"МУК 4.1.2889-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение бис(2-этилгексил)фталата в жидких пищевых продуктах. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 06.07.2011)

1. Разработаны ГУ НИИ питания РАМН.

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

3. Утверждены и введены в действие руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 6 июля 2011 года.

4. Введены впервые.

Настоящие Методические указания устанавливают метод капиллярной газожидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектором для определения массовых концентраций бис(2-этилгексил)фталата в жидких пищевых продуктах (бутилированная вода, безалкогольные напитки, соковая продукция) в диапазоне 0,1 - 1000,0 мг/кг.

Методические указания предназначены для органов и учреждений Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека и других служб, осуществляющих надзор (контроль) качества и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов, а также могут быть использованы другими лабораторными центрами, аккредитованными в установленном порядке.

Общепринятое название: бис(2-этилгексил)фталат.

Название по номенклатуре ИЮПАК: бис(2-этилгексиловый) эфир 1,2-бензолдикарбоновой кислоты.

Синонимы: бис-(изооктил)фталат, ВЕНР.

Структурная формула (не приводится).

Молекулярная масса: 390,56.

Номер CAS: 117-81-7.

Физические свойства: бесцветная или слегка желтоватая жидкость, температура плавления - 55 °С, температура кипения 384 °С, плотность D 0,981 г/куб. см при 25 °С. Практически нерастворим в воде (0,285 мг в 1 л при 24 °С), растворим в гексане, хлористом метилене, трихлортрифторэтилене и других органических растворителях.

В промышленности бис(2-этилгексил)фталат (далее - БЭГФ) используют в качестве пластификатора для пластмасс на основе поливинилхлорида для получения гибкости полимерных продуктов. Поливинилхлоридные пластмассы могут содержать от 1 до 40% БЭГФ. БЭГФ относится к 3-й группе токсичности. Европейское агентство по безопасности пищи (EFSA) оценило уровень, при котором отсутствуют наблюдаемые вредные эффекты (NOAEL), в 5 мг на 1 кг веса тела в день. С учетом дополнительного коэффициента безопасности (100) допустимый уровень суточного воздействия (TDI) установлен в 0,05 мкг/куб. дм веса тела, что эквивалентно 0,003 - 0,004 мкг/куб. дм веса тела/сутки. В Российской Федерации согласно СанПиН 2.1.4.1116-02 "Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды, расфасованной в емкости. Контроль качества" нормативами качества воды по показателю ди(2-этилгексил)фталата являются для воды первой категории 6 мкг/куб. дм; для воды высшей категории - 0,1 мкг/куб. дм.

2.1.1. Принцип методики

2.1.2. Метрологические характеристики методики

Допускается использование приборов и посуды с метрологическими характеристиками и реактивов квалификацией не ниже указанных в МУК.

Все растворители перед проведением анализа следует перегонять с использованием только стеклянной лабораторной посуды. На дальнейших этапах используется только стеклянная лабораторная посуда, предварительно промытая перегнанным в стекле гексаном или хлористым метиленом. Для исключения возможности получения ложноположительных результатов на всех этапах проведения анализа экстракты не должны контактировать с пластиками.

Для учета специфики отбора проб отдельных видов продуктов следует руководствоваться действующей нормативно-технической документацией на конкретную продукцию.

2.5.1. Приготовление стандартных растворов бис(2-этилгексил)фталата и дейтерированного бис(н-гексил)фталата

Навеску (0,01 +/- 0,001) г БЭГФ количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 куб. см, растворяют в 20 куб. см метиленхлорида, затем добавляют гексан до метки. Получают основной стандартный раствор БЭГФ в 100 куб. см смеси гексан-хлористый метилен (4:1) с концентрацией 100 мг/куб. дм. Аналогично готовят основной стандартный раствор внутреннего стандарта БГФ-d с концентрацией 100 мг/куб. дм. Рабочие растворы с концентрацией фталатов 1 мг/куб. дм (1 нг/куб. мм) готовят разбавлением в 100 раз гексаном стандартных растворов. Основной и рабочие стандартные растворы хранят в стеклянной посуде (мерной колбе) с притертой стеклянной пробкой в прохладном месте (при температуре около 0 °С). Сроки годности основного раствора - 9 месяцев, рабочих растворов - 1 месяц.

2.5.2. Подготовка пробы для анализа

2.5.2.1. Подготовка образца воды

К 100 куб. см образца воды продукта добавляют 5 г сухого хлористого натрия. Добавляют 0,2 куб. см рабочего раствора БГФ-d и 0,8 куб. см гексана, добавка соответствует концентрации внутреннего стандарта в 2 мкг/куб. дм.

Встряхивают в течение 1 мин. После разделения слоев из верхнего органического слоя вносят микрошприцем 1 - 2 куб. мм в инжектор ГЖХ-ПИД системы. Количество БЭГФ в образце воды определяют по сравнению площади его пика с пиком внутреннего стандарта по калибровочной зависимости площади пиков анализируемого вещества и его дейтерированного аналога по формуле.

При анализе воды высшей категории, где установленный уровень МДУ составляет 0,1 мкг/куб. дм, применяют следующий вариант подготовки пробы: к 1 куб. дм образца воды добавляют 0,2 куб. см рабочего раствора БГФ-d и 9,8 куб. см гексана (добавка соответствует концентрации внутреннего стандарта в 0,2 мкг/куб. дм). Смесь встряхивают, отделяют верхний гексановый слой и удаляют гексан в токе азота до объема примерно в 1,0 - 1,5 куб. см, вносят микрошприцем 1 - 2 куб. мм в инжектор ГЖХ-ПИД системы.

2.5.2.2. Подготовка образца безалкогольных напитков и соковой продукции

В круглодонную перегонную колбу на 250 куб. см помещают 100 куб. см напитка, добавляют 5 г хлористого натрия и 0,2 куб. см (2 мкг/куб. дм БГФ-d в напитке) рабочего раствора внутреннего стандарта. Смесь нагревают на глицериновой бане до кипения, отгоняя 50 куб. см дистиллята. К водному дистилляту добавляют 1 куб. см гексана, встряхивают, после разделения слоев 1 - 2 куб. мм из верхнего органического слоя вносят в инжектор ГЖХ-системы. Далее анализируют по пункту 2.5.2.1.

Образцы анализируют с помощью системы ГЖХ-ПИД. Разделение проводят на капиллярной колонке 30 m x 0,32 mm x 0,25 um, покрытой полиметилсилоксаном типа DB-lms или полиметилсилоксаном с 5% фенильных групп типа DB-5ms, газ-носитель - азот, скорость потока до сброса - 40 - 42 мл/мин., входное давление - 15 psi. Температура инжектора 280 °С, режим ввода без разделения потока (splitless) газа-носителя, температура программируется от 60 до 280 °С со скоростью 20 °С/мин., температура детектора 300 °С. Примерное время выхода растворителя 1,2 - 1,4 мин., БЭГФ - около 11 мин., внутреннего стандарта БГФ-d - около 10 мин. Относительное приведенное время удерживания выхода БЭГФ по внутреннему стандарту составляет примерно 1,095 - 1,085. ГЖХ-ПИД должна обеспечивать уровень сигнала фталатов, превышающий шум в 3 раза, при вводе 0,05 нг БЭФГ или БГФ-d.

2.6.1. Калибровка хроматографа

Для градуировки в хроматограф из рабочих растворов БЭГФ и внутреннего стандарта с концентрацией 1 нг/куб. мм каждый готовят смеси.

Калибровочная смесь N 1: к 1 куб. см рабочего раствора БЭГФ добавляют 1 куб. см рабочего раствора внутреннего стандарта, получая смесь с концентрацией каждого вещества 0,5 нг/куб. мм при соотношении стандартов 1:1.

Калибровочная смесь N 2: к 0,5 куб. см рабочего раствора БЭГФ добавляют 1,0 куб. см раствора внутреннего стандарта и 0,5 куб. см гексана, получая смесь с концентрацией БЭГФ 0,25 нг/куб. мм и БГФ-d 0,5 нг/куб. мм при соотношении стандартов 1:2.

Калибровочная смесь N 3: к 1,0 куб. см рабочего раствора БЭГФ добавляют 0,5 куб. см рабочего раствора внутреннего стандарта и 0,5 куб. см гексана, получая смесь с концентрацией БЭГФ 0,5 нг/куб. мм и БГФ-d 0,25 нг/куб. мм при соотношении стандартов 2:1.

Вводят 1 - 2 куб. мм каждой смеси в ГЖХ-ПИД систему, определяют соотношения площадей пиков БЭГФ и внутреннего стандарта БГФ-d.

2.6.2. ГЖХ-МС анализ

Для подтверждения наличия БЭГФ используют систему ГЖХ-МС, основанную на Thermo Trace GC 200 газовом хроматографе, соединенном с квадрупольным масс-спектрометром DSQ II (подобного производства США), или аналогичную систему. Разделение проводят на капиллярной колонке 25 м х 0,32 мм х 0,25 мкм, покрытой полиметилсилоксаном типа DB-1ms или полиметилсилоксаном с 5% фенильных групп типа DB-5ms, газ-носитель - гелий, скорость потока через колонку - 1 см/мин. Температура переходных линий - 250 °С, температура термостата колонки программируется от 60 до 280 °С со скоростью 10 см/мин, диапазон регистрируемых масс - от 40 до 450 а.е.м. Базовая масса БЭГФ - m/z = 149, другие характеристические ионы 113, 167 и 279. Базовая масса внутреннего стандарта БГФ-d - m/z = 153.

Содержание в образцах рассчитывают методом внутреннего стандарта по формуле:

За результат принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных измерений и выражают с точностью до одного десятичного знака.

3.1. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

Хроматографирование проб проводят не менее двух раз, сравнивают отношение площади пика исследуемого вещества к площади пика внутреннего стандарта БГФ-d.

Допустимое расхождение между параллельными измерениями (R) определяют на основании предела повторяемости (r) (табл. 1):

При превышении норматива R следует повторить измерения, используя новую пробу.

При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

Работу по указанной методике могут исполнять высококвалифицированные специалисты в области газожидкостной хроматографии и санитарной химии. Исполнители должны быть проинструктированы по основным мерам техники безопасности при работе с веществами 1 - 2-го класса опасности, органическими растворителями, а также по основным правилам безопасности при работе в химлаборатории (п. 3).

Помещение лаборатории должно соответствовать санитарным правилам проектирования, оборудования, эксплуатации и содержания производственных и лабораторных помещений, предназначенных для проведения работ с веществами 1 - 2-го класса опасности, органическими растворителями. Аналитическая лаборатория должна быть оснащена вентиляционной системой согласно ГОСТ 12.4.021.

Температура окружающего воздуха должна быть от 15 до 25 °С. Относительная влажность воздуха не более 80% при 25 °С. Атмосферное давление 730 - 760 мм рт. ст. Напряжение электропитания 210 - 220 В. Частота переменного тока 45 - 50 Гц.