"МУК 4.1.2444-09. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовых концентраций циклического (L-лейцил-D-фенилаланил-L-пролил-L-валил-L-орнитил-L-лейцил-D-фенлил-L-валил-L-орнитил) дихлоргидрата (грамицидина C дигидрохлорид, грамицидин C) в воздухе рабочей зоны методом спектрофотометрии. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 27.01.2009)

1. Подготовлены коллективом авторов ГУ Научно-исследовательского института медицины труда РАМН.

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 25 декабря 2008 г.).

3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 27 января 2009 г.

4. Введены в действие с 19 апреля 2009 г.

5. Введены впервые.

Сборник методических указаний "Измерение концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны" (выпуск 50) разработан с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) и является обязательным при осуществлении санитарного контроля.

Включенные в данный сборник методические указания по контролю вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования", ГОСТ Р 8.563-96 "Государственная система обеспечения единства измерений. Методики выполнения измерений", ГОСТ Р ИСО 5725 (части 1 - 6) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

Методики выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и ниже их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в гигиенических нормативах ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.2308-07 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и дополнениях к ним.

Методические указания по измерению массовых концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для лабораторий "ФГУЗ ЦГ и Э", санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов и других заинтересованных министерств и ведомств.

Настоящие методические указания устанавливают метод количественного химического анализа воздуха рабочей зоны для определения в нем грамицидина C дигидрохлорида методом спектрофотометрии в диапазоне массовых концентраций от 0,1 до 1,4 мг/куб. м.

2.1. Структурная формула (см. рис. 1 - не приводится).

2.3. Молекулярная масса 1214,4.

2.4. Регистрационный номер CAS отсутствует.

2.5. Физико-химические свойства

Грамицидина C дигидрохлорид - порошок белого или белого с желтоватым оттенком цвета с температурой плавления 278 - 279 °C. Растворим в 15 частях этилового спирта 96%, практически нерастворим в ацетоне.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.6. Токсикологическая характеристика

Грамицидина C дигидрохлорид - полипептидный антибиотик, бактерициден для большинства грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, умеренно опасное и умеренно токсичное вещество, обладает высокой кумулятивной активностью, а также чрезвычайно выраженным раздражающим действием на слизистые оболочки и кожные покровы.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) грамицидина C дигидрохлорида в воздухе рабочей зоны - 0,2 мг/куб. м.

При соблюдении всех регламентных условий и проведении анализа в точном соответствии с прописью методика обеспечивает выполнение измерений массовых концентраций грамицидина C дигидрохлорида с метрологическими характеристиками, не превышающими значений, представленных в табл. 1 (при доверительной вероятности P = 0,95).

Измерения массовых концентраций грамицидина C дигидрохлорида выполняют методом спектрофотометрии.

Метод определения основан на способности растворов грамицидина C дигидрохлорида в этиловом спирте 96% поглощать УФ-излучение.

Измерение проводят при длине волны 220 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр АФА-ВП-10.

Нижний предел измерения содержания грамицидина C дигидрохлорида в анализируемом объеме пробы - 50 мкг.

Нижний предел измерения массовой концентрации грамицидина C дигидрохлорида в воздухе - 0,1 мг/куб. м (при отборе 500 куб. дм воздуха).

Метод специфичен в условиях производства 2% спиртового раствора грамицидина C дигидрохлорида. Определению не мешает этиловый спирт.

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы.

Допускается применение иных средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками и квалификацией не хуже приведенных в данном разделе.

6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с вредными веществами по ГОСТ 12.1.007-76 и ГОСТ 12.1.005-88, требования электробезопасности по ГОСТ 12.1.019-79, а также требования, изложенные в технической документации на приборы.

6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-90.

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица, имеющие высшее или специальное химическое образование, опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой спектрофотометрического анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы оперативного контроля при проведении процедур контроля погрешности анализа.

8.1. Процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в стандартных условиях при температуре воздуха (20 +/- 5) °C, атмосферном давлении 84 - 106 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.

8.2. Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовку спектрофотометра, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

9.1.1. Основной стандартный раствор грамицидина C дигидрохлорида с массовой концентрацией 500 мкг/куб. см готовят растворением 0,0581 г грамицидина C дигидрохлорида в этиловом спирте 96% в мерной колбе вместимостью 100 куб. см. Раствор устойчив в течение месяца при хранении в холодильнике.

9.1.2. Рабочий стандартный раствор грамицидина C дигидрохлорида N 1 с массовой концентрацией 100 мкг/куб. см готовят разбавлением 20 куб. см основного стандартного раствора этиловым спиртом 96% в мерной колбе вместимостью 100 куб. см. Раствор устойчив в течение двух недель при хранении в холодильнике.

Подготовку спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость оптической плотности раствора от массы грамицидина C дигидрохлорида, устанавливают по шести сериям растворов из пяти параллельных определений в каждой серии согласно табл. 2.

Градуировочные растворы устойчивы в течение суток.

Подготовленные градуировочные растворы перемешивают и через 20 мин. измеряют оптические плотности растворов в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 220 нм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества (табл. 2, раствор 1). Строят градуировочную характеристику: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им содержания грамицидина C дигидрохлорида в мкг.

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят не реже 1 раза в квартал, а также при смене реактивов и изменении условий анализа (после ремонта и поверки прибора).

Для контроля стабильности готовят три градуировочных раствора по п. 9.3 (в начале, в середине и в конце диапазона измерений) и анализируют в точном соответствии с прописью методики.

Градуировочную характеристику считают стабильной, если для каждого контрольного образца выполняется условие:

где +/- дельта - границы относительной погрешности, % (табл. 1).

Если условие стабильности не выполняется только для одного образца, то выполняют повторное измерение этого образца с целью исключения результата, содержащего грубую ошибку.

Если градуировка нестабильна, выясняют причины нестабильности и повторяют контроль стабильности с использованием других образцов для градуировки, предусмотренных методикой. При повторном обнаружении нестабильности градуировки прибор градуируют заново.

Отбор проб следует проводить с учетом требований ГОСТ 12.1.005-88 и Руководства Р 2.2.2006-05 (прилож. 9, обязательное).

Воздух с объемным расходом 40,0 куб. дм/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-10, помещенный в фильтродержатель. Для измерения 1/2 ОБУВ грамицидина C дигидрохлорида следует отобрать 500 куб. дм воздуха. Пробы хранятся в бюксах с пришлифованными крышками в течение трех дней в холодильнике.

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический бюкс вместимостью 25 куб. см, приливают 5 куб. см этилового спирта 96% и оставляют на 15 минут, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр тщательно отжимают, раствор сливают в другой бюкс. Фильтр повторно обрабатывают 5 куб. см того же растворителя, снова тщательно отжимают и удаляют. Оба раствора сливают в мерную пробирку с пришлифованной пробкой вместимостью 10 куб. см, раствор доводят до 10 куб. см этиловым спиртом 96%, далее анализ проводят аналогично градуировочным растворам.

Степень десорбции вещества с фильтра 97%.

Оптическую плотность получаемых анализируемых растворов измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 220 нм по отношению к раствору сравнения, используя чистый фильтр АФА-ВП-10.

Количественное определение содержания грамицидина C дигидрохлорида проводят по предварительно построенной градуировочной характеристике.

Массовую концентрацию грамицидина C дигидрохлорида, C, мг/куб. м, в воздухе рабочей зоны, вычисляют по формуле:

В случае, если полученный результат анализа ниже нижней границы диапазона измерения, то результат следует указать: массовая концентрация грамицидина C дигидрохлорида менее 0,1 мг/куб. м.

Результат количественного химического анализа представляют в виде:

где C - значение результатов измерения массовой концентрации грамицидина C гидрохлорида, мг/куб. м;

+/- U - границы расширенной неопределенности результата измерения по таблице N 1, мг/куб. м.

При проведении контроля правильности следует использовать концентрации стандартных растворов, которые входят в серию растворов, используемых при построении градуировочной характеристики.

При отрицательном результате контроля правильности выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.

Контроль повторяемости проводят при каждом измерении.

Образцом для контроля повторяемости служит экстракт реальной пробы воздуха рабочей зоны, полученный при обработке фильтра.

Выполняют два единичных измерения в условиях повторяемости (измерение идентичных образцов выполняет один и тот же оператор, на одном экземпляре прибора, практически в одно и то же время и т.д.).

Результат контроля повторяемости признают удовлетворительным при выполнении условия:

При превышении предела повторяемости для трех измерений в качестве результата измерения фиксируется медиана трех измерений, т.е. выбирается второе по значению измерение в ряду расположенных по возрастанию значений.

Образцом для контроля промежуточной прецизионности служит экстракт реальной пробы воздуха рабочей зоны, полученный при обработке фильтра.

Выполняют два измерения в условиях промежуточной прецизионности с участием одной лаборатории. Пробы анализируют в точном соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа (время между измерениями, оборудование и его калибровка, партии реактивов, оператор и др.) при соблюдении вышеуказанных условий.

Результат контроля промежуточной прецизионности признают удовлетворительным при выполнении условия:

При отрицательном результате контроля промежуточной прецизионности выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.

Для проведения серии анализов из 6 проб требуется 2 ч 30 мин.

Приведение объема воздуха к стандартным условиям при температуре 293 K (20 °C) и атмосферном давлении 101,33 кПа (760 мм рт. ст.).

Байотрин

Бенфлутрин

Витаглутам

Гистаминглутаровая кислота

Грамицидин C

Грамицидин C дигидрохлорид

Дифенилметакрилат

Кефзол

Метофлутрин

Нитроксолин

Пара-хлорфенилметакрилат

Трансфлутрин

Цефезол

Цефазолин

Цефазолина натриевая соль