствора, при необходимости доводят до метки 0,25 М раствором бикарбоната натрия.

В стеклянную виалу объемом 20 см³ переносят 5 см³ объединенного экстракта, вносят 5 см³ 0,15 М раствора хлористого олова (п. 7.3). Виалы закрывают силиконовыми прокладками и герметично обжимают алюминиевыми колпачками, помещают на 1 ч в термостат дозатора равновесного пара (90 °C). Проба дважды вводится в испаритель хроматографа. Устанавливают площадь пиков в условиях хроматографирования по пп. 7.5.1 или 7.5.2 <*>.

--------------------------------

<*> Объем паровой фазы должен быть не менее 2/3 объема виалы.

Содержание пропинеба в пробе сопоставительно оценивают по площади хроматографического пика градуировочного раствора аналитического стандарта (введенного в испаритель непосредственно после хроматографирования исследуемого образца), площадь которого отличается от площади исследуемого образца не более, чем на 50%.

Для образцов, дающих пики, площадь которых больше, чем площадь пика градуировочного раствора с содержанием пропинеба 1,0 мкг, в испаритель хроматографа вводится меньшая аликвота пробы.

Перед анализом опытной пробы проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы - экстракта неэкспонированного фильтра.

Пробу смыва сливают (через воронку) в мерный цилиндр объемом 25 см³, с помощью пинцета тщательно отжимают салфетку, далее промывают 0,25 М раствором бикарбоната натрия (п. 7.4) дважды порциями по 5 см³, каждый раз помещая на ультразвуковую баню на 5 мин. Экстракт собирают в тот же цилиндр.

Измеряют объем полученного раствора, при необходимости доводят до метки 0,25 М раствором бикарбоната натрия.

В стеклянную виалу объемом 20 см³ переносят 5 см³ объединенного экстракта, вносят 5 см³ 0,15 М раствора хлористого олова (п. 7.3). Виалы закрывают силиконовыми прокладками и герметично обжимают алюминиевыми колпачками, помещают на 1 ч в термостат дозатора равновесного пара (90 °C). Проба дважды вводится в испаритель хроматографа. Устанавливают площадь пиков в условиях хроматографирования по пп. 7.5.1 или 7.5.2 <*>.

--------------------------------

<*> Объем паровой фазы должен быть не менее 2/3 объема виалы.

Содержание пропинеба в пробе смыва сопоставительно оценивают по площади хроматографического пика градуировочного раствора аналитического стандарта (введенного в испаритель непосредственно после хроматографирования исследуемого образца), площадь которого отличается от площади исследуемого образца не более, чем на 50%.

Для образцов, дающих пики, площадь которых больше, чем площадь пика градуировочного раствора с содержанием пропинеба 1,0 мкг, в испаритель хроматографа вводится меньшая аликвота пробы.

Перед анализом опытной пробы проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы - экстракта неэкспонированного смыва с кожных покровов.

Массовую концентрацию пропинеба в пробе воздуха рабочей зоны X, мг/м³, рассчитывают по формуле:

X - содержание пропинеба в хроматографируемом объеме парогазовой фазы, мг/м³;

A - содержание пропинеба в градуировочном растворе, мкг;

S_пр. - площадь пика исследуемой пробы парогазовой фазы, мВ·с;

S_ст. - площадь пика аналитического стандарта, мВ·с;

W_пр. - объем парогазовой фазы, введенной в испаритель хроматографа, см³;

W_ст. - объем парогазовой фазы градуировочного раствора, введенной в испаритель хроматографа, см³;

V_t - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20 °C), дм³:

T - температура воздуха при отборе проб (на входе в аспиратор), °C;

P - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;

u - расход воздуха при отборе пробы, дм³/мин;

t - длительность отбора пробы, мин;

R - коэффициент, равный 0,386 для воздуха рабочей зоны;

5 - коэффициент, учитывающий долю экстракта, взятого для парофазного анализа.

Примечание. Идентификация и расчет концентрации пропинеба в пробах могут быть проведены с помощью программ обработки хроматографических данных с применением компьютера, включенного в аналитическую систему.

Концентрацию пропинеба в пробе смыва X, мкг/смыв, рассчитывают по формуле:

X - содержание пропинеба в хроматографируемом объеме парогазовой фазы, мг/смыв;

A - содержание пропинеба в градуировочном растворе, мкг;

S_пр. - площадь пика исследуемой пробы парогазовой фазы, мВ·с;

S_ст. - площадь пика аналитического стандарта, мВ·с;

W_пр. - объем парогазовой фазы, введенной в испаритель хроматографа, см³;

W_ст. - объем парогазовой фазы градуировочного раствора, введенной в испаритель хроматографа, см³;

5 - коэффициент, учитывающий долю экстракта, взятого для парофазного анализа.

Примечание. Идентификация и расчет концентрации вещества в пробах смывов с кожных покровов могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.

Результат количественного анализа представляют в виде:

- результат анализа в мг/м³ или мкг/смыв (с указанием площади смыва в см²), характеристика погрешности , % (+/- 25%), P = 0,95 или

(мкг/смыв, площадь смыва, см²), P = 0,95, где

- абсолютная погрешность:

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

"содержание пропинеба в пробе воздуха рабочей зоны - менее 0,1 мг/м³; смыва - менее 0,5 мкг/смыв" <*>.

--------------------------------

<*> - 0,1 мг/м³; 0,5 мкг/смыв - пределы обнаружения при отборе 5 дм³ воздуха рабочей зоны; в пробе смыва (фиксированная площадь смыва, 200 см²) соответственно.

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-(1-6)-02 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

13.1. Контроль стабильности градуировочной характеристики.

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.

При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее трех образцов градуировочных растворов, содержание пропинеба в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,1 до 1,0 мкг/см³.

Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

X - концентрация пропинеба в пробе при контрольном измерении, мкг/см³;

C - известная концентрация градуировочного раствора пропинеба, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см³;

B - норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (B = 10% при P = 0,95).

Если величина расхождения (A) превышает 10%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов пропинеба, предусмотренных МВИ. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново согласно п. 7.5.

Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Образцами для контроля являются реальные пробы воздушной среды и смывов с кожных покровов. Объем отобранных для контроля процедуры выполнения анализа проб воздуха и смывов с кожи должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике, фиксированная площадь смыва должна быть увеличена в 2 раза. После отбора проб экстракт с фильтра, а также пробу смыва делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики и получают результат анализа исходной рабочей пробы - X. Во вторую часть делают добавку анализируемого компонента (величина добавки X_д должна соответствовать 50 - 150% от содержания компонента в пробе, общая концентрация не должна превышать верхнюю границу диапазона измерения) и анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы с добавкой - X'. Результаты анализа исходной рабочей пробы (X) и рабочей пробы с добавкой (X') получают в условиях повторяемости (один аналитик, использование одного набора мерной посуды, одной партии реактивов и т.д.).

Величина добавки C_д должна удовлетворять условию:

- характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/м³, мкг/смыв.

Допустимо характеристику погрешности результатов анализа при внедрении методики в лаборатории устанавливать на основе выражения , с последующим уточнением по мере накопления информации, где

- граница абсолютной погрешности, мг/кг, мкг/смыв:

- граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл.), %.

Контроль проводят путем сравнения результата контрольной процедуры К_к с нормативом контроля К.

Результат контрольной процедуры К_к рассчитывают по формуле:

, , C_д - среднее значение массовой концентрации анализируемого компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки соответственно (мг/м³, мкг/смыв).

Норматив оперативного контроля точности К рассчитывают по формуле:

Проводят сопоставление результата контрольной процедуры (К_к) с нормативом контроля (К).

Если результат контрольной процедуры удовлетворяет условию

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (1) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (1) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.

Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):

R - предел воспроизводимости (табл.), мг/м³, мкг/смыв:

(воздух рабочей зоны);

(смывы с кожи).

, где X₁, X₂ - результаты измерений в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), мг/м³, мкг/смыв.

Если выполняется условие (2), то воспроизводимость измерений считается удовлетворительной.

При превышении норматива контроля воспроизводимости эксперимент повторяют, при повторном превышении указанного норматива выясняют причины и по возможности их устраняют.