"МУК 4.1.2456-09. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств тау-флювалината в воде и почве методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 02.02.2009)

1. Разработаны Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К.А. Тимирязева, Учебно-научным консультационным центром "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов" Минсельхоза России.

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 25 декабря 2008 г. N 3).

3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 2 февраля 2009 г.

4. Введены в действие с 29 апреля 2009 г.

5. Введены впервые.

Настоящие Методические указания устанавливают метод газожидкостной хроматографии для определения массовой концентрации тау-флювалината в воде в диапазоне 0,001 - 0,01 мг/кг; в почве в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг.

Название действующего вещества по ИСО: тау-флювалинат.

Название по ИЮПАК: (RS)-альфа-циано-3-феноксибензил-N-(2-хлор-альфа, альфа, альфа-трифтор-p-толил-D-валинат.

Структурная формула (не приводится).

В России установлены следующие гигиенические нормативы:

ДСД - 0,005 мг/кг/сутки; ПДК в воде - 0,002 мг/куб. дм; ОДК в почве - 0,01 мг/кг.

Тау-флювалинат - инсектицид из группы синтетических пиретроидов контактного и кишечного действия с выраженным акарицидным действием. Он эффективно подавляет развитие вредителей из отрядов жесткокрылых, чешуекрылых, двукрылых и плодовых клещей.

Применяется для борьбы с грызущими и сосущими насекомыми с нормой расхода 0,05 - 0,4 кг д.в. на га в зависимости от культуры и в посевах пшеницы, ячменя, рапса, сои, льна, в посадках картофеля, винограда, на пастбищах и в городских зеленых насаждениях.

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.

Метод основан на извлечении тау-флювалината из почвы ацетонитрилом, переэкстракции в гексан и окончательном определении тау-флювалината методом ГЖХ с использованием детектора по захвату электронов. Из воды тау-флювалинат извлекают гексаном.

Идентификация проводится по времени удерживания двух характерных пиков. Количественное определение - методом абсолютной калибровки по сумме двух характерных пиков.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Избирательность обеспечивается путем подбора капиллярной колонки и условий программирования температуры.

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда по ГОСТ 12.0.004.

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С и относительной влажности не более 80%;

- выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

100 мг тау-флювалината (аналитического стандарта) вносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют навеску в ацетоне и доводят объем до метки ацетоном (стандартный раствор N 1, концентрация 1 мг/куб. см). Раствор хранится в холодильнике около 120 суток.

Методом последовательного разбавления исходного раствора N 1 ацетоном готовят рабочие растворы тау-флювалината с концентрацией: 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/куб. см, которые могут храниться в холодильнике не более 30 суток.

Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят 1 куб. мм рабочего раствора тау-флювалината с концентрацией 0,1; 0,2; 0,5; 1,0 мкг/куб. см. Проводят не менее 5 параллельных измерений и находят среднее значение суммы площадей двух характерных хроматографических пиков для каждой концентрации.

По полученным данным строят градуировочный график зависимости суммы площадей двух характерных хроматографических пиков в Hz от концентрации тау-флювалината в растворе в мкг/куб. см.

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" N 2051-79 от 21.08.79, а также в соответствии с ГОСТ Р 51592-2000 "Вода. Общие требования к отбору проб", ГОСТ 1743.01-83 "Почвы. Общие требования к отбору проб", ГОСТ 26950-89 "Почвы. Отбор проб".

Пробы воды хранят в герметично закрытой стеклянной таре в холодильнике при температуре 0 - 4 °С.

Пробы почвы просушивают в отсутствии прямого солнечного света, хранят в сухом шкафу при комнатной температуре.

Перед анализом почву растирают, просеивают через сито с ячейками диаметром 0,1 мм.

Пробу воды объемом 200 куб. см переносят в делительную воронку объемом 500 куб. см, добавляют 5 г хлорида натрия, растворяют. Добавляют 50 куб. см гексана и встряхивают делительную воронку в течение двух минут. После полного разделения слоев нижний водный слой сливают в плоскодонную колбу, а верхний гексановый собирают в концентратор емкостью 250 куб. см, пропуская через слой безводного сульфата натрия. Водную фракцию возвращают в делительную воронку. Экстракцию повторяют еще дважды, используя для этого каждый раз 50 куб. см гексана. Гексановые экстракты объединяют в концентраторе и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °С досуха.

Сухой остаток в концентраторе растворяют в 2 куб. см ацетона и 1 куб. мм вводят в хроматограф.

Навеску 20 г почвы помещают в центрифужную банку объемом 200 куб. см и смачивают ее 20 куб. см дистиллированной воды. К навеске добавляют 50 куб. см ацетонитрила и встряхивают смесь на встряхивателе в течение 30 мин. Затем пробу центрифугируют 5 мин. при 4000 об./мин. и фильтруют полученный экстракт методом декантации через фильтр "красная лента" в концентратор емкостью 250 куб. см. Повторяют экстракцию еще дважды, используя по 30 куб. см ацетонитрила, встряхивая смесь каждый раз по 30 мин. Объединенные экстракты выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани не выше 35 °С до водного остатка. (Выпаривание проводить осторожно, так как возможно вспенивание ацетонитрила!)

К водному остатку в концентраторе добавляют 100 куб. см воды, ополаскивают стенки концентратора и переносят водную фазу в делительную воронку емкостью 250 куб. см.

Добавляют в ту же воронку 5 г хлорида натрия и 30 куб. см гексана, интенсивно встряхивают смесь в течение 1 - 2 мин. После разделения слоев нижний водный слой сливают в тот же концентратор, а верхний гексановый собирают в чистый концентратор емкостью 250 куб. см, пропуская через слой безводного сульфата натрия. Водную фракцию возвращают в делительную воронку. Экстракцию повторяют еще дважды, используя для этого каждый раз 30 куб. см гексана. Гексановые экстракты объединяют в концентраторе и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °С досуха.

Сухой остаток в концентраторе растворяют в 2 куб. см ацетона и 1 куб. мм вводят в хроматограф.

Хроматограф газовый HP6890 Series GC System, ECD, с детектором электронного захвата, ЭЗД, в модификации с электронным управлением пневмонической системы (ЭУПС).

Капиллярная кварцевая колонка Rtx(R)-1 100% Dimethyl polysiloxane, длина 30 м, внутренний диаметр 0,25 мм, толщина пленки 0,25 мкм.

Температура детектора - 320 °С, поток обдува анода (азот) - 6,0 мл/мин., поток поддува - 59,0 мл/мин.

Температура испарителя - 270 °С, режим Split, тип газа гелий, давление 19,40 psi, деление потока 10:1, split поток - 10,0 мл/мин.

Программированный нагрев колонки с 200 °С (выдержка 2 мин.) по 20 °С/мин. до 260 °С (выдержка 15 мин.), режим постоянного потока, поток колонки 1,0 мл/мин., средняя скорость 31 см/с.

Абсолютное время удерживания тау-флювалината - 16,830 мин. +/- 3%.

Минимально детектируемое количество тау-флювалината в анализируемом объеме - 0,1 нг.

Линейность детектирования сохраняется в пределах - 1,0 - 0,1 нг.

Каждую анализируемую пробу вводят в хроматограф 3 раза и вычисляют среднюю площадь пика.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией тау-флювалината 1,0 мкг/куб. см соответственно, разбавляют.

Количественное определение тау-флювалината проводят по методу абсолютной калибровки посредством сравнения с хроматограммами стандартных растворов тау-флювалината с концентрацией 0,1 - 1,0 мкг/куб. см.

Для обработки результатов хроматографического анализа используется программное обеспечение химического анализа HP GC ChemStation Rev. A.06.03RUS.

Альтернативная обработка результатов.

Для определения содержания тау-флювалината в пробах методом ГЖХ используют следующую формулу:

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

Результат анализа представляют в виде:

где дельта - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

"содержание вещества в пробе менее 0,01 мг/кг" <*>.

--------------------------------

<*> 0,01 мг/кг - предел обнаружения.

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.

Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):