"МУК 4.1.3122-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств хлороталонила в персиках, хлороталонила и его метаболита 4-гидрокси-2,5,6-трихлоризофталонитрила (SDS-3701) в сельдерее (корень) методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 30.10.2013)

1. Разработаны ФБУН "Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора (В.Н. Ракитский, Т.В. Юдина, М.В. Ларькина, С.К. Рогачева).

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Протокол от 29 октября 2013 г. N 3).

3. Утверждены вр.и.о. руководителя Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главного государственного санитарного врача Российской Федерации А.Ю. Поповой 30 октября 2013 г.

4. Введены впервые.

Свидетельство об аттестации МВИ N 01.00282-2008/0172.11.06.13 от 11.06.2013.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода капиллярной газожидкостной хроматографии для определения массовых концентраций хлороталонила в персиках, хлороталонила и его метаболита 4-гидрокси-2,5,6-трихлоризофталонитрила (SDS-3701) в сельдерее (корень) в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Название действующего вещества по ИСО: хлороталонил.

Название действующего вещества по ИЮПАК: тетрахлороизофталонитрил.

Структурная формула:

Эмпирическая формула: .

Молекулярная масса: 265,9.

Кристаллическое вещество без запаха, белого цвета. Температура плавления 252,1 °C. Давление паров при 25 °C: 0,076 мПа (25 °C). Растворимость в органических растворителях (г/дм3, 25 °C): ксилол - 80; циклогексан, диметилформамид - 30; ацетон - 20; керосин - < 10; вода - 0,81. Является термически и химически стойким соединением, стабилен в кислых и слабощелочных растворах, слабо гидролизуется при pH > 9.

Краткая токсикологическая характеристика

Острая пероральная токсичность для крыс > 5000 мг/кг; острая дермальная токсичность для кроликов > 10000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность для крыс > 4,7 мг/дм3 (4 ч).

Область применения препарата

Хлороталонил - контактный фунгицид защитного действия, препятствует прорастанию спор и конидий, неспецифично связывая тиольные группы аминокислот, протеинов и пептидов, нарушая функции гликолитических и дыхательных ферментов и клеток.

Метаболит хлороталонила SDS-3701 (R182281) - 4-гидрокси-2,5,6-трихлороизофталонитрил является основным метаболитом хлороталонила в растениях и организме животных. По физико-химическим свойствам близок к основному веществу, но отличается большей полярностью и меньшей стойкостью.

Структурная формула:

Эмпирическая формула: .

Молекулярная масса: 247,4.

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (n = 20) приведены в табл. 2.

Метод основан на определении хлороталонила и его метаболита SDS-3701 (R182281) методом газожидкостной хроматографии с использованием детектора по захвату электронов (ЭЗД) после их экстракции из объектов анализа органическим растворителем, очистке экстракта от коэкстрактивных компонентов перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, далее на колонке с флорисилом. Газохроматографическому измерению метаболита предшествует стадия дериватизации вещества в метиловый эфир. Обработка хроматограмм методом абсолютной калибровки.

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующей дополнительной очистки растворителей.

Примечание. Допускается применение вспомогательных устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать нормы, установленные ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.2308-07 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.

4.3. При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/см2), необходимо соблюдать "Правила устройства и безопасной эксплуатации стационарных компрессорных установок, воздухопроводов и газопроводов под давлением", ПБ-03-576-03. Запрещается открывать вентиль баллона, не установив на нем понижающий редуктор.

К выполнению измерений допускают специалиста, прошедшего обучение, освоившего методику, владеющего техникой, имеющего опыт работы на газовом хроматографе и подтвердившего соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;

- выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), получение N-нитрозо-N-метилмочевины (при необходимости), раствора диазометана, приготовление растворов и градуировочных растворов, растворов внесения, установление градуировочных характеристик, приготовление смесей растворителей для экстракции и очистки экстрактов на колонке, подготовка колонки с флорисилом, проверка хроматографического поведения хлороталонила и его метаболита на ней.

Ацетон перегоняют над небольшим количеством марганцовокислого калия и прокаленным карбонатом калия или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30.

Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

7.1.3.1. Приготовление раствора натрия углекислого с массовой долей 5%. Навеску (25 +/- 0,1) г натрия углекислого помещают в мерную колбу вместимостью 500 см3, растворяют в бидистиллированной воде, доводят водой до метки, перемешивают.

7.1.3.2. Очистка растворителя. Этилацетат промывают последовательно 5%-м водным раствором натрия углекислого, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над прокаленным карбонатом калия и перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30.

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 ч, после чего перегоняют; непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

В отсутствии готового препарата нитрозометилмочевины осуществляют его синтез.

Все работы необходимо проводить в вытяжном шкафу!

В круглодонную колбу на шлифе вместимостью 1 дм3, снабженную обратным холодильником, помещают 80 г метиламина гидрохлорида и 300 г мочевины, растворяют содержимое в 400 см3 воды и кипятят 3 ч с обратным холодильником на водяной бане. Раствор в колбе охлаждают до комнатной температуры и добавляют в него 110 г нитрита натрия, охлаждают в бане со льдом, содержащим хлорид натрия, до 0 °C и медленно при перемешивании вливают в смесь 600 г льда и 60 см3 концентрированной серной кислоты, помещенную в стакан вместимостью 2 дм3, охлаждаемый снаружи смесью льда с хлоридом натрия. Выпавшие кристаллы нитрозометилмочевины немедленно отфильтровывают на воронке Бюхнера, хорошо отсасывают под вакуумом и промывают на фильтре ледяной водой.

Примечание. Нитрозометилмочевину хранят в темной склянке в холодильнике, так как под действием света и тепла она может взорваться.

Внимание! Диазометан взрывоопасен и очень ядовит. Все работы необходимо проводить в вытяжном шкафу!

В коническую колбу на 100 см3 вносят 20 см3 40%-го раствора гидроксида калия и 50 см3 диэтилового эфира, колбу помещают в баню со льдом и охлаждают до температуры 2 - 5 °C. В охлажденную смесь порциями при перемешивании на магнитной мешалке или путем встряхивания вносят 5 г нитрозометилмочевины. Реакционную смесь выдерживают на холоде 10 мин. Затем эфирный слой сливают в чистую коническую колбу вместимостью 100 см3, добавляют 10 - 15 гранул гидроксида калия и колбу оставляют в бане со льдом на 2,5 - 3,0 ч для осушения раствора.

Раствор диазометана в эфире годен к употреблению при хранении в холодильнике в течение 1 - 2 суток. При хранении сосуды с диазометаном нельзя плотно закрывать!

Навеску (25 +/- 0,1) г натрия углекислого помещают в мерную колбу вместимостью 500 см3, растворяют в деионизированной воде, доводят водой до метки, перемешивают.

В мерную колбу вместимостью 1000 см3, содержащую 300 - 400 см3 деионизованной воды, помещают 8,3 см3 концентрированной соляной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 50 - 60 см3 бидистиллированной воды, вносят 49 г концентрированной серной кислоты, доводят водой до метки, перемешивают.

В мерную колбу вместимостью 50 см3 помещают (20 +/- 0,1) г гидроксида калия, растворяют в 25 - 30 см3 дистиллированной воды, доводят водой до метки. Раствор хранят в емкости из полипропилена не более 1 месяца.

7.8.1. Исходный раствор хлороталонила для градуировки (концентрация 500 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 0,05 г хлороталонила, растворяют в 50 - 70 см3 ацетона, доводят до метки этим же растворителем, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 6 месяцев.

7.8.2. Раствор N 1 хлороталонила для градуировки и внесения (концентрация 5,0 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 1,0 см3 исходного раствора хлороталонила для градуировки с концентрацией 500 мкг/см3 (п. 7.8.1), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают.

Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

7.8.3. Рабочие растворы N 2 - 5 хлороталонила для градуировки, серия 1 (концентрация 0,05 - 0,5 мкг/см3). В 4 мерные колбы вместимостью 100 см3 помещают по 1,0; 2,0; 4,0 и 10 см3 раствора N 1 хлороталонила с концентрацией 5,0 мкг/см3 (п. 7.8.2), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 5 с концентрацией хлороталонила 0,05; 0,1; 0,2 и 0,5 мкг/см3 соответственно.

Растворы N 2 - 5 готовят непосредственно перед использованием.

7.8.4. Исходный раствор метаболита хлороталонила SDS-3701 для градуировки (концентрация 500 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 0,05 г SDS-3701 (R182281), растворяют в 50 - 70 см3 ацетона, доводят до метки этим же растворителем, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 6 месяцев.

7.8.5. Исходный раствор метилового эфира SDS-3701 для градуировки (соответствует концентрации SDS-3701 5 мкг/см3)

В круглодонную колбу вместимостью 50 см3 помещают 1,0 см3 исходного раствора вещества с концентрацией 500 мкг/см3 (п. 7.8.4), растворитель отдувают потоком теплого воздуха, вносят 3 см3 раствора диазометана, выдерживают 30 мин при комнатной температуре. Для освобождения от избытка диазометана вносят в колбу 0,1 г силикагеля, выдерживают еще 15 мин. Затем добавляют в колбу 0,1 см3 н-пропанола, отдувают растворитель потоком теплого воздуха (не помещая колбу на подогретую водяную баню) до влажного остатка. Вносят в колбу 1 см3 гексана и вновь отдувают растворитель до влажного остатка (отсутствие запаха эфира).

Остаток растворяют в ацетоне, перенося порциями растворителя по 10 - 15 см3 в мерную колбу на 100 см3, доводят объем до метки, перемешивают.

Раствор метилового эфира SDS-3701 с концентрацией 5 мкг/см3 хранят в морозильной камере при температуре -18 °C в течение месяца.

7.8.6. Рабочие растворы N 2 - 5 метилового эфира SDS-3701, серия 2, для градуировки (соответствует концентрации SDS-3701 0,05 - 0,5 мкг/см3). В 4 мерные колбы вместимостью 100 см3 помещают по 1,0; 2,0; 4,0 и 10,0 см3 исходного раствора метилового эфира SDS-3701 (приготовленного по п. 7.8.5), доводят до метки гексаном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 5 с концентрацией SDS-3701 0,05; 0,1; 0,2 и 0,5 мкг/см3 соответственно.

Растворы хранят в морозильной камере при температуре -18 °C в течение 2 недель.

7.8.7. Раствор N 1 метаболита хлороталонила SDS-3701 для внесения (концентрация 5,0 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 1,0 см3 исходного раствора метаболита хлороталонила для градуировки с концентрацией 500 мкг/см3 (п. 7.8.4), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают.

Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мкВ·с) от концентрации хлороталонила и метаболита SDS-3701 в растворе (мкг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки N 2 - 5 (серий 1 и 2).

В испаритель газового хроматографа вводят по 1 мм3 каждого градуировочного раствора, приготовленного по пп. 7.8.3 и 7.8.6 и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.5. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Устанавливают площади пиков хлороталонила и метаболита SDS-3701, на основании которых строят градуировочную зависимость.

7.10.1. Смесь гексан-этилацетат (объемное соотношение 8:2). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 80 см3 гексана и 20 см3 этилацетата, перемешивают.

7.10.2. Смесь гексан-этилацетат (объемное соотношение 9:1). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 90 см3 гексана и 10 см3 этилацетата, перемешивают.

7.10.3. Смесь гексан-этилацетат (объемное соотношение 95:5). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 95 см3 гексана и 5 см3 этилацетата, перемешивают.

Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см, внутренним диаметром 10 - 12 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 4 г флорисила в 20 см3 гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента, на который помещают слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку последовательно промывают 20 см3 смеси гексан-этилацетат в объемном соотношении 8:2, затем 20 см3 смеси гексан-этилацетат в объемном соотношении 9:1 и 20 см3 смеси гексан-этилацетат в объемном соотношении 95:5 и 20 см3 гексана, скорость прохождения растворителя 1 - 2 капли в секунду, после чего она готова к работе.

В круглодонную колбу вместимостью 10 см3 помещают 0,5 см3 раствора N 1 хлороталонила для градуировки с концентрацией 5,0 мкг/см3 (п. 7.8.2), упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре водяной бани не выше 35 °C. Сухой остаток растворяют в 5 см3 гексана, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 60 с, далее наносят на колонку, подготовленную по п. 7.11. Колбу обмывают дважды этим же растворителем, порциями по 5 см3, которые также наносят на колонку. Скорость прохождения растворителя через колонку - 1 - 2 капли в секунду.

Затем колонку промывают 20 см3 гексана со скоростью 1 - 2 капли в секунду, 20 см3 смеси гексан-этилацетат (95:5, по объему), 30 см3 смеси гексан-этилацетат (90:10, по объему). Фракционно (по 10 см3) отбирают элюат, упаривают, остатки растворяют в 2 см3 гексана, анализируют содержание хлороталонила по п. 9.5.

Фракции, содержащие хлороталонил, объединяют и вновь анализируют.

Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.

В круглодонную колбу вместимостью 10 см3 помещают 0,5 см3 исходного раствора метилового эфира SDS-3701 для градуировки и внесения (соответствует концентрации метаболита SDS-3701 5 мкг/см3) (п. 7.8.5), упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре водяной бани не выше 35 °C. Сухой остаток растворяют в 3 см3 гексана, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 60 с, далее наносят на колонку, подготовленную по п. 7.11. Колбу обмывают дважды этим же растворителем, порциями по 3 см3, которые также наносят на колонку. Скорость прохождения растворителя через колонку - 1 - 2 капли в секунду.

Затем колонку промывают 20 см3 смеси гексан-этилацетат (95:5, по объему), 20 см3 смеси гексан-этилацетат (90:10, по объему), 30 см3 смеси гексан-этилацетат (8:2, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду.

Фракционно (по 10 см3) отбирают элюат, упаривают, остатки растворяют в 2 см3 гексана, анализируют содержание метаболита SDS-3701 по п. 9.5.

Фракции, содержащие метаболит SDS-3701, объединяют и вновь анализируют.

Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.

Примечание. Проверку хроматографического поведения веществ следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии сорбентов и растворителей.

Отбор проб производится в соответствии с правилами, определенными ГОСТ: ГОСТ 21833-76 "Персики свежие. Технические условия" и "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.1979).

Отобранные пробы хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике в темноте не более 7 дней. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре -18 °C.

Перед анализом образцы измельчают с помощью гомогенизатора.

Измельченные образцы персиков массой 20 г вносят в коническую колбу на 250 - 300 см3, добавляют 100 см3 ацетонитрила, интенсивно встряхивают вручную в течение 3 мин и помещают на аппарат для встряхивания на 30 мин, затем в течение 3 мин выдерживают на ультразвуковой бане.

Пробам дают отстояться, затем надосадочную жидкость фильтруют на воронке Бюхнера с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, через двойной фильтр средней плотности в делительную воронку. В коническую колбу с пробой вносят новые порции экстрагента объемом 80 см3 и повторно экстрагируют на аппарате для встряхивания в течение 15 мин, затем на ультразвуковой бане в течение 5 мин, после чего раствор фильтруют на воронке Бюхнера. Экстракты объединяют в делительной воронке.

Объединенный экстракт промывают двумя порциями гексана по 30 см3, отбрасывая гексановую фракцию. Затем экстракт переносят в концентратор и упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C до водного остатка (около 5 см3).

Добавляют в концентратор 100 см3 дистиллированной воды, перемешивают содержимое, обмывая стенки концентратора, и раствор переносят в чистую делительную воронку. Экстракцию хлороталонила проводят 40 см3 дихлорметана. После разделения фаз нижний дихлорметановый слой сливают в концентратор через слой безводного сульфата натрия.

Процедуру повторяют еще 2 раза, используя по 50 см3 дихлорметана. Объединенные экстракты хлороталонила упаривают досуха при температуре не выше 30 °C. Очищают по п. 9.3.

Навеску измельченного корня сельдерея массой 20 г помещают в колбу объемом 250 см3, добавляют 10 см3 0,5 М раствора серной кислоты, 50 см3 ацетонитрила. Смесь встряхивают на аппарате для встряхивания 30 мин. Экстракт отфильтровывают через бумажный фильтр средней плотности в концентратор емкостью 250 см3.

Процедуру экстракции повторяют дважды, каждый раз используя 50 см3 ацетонитрила и помещая экстракты в тот же концентратор. Объединенный экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе до водного остатка при температуре не выше 30 °C.

В концентратор добавляют 5%-й раствор натрия углекислого однозамещенного до pH 4 - 5, содержимое перемешивают и переносят в делительную воронку емкостью 250 см3. Концентратор ополаскивают 100 см3 дистиллированной воды, которую сливают в ту же делительную воронку. К содержимому воронки добавляют 10 г хлористого натрия и интенсивно встряхивают ее до растворения реактива.

Экстракцию хлороталонила и метаболита SDS-3701 проводят 40 см3 дихлорметана. После разделения фаз нижний дихлорметановый слой сливают в концентратор через слой безводного сульфата натрия.

Процедуру повторяют еще 2 раза, используя по 50 см3 дихлорметана. Объединенные экстракты хлороталонила упаривают досуха при температуре не выше 30 °C. Очищают по п. 9.3.

Сухой остаток, полученный по п. 9.1 (персики) или 9.2 (корень сельдерея), находящийся в колбе для упаривания, растворяют в 3 см3 гексана, выдерживают на ультразвуковой бане 60 с и наносят на колонку с флорисилом, подготовленную по п. 7.11. Колбу ополаскивают дважды порциями гексана по 3 см3, которые также наносят на колонку. Скорость прохождения растворителя через колонку - 1 - 2 капли в секунду. Промывают пробу 20 см3 гексана, 20 см3 смеси гексан-этилацетат в объемном соотношении 95:5, элюаты отбрасывают.

Хлороталонил элюируют с колонки 20 см3 смеси гексан-этилацетат в объемном соотношении 9:1 со скоростью 1 - 2 капли в секунду, собирая элюат в круглодонную колбу вместимостью 150 см3.

При анализе образцов корня сельдерея метаболит SDS-3701 элюируют с колонки 30 см3 смеси гексан-этилацетат в объемном соотношении 8:2 со скоростью 1 - 2 капли в секунду, собирая элюат во вторую круглодонную колбу вместимостью 150 см3.

Растворы упаривают досуха при температуре не выше 35 °C. Сухой остаток в первой колбе растворяют в 2 см3 гексана, помещают в ультразвуковую баню на 40 - 60 с и анализируют содержание хлороталонила по п. 9.5.

Сухой остаток во второй колбе подвергают дериватизации по п. 9.4.

К сухому остатку, находящемуся во второй колбе (полученному по п. 9.2), добавляют 3 см3 раствора диазометана, выдерживают 30 мин при комнатной температуре. Для освобождения от избытка диазометана вносят в колбу 0,1 г силикагеля, выдерживают еще 15 мин. Затем добавляют в колбу 0,1 см3 н-пропанола, отдувают растворитель потоком теплого воздуха (не помещая колбу на подогретую водяную баню) до влажного остатка. Вносят в колбу 1 см3 гексана и вновь отдувают растворитель (отсутствие запаха эфира).

Сухой остаток растворяют в 2 см3 гексана, помещают в ультразвуковую баню на 40 - 60 с и анализируют содержание метаболита хлороталонила по п. 9.5.

Газовый хроматограф, снабженный электронозахватным детектором.

Хроматографическая, капиллярная, кварцевая колонка длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, содержащая сорбент: 50% - фенилполисилоксан; 50% - диметилполисилоксан (толщина пленки сорбента 0,25 мкм).

Температура термостата колонки программированная. Начальная температура - 120 °C, выдержка 1 мин, нагрев колонки со скоростью 5 градусов в минуту до температуры 200 °C, выдержка 4 мин, нагрев колонки со скоростью 25 градусов в минуту до температуры 270 °C.

Газ 1 (азот): давление 75 кПа, 35,974 см/с, поток 1,501 см3/мин.

Газ 2 (азот): деление потока 1:3; сброс 6,9 см3/мин.

Хроматографируемый объем: 1 мм3.

Линейный диапазон детектирования: 0,05 - 0,5 нг.

Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочные растворы с концентрацией 0,5 мкг/см3, разбавляют ацетоном не более чем в 50 раз.

Содержание хлороталонила в пробе персиков (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

где C - концентрация хлороталонила, найденная по градуировочной характеристике в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см3;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;

m - масса анализируемого образца, г.

Содержание хлороталонила с учетом его метаболита SDS-3701 в пробе корня сельдерея (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

где А, Б - концентрации хлороталонила и метаболита SDS-3701, найденные по градуировочным графикам в соответствии с величинами площади хроматографических пиков, мкг/см3;

K - коэффициент пересчета содержания метаболита SDS-3701 на эквивалент хлороталонила, по соотношению молекулярных масс (равен 1,07);

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;

m - масса анализируемого образца, г.

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предел повторяемости:

где , - результаты параллельных определений, мг/кг;

r - значение предела повторяемости (табл. 1), при этом .

При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

Результат анализа представляют в виде:

при вероятности P = 0,95,

где - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

- граница абсолютной погрешности, мг/кг:

где - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1).

Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

"содержание хлороталонила и его метаболита в пробах персиков и корне сельдерея менее 0,01 мг/кг" <*>.

--------------------------------

<*> 0,01 мг/кг - предел обнаружения хлороталонила и его метаболита в пробах персиков и корне сельдерея.

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-02 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

13.1. Контроль стабильности градуировочной характеристики

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.

При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее трех образцов концентраций для градуировки, содержание веществ в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,05 до 0,5 мкг/см3.

Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемых для контроля градуировочных растворов сохраняется соотношение:

где X - концентрация веществ в пробе при контрольном измерении, мкг/см3;

C - известная концентрация градуировочного раствора хлороталонила или его метаболита, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;

B - норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (B = 10% при P = 0,95).

Если величина расхождения (A) превышает 10%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов хлороталонила, предусмотренных МВИ. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново согласно п. 7.9.

Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Величина добавки должна удовлетворять условию:

где - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

где - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

где - граница относительной погрешности методики (показатель точности, табл. 1), %.

Контрольный параметр процедуры рассчитывают по формуле:

где , , - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 11) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки соответственно, мг/кг.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

Проводят сопоставление результата контроля процедуры с нормативом контроля (К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости

Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предел воспроизводимости (R):

где , - результаты измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), мг/кг;

R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.