"МУК 4.1.3062-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение остаточного содержания трифлоксистробина и его метаболита в корнеплодах и ботве сахарной свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 14.07.2013)

1. Разработаны сотрудниками ГНУ Всероссийский НИИ фитопатологии.

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 30 мая 2013 г. N 1).

3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 14 июля 2013 г.

4. Введены впервые.

Свидетельство о метрологической аттестации от 14.12.2012 N 01.00225/205-77-12.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовых концентраций трифлоксистробина и его метаболита в ботве и корнеплодах сахарной свеклы в диапазоне 0,02 - 0,20 мг/кг.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Трифлоксистробин

Трифлоксистробин при попадании в воду, почву и растительные объекты быстро гидролизуется с образованием довольно устойчивого метаболита - (E,E)-метоксиимино-{2-[1-(3-трифторметилфенил)-этил-иденамгино-оксиметил]фенил}-уксусной кислоты (ЦГА 321113).

Краткая токсикологическая характеристика

Основной метаболит трифлоксистробина: ЦГА 321113.

Молекулярная масса: 394,4.

Белый порошок без запаха. Другие физико-химические и токсикологические характеристики основного метаболита трифлоксистробина отсутствуют.

Область применения

Трифлоксистробин - синтетический фунгицид из класса стробилуринов, являющихся продуцентами гриба Strobiluras tenacellus. Вещество эффективно против широкого круга грибных патогенов хлебных злаков, овощных, кормовых, технических и плодовых культур. Обладает защитным, лечебным и профилактическим действием.

Применяется в России в яблоневых и грушевых садах в качестве средства борьбы с возбудителями мучнистой росы, парши, альтернариоза, пятнистостей и болезней при хранении с нормой расхода до 70 г д.в./га и двукратной обработкой за сезон с 10 - 14-дневным интервалом.

При соблюдении всех регламентированных условий и проведении анализа в точном соответствии с данной методикой значение погрешности (и ее составляющих) результатов измерений не превышает значений, приведенных в табл.

Метод основан на экстракции трифлоксистробина и его метаболита из ботвы и корнеплодов сахарной свеклы водным раствором ацетона, последовательной очистке экстрактов от коэкстрактивных компонентов перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, на колонке с силикагелем и твердофазной экстракцией, разделении компонентов очищенных экстрактов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с последующим измерением содержания трифлоксистробина и его метаболита с использованием ультрафиолетового детектора и обработкой хроматограмм методом абсолютной градуировки.

Примечание. Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией.

Примечание. Допускается использование других вспомогательных средств измерений и устройств аналогичного назначения, технические характеристики которых не уступают вышеуказанным, а также материалов, обеспечивающих нормативы точности при проведении измерений.

5.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.007-76, 12.1.005-88.

5.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ соблюдают требования противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91. В лаборатории должны быть в наличии средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-90. Обучение работников правилам безопасности труда проводят согласно ГОСТ 12.0.004-90.

5.3. При выполнении измерений с использованием хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

5.4. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и 2.2.5.2308-07.

К выполнению измерений и обработке их результатов допускается специалист, прошедший обучение, имеющий опыт работы в лаборатории и владеющий техникой проведения хроматографического анализа, освоивший данную методику и подтвердивший соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.

При выполнении измерений соблюдают следующие условия.

Температура колонки: комнатная.

Скорость потока элюента: 0,7 куб. см/мин.

Рабочая длина волны: 251 нм.

Чувствительность детектора: 0,01 ед. абсорбции на шкалу.

Объем вводимой пробы: 20 куб. мм.

Подвижная фаза для трифлоксистробина: ацетонитрил-вода (75:25, по объему).

Подвижная фаза для метаболита ЦГА 321113: ацетонитрил-вода-ортофосфорная кислота (59,5:40,4:0,1, по объему).

Линейный диапазон детектирования: (1 - 10) нг.

Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление градуировочных растворов, раствора внесения, подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, градуировка хроматографа, приготовление растворов, концентрирующих патронов, подготовка колонки с силикагелем, проверка поведения трифлоксистробина и его метаболита на колонке с силикагелем и концентрирующем патроне.

8.1.1. Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 ч, после чего перегоняют. Перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом натрия. Используют свежеприготовленным.

8.1.2. Очистка н-гексана

Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до прекращения окрашивания последней в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом. Срок хранения - 1 неделя.

8.1.3. Очистка этилацетата и хлористого метилена

Приготовление раствора натрия углекислого с массовой долей 5%.

Навеску (5 +/- 0,1) г натрия углекислого растворяют в конической колбе в 40 - 60 куб. см бидистиллированной воды. Полученный раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 куб. см и доводят объем раствора до метки бидистиллированной водой.

Срок хранения раствора - 1 неделя.

Каждый растворитель промывают последовательно раствором натрия углекислого с массовой долей 5%, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют. Срок хранения - 1 неделя.

8.1.4. Очистка ацетона

В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 750 куб. см ацетонитрила, 250 куб. см бидистиллированной воды, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр. Эту подвижную фазу используют при анализе трифлоксистробина.

В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 404 куб. см бидистиллированной воды и 1 куб. см ортофосфорной кислоты, перемешивают. Затем к раствору приливают 595 куб. см ацетонитрила, перемешивают и фильтруют через мембранный фильтр. Эту подвижную фазу используют при анализе метаболита ЦГА 321113.

Промывают колонку соответствующей подвижной фазой, приготовленной по п. 8.2, при скорости подачи растворителя 0,5 куб. см/мин. не менее 2 ч до установления стабильной базовой линии (дрейф базовой линии в течение 1 ч не более 5%, а уровень шумов не более 2% диапазона выходного сигнала на шкале измерений).

8.4.1. Исходный градуировочный раствор трифлоксистробина (метаболита ЦГА 321113) с массовой концентрацией 100 мкг/куб. см

В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают (0,010 +/- 0,0001) г трифлоксистробина (метаболига ЦГА 321113), растворяют в 40 - 50 куб. см ацетонитрила, доводят объем раствора ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают.

Раствор трифлоксистробина (метаболита ЦГА 321113) хранят при температуре не выше -18 °C в течение одного месяца (трех месяцев).

8.4.2. Градуировочный раствор трифлоксистробина (метаболита ЦГА 321113) с массовой концентрацией 10 мкг/куб. см (раствор N 1)

В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 10 куб. см исходного градуировочного раствора трифлоксистробина (метаболита ЦГА 321113) с массовой концентрацией 100 мкг/куб. см (п. 8.4.1), разбавляют ацетонитрилом и доводят объем раствора до метки. Эти растворы используют для приготовления градуировочных растворов N 2 - 5, а также для приготовления проб ботвы и корнеплодов с внесением при оценке полноты извлечения трифлоксистробина (метаболита ЦГА 321113) из исследуемых образцов.

Градуировочные растворы N 1 трифлоксистробина и метаболита ЦГА 321113 хранят в при температуре не выше -18 °C в течение недели и месяца, соответственно.

8.4.3. Градуировочные растворы трифлоксистробина (метаболита ЦГА 321113) с массовой концентрацией 0,05 - 0,5 мкг/куб. см (растворы N 2 - 5)

В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают 0,5; 1,0; 2,5 и 5,0 куб. см градуировочного раствора трифлоксистробина (метаболита ЦГА 321113) с массовой концентрацией 10 мкг/куб. см (п. 8.4.2), доводят объем раствора до метки соответствующей подвижной фазой, приготовленной по п. 8.2, тщательно перемешивают, получают растворы N 2 - 5 с массовой концентрацией трифлоксистробина (метаболита ЦГА 321113) 0,05; 0,1; 0,25 и 0,5 мкг/куб. см, соответственно.

Растворы готовят непосредственно перед использованием.

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мВ) от массовой концентрации трифлоксистробина (метаболита ЦГА 321113) в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной градуировки по 4 градуировочным растворам.

В инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют при условиях п. 7.2. Каждый раствор хроматографируют дважды. Расхождение между параллельными определениями не должно превышать предел повторяемости r.

По полученным данным строят градуировочную характеристику.

Контроль стабильности градуировки проводят не реже 1 раза в три месяца, а также при смене реактивов или изменении условий анализа.

Для контроля стабильности используют вновь приготовленные градуировочные растворы с массовой концентрацией исследуемого вещества в начале, середине и в конце диапазонов измерений, которые анализируют в точном соответствии с методикой.

Градуировочную характеристику считают стабильной, если для каждого контрольного образца выполняется условие (1):

Если условие стабильности не выполняется только для одного образца, то повторно анализируют этот образец для исключения результата, содержащего грубую ошибку.

Если градуировка нестабильна, выясняют причины нестабильности и повторяют контроль стабильности с использованием других образцов для градуировки, предусмотренных методикой. При повторном обнаружении нестабильности градуировки прибор градуируют заново.

Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 8 - 10 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 5 г силикагеля I степени активности в 20 куб. см гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку, предназначенную для анализа трифлоксистробина, промывают 30 куб. см этилацетата со скоростью 1 - 2 капли в секунду, затем 30 куб. см смеси гексан-этилацетат (9:1, по объему), а колонку, используемую при анализе метаболита, последовательно промывают 25 куб. см смеси этилацетат-метанол (1:1, по объему) и 30 куб. см смеси этилацетат-метанол (9:1, по объему).

Концентрирующий патрон с привитыми октальными группами промывают последовательно с помощью медицинского шприца 5 куб. см ацетонитрила и 4 куб. см смеси ацетонитрил-вода (3:7, по объему) со скоростью 5 куб. см/мин., не допуская высыхания поверхности патрона.

При отработке методики или поступлении новой партии силикагеля и растворителей проводят определение объема элюента, необходимого для полного вымывания трифлоксистробина и метаболита ЦГА 321113 из колонки с силикагелем.

В круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 0,1 куб. см градуировочного раствора трифлоксистробина с массовой концентрацией 10 мкг/куб. см в ацетонитриле (п. 8.4.2) и отдувают растворитель током азота. Остаток растворяют в 0,3 куб. см этилацетата, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., добавляют 2,7 куб. см гексана, перемешивают и вновь помещают в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку с силикагелем, подготовленную по п. 8.7 для анализа трифлоксистробина. Промывают колонку 50 куб. см смеси гексан-этилацетат (9:1, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду, элюат отбрасывают. Затем через колонку пропускают 50 куб. см смеси гексан-этилацетат (8:2, по объему), отбирая последовательно по 5 куб. см элюата. Каждую фракцию упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °C. Сухие остатки растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., вносят 1 куб. см подвижной фазы, подготовленной по п. 8.2, для анализа трифлоксистробина, перемешивают, а затем хроматографируют в соответствии с п. 7.2.

В круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 0,1 куб. см градуировочного раствора метаболита ЦГА 321113 с массовой концентрацией 10 мкг/куб. см в ацетонитриле (п. 8.4.2) и отдувают растворитель током азота. Остаток растворяют в 2,7 куб. см этилацетата, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., добавляют 0,3 куб. см метанола, перемешивают и вновь помещают в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку с силикагелем, подготовленную по п. 8.7 для анализа метаболита. Промывают колонку 30 куб. см смеси этилацетат-метанол (9:1, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду, элюат отбрасывают. Затем через колонку пропускают 50 куб. см смеси этилацетат-метанол (7:3, по объему), отбирая последовательно по 5 куб. см элюата. Каждую фракцию упаривают досуха, остатки растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., вносят 1 куб. см подвижной фазы, подготовленной по п. 8.2 для анализа метаболита, перемешивают, а затем хроматографируют в соответствии с п. 7.2.

По результатам обнаружения трифлоксистробина и метаболита ЦГА 321113 в каждой из фракций определяют объем элюентов, необходимый для полного вымывания трифлоксистробина и метаболита ЦГА 321113 из колонки.

Отбор проб производят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (от 21.08.79 N 2051-79) и правилами, определенными ГОСТ 17421-82 "Свекла сахарная для промышленной переработки. Требования при заготовках" и ГОСТ Р 52647-2006 "Свела сахарная. ТУ".

Пробы ботвы и корнеплодов сахарной свеклы хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике не более 1 дня; для длительного хранения пробы замораживают и хранят в морозильной камере при температуре не выше -18 °C. Перед проведением анализа ботву и корнеплоды измельчают.

Приготовление водного раствора ацетона с объемной долей 80%

В мерную колбу вместимостью 500 куб. см вносят 100 куб. см бидистиллированной воды и доводят объем раствора до метки ацетоном.

Срок хранения - 1 неделя.

Навеску измельченной ботвы или корнеплодов сахарной свеклы массой 20 г помещают в стакан гомогенизатора вместимостью 500 куб. см, приливают 100 куб. см водного раствора ацетона с объемной долей 80% и гомогенизируют 3 мин. при 10000 об./мин. Суспензию фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу Бунзена вместимостью 250 куб. см. Осадок переносят в коническую колбу вместимостью 250 куб. см, приливают 70 куб. см водного раствора ацетона с объемной долей 80%, перемешивают и колбу помещают в ультразвуковую ванну на 5 мин. Суспензию фильтруют и остаток на фильтре промывают 50 куб. см водного раствора ацетона с объемной долей 80%. Экстракты и промывную жидкость переносят в химический стакан вместимостью 500 куб. см, перемешивают, измеряют объем раствора, 1/4 его часть (эквивалентную 5 г образца) переносят в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см и упаривают на роторном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °C до водного остатка (7 - 10 куб. см). К водному остатку добавляют 20 куб. см деионизованной воды и раствор переносят в химический стакан вместимостью 100 куб. см. Далее проводят очистку экстракта по п. 10.2.

Приготовление раствора гидроксида натрия с молярной концентрацией 1 моль/куб. дм.

Растворяют (4 +/- 0,1) г гидроксида натрия в 50 - 70 куб. см бидистиллированной воды, затем раствор переносят в мерную колбу вместимостью 100 куб. см и доводят объем раствора до метки бидистиллированной водой.

Срок хранения раствора - 1 неделя.

Приготовление раствора ортофосфорной кислоты с молярной концентрацией 5 моль/куб. дм

Растворяют (16,4 +/- 0,1) г ортофосфорной кислоты в 50 - 70 куб. см бидистиллированной воды, затем переносят раствор в мерную колбу вместимостью 100 куб. м и доводят объем раствора до метки бидистиллированной водой.

Срок хранения раствора - 1 неделя.

Водную фракцию, полученную по п. 10.1 и помещенную в химический стакан, подщелачивают раствором гидроксида натрия с молярной концентрацией 1 моль/куб. дм до pH 6, контролируя кислотность раствора с помощью иономера. Раствор переносят в делительную воронку вместимостью 100 куб. см, приливают 30 куб. см гексана, и смесь интенсивно встряхивают в течение 1 мин. После разделения фаз органический слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см. Экстракцию водной фазы повторяют еще два раза, используя 30 и 20 куб. см гексана. Объединенную гексановую фракцию, содержащую трифлоксистробин, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °C.

Оставшуюся после экстракции гексаном водную фазу переносят в химический стакан и подкисляют раствором ортофосфорной кислоты с молярной концентрацией 5 моль/куб. дм до pH 2, контролируя кислотность раствора с помощью иономера. Раствор переносят в делительную воронку вместимостью 100 куб. см, приливают 30 куб. см дихлорметана и смесь интенсивно встряхивают в течение 1 мин. После разделения фаз органический слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см. Экстракцию водной фазы повторяют еще два раза, используя 30 и 20 куб. см дихлорметана. Объединенную дихлорметановую фракцию, содержащую метаболит ЦГА 321113, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °C. Дальнейшую очистку экстрактов проводят по п. 10.3.

При анализе трифлоксистробина сухой остаток гексанового экстракта ботвы или корнеплодов, полученный по п. 10.2, растворяют в 0,3 куб. см этилацетата, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., добавляют 2,7 куб. см гексана, перемешивают, вновь помещают в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку, подготовленную по п. 8.7 для анализа трифлоксистробина. Колбу обмывают 5 куб. см смеси гексан-этилацетат (9:1, по объему), которые также наносят на колонку. Промывают колонку 35 куб. см смеси гексан-этилацетат (9:1, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду, элюат отбрасывают. Трифлоксистробин элюируют с колонки 40 куб. см смеси гексан-этилацетат (8:2, по объему), собирая элюат непосредственно в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см. Раствор упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °C.

Сухой остаток экстракта корнеплодов растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрил-вода (75:25, по объему), помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., и анализируют на содержание трифлоксистробина по п. 11. Экстракт ботвы дополнительно очищают с помощью концентрирующего патрона.

При анализе метаболита ЦГА 321113 сухой остаток дихлорметанового экстракта ботвы или корнеплодов, полученный по п. 10.2, растворяют в 2,7 куб. см этилацетата, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., добавляют 0,3 куб. см метанола, перемешивают, вновь помещают в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку, подготовленную по п. 8.7 для анализа метаболита ЦГА 321113. Колбу обмывают 5 куб. см смеси этилацетат-метанол (9:1, по объему), которые также наносят на колонку. Промывают колонку 30 куб. см смеси этилацетат-метанол (9:1, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду, элюат отбрасывают. Метаболит ЦГА 321113 элюируют с колонки 40 куб. см смеси этилацетат-метанол (7:3, по объему), собирая элюат непосредственно в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см. Раствор упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °C. Сухой остаток экстракта корнеплодов растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрил-вода-ортофосфорная кислота (59,5:40,4:0,1, по объему), помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., и анализируют на содержание метаболита ЦГА 321113 по п. 11. Экстракт ботвы дополнительно очищают с помощью концентрирующего патрона.

Сухой остаток экстракта ботвы, полученный по п. 10.3, растворяют с помощью ультразвуковой ванны в 2 куб. см смеси ацетонитрил-вода (3:7, по объему) и переносят в подготовленный по п. 8.7 концентрирующий патрон. Патрон промывают 2 куб. см смеси ацетонитрил-вода (4:6, по объему), элюат отбрасывают. Трифлоксистробин и метаболит ЦГА 321113 элюируют 2 куб. см смеси ацетонитрил-вода (9:1) в круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см. Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре не выше 35 °C. Остаток в колбе растворяют в 2 куб. см смеси ацетонитрил-вода (75:25) при анализе на содержание трифлоксистробина или в 2 куб. см смеси ацетонитрил-вода-ортофосфорная кислота (59,5:40,4:0,1) при анализе на содержание метаболита ЦГА 321113 и хроматографируют в соответствии с п. 7.2.

Полнота извлечения компонентов при проведении всех операций подготовки пробы не менее 84%.

11.1. В инжектор хроматографа вводят 20 куб. мм очищенного экстракта анализируемой пробы (пп. 10.1 - 10.4), анализируют при условиях п. 7.2 и регистрируют хроматограмму. Каждый экстракт хроматографируют дважды.

11.2. Для каждого образца корнеплодов повторяют операции по пп. 10.1 - 10.3, 11.1, ботвы - по пп. 10.1 - 10.4, 11.1.

12.1. Для обработки результатов хроматографического анализа используют программу сбора и обработки хроматографической информации "МультиХром для Windows", версия 1.5x.

Альтернативная обработка результатов.

Массовую долю трифлоксистробина (метаболита ЦГА 321113) X, мг/кг, в ботве и корнеплодах сахарной свеклы рассчитывают по формуле (2):

При расчете содержания метаболита ЦГА 321113 в эквивалентах трифлоксистробина полученное значение X умножают на 1,04.

12.2. За результат измерений принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, если выполняется условие приемлемости (3):

Если условие (3) не выполняется, выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и повторяют выполнение измерений в соответствии с требованиями МВИ.

12.3. Результат анализа в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде:

При необходимости результаты определения трифлоксистробина и метаболита ЦГА 321113 суммируют и сравнивают с утвержденными гигиеническими нормативами.

В случае если полученный результат измерений ниже нижней границы диапазона измерений, то результат анализа представляют в виде:

"массовая доля трифлоксистробина в корнеплодах, ботве сахарной свеклы менее 0,02 мг/кг";

"массовая доля метаболита ЦГА 321113 в корнеплодах, ботве сахарной свеклы менее 0,02 мг/кг".

Экстракты, при хроматографировании которых получают аналитический сигнал трифлоксистробина (метаболита ЦГА 321113), превышающий аналитический сигнал, получаемый при хроматографировании градуировочных растворов с массовой концентрацией 0,5 мкг/куб. см, разбавляют соответствующей подвижной фазой и анализируют в соответствии с данной методикой.

13.1. Проверку приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости проводят:

а) при возникновении спорных ситуаций между двумя лабораториями;

б) при проверке совместимости результатов измерений, полученных при сличительных испытаниях (при проведении аккредитации лабораторий и инспекционного контроля).

13.2. Для проведения проверки приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости каждая лаборатория использует пробы, оставленные на хранение.

13.3. Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):

Если предел воспроизводимости не превышен, то приемлемы все результаты измерений и в качестве окончательного результата используют их среднеарифметическое значение. Если предел воспроизводимости превышен, то выполняют процедуры, изложенные в ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 (п. 5.3.3).

При разногласиях руководствуются ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 (п. 5.3.4).

Контроль качества результатов измерений в лаборатории при реализации методики осуществляют по ГОСТ Р ИСО 5725-6-02, используя контроль стабильности среднеквадратического (стандартного) отклонения повторяемости по п. 6.2.2 ГОСТ Р ИСО 5725-6-02 и показателя правильности по п. 6.2.4 ГОСТ Р ИСО 5725-6-02.

Рекомендуется устанавливать контролируемый период так, чтобы количество результатов контрольных измерений было от 20 до 30.

При неудовлетворительных результатах контроля, например, при превышении предела действия или регулярном превышении предела предупреждения, выясняют причины этих отклонений, в том числе проводят смену реактивов, проверяют работу оператора.