"МУК 4.1.2680-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств метазахлора в капусте методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 02.08.2010)

1. Разработаны сотрудниками ГНУ Всероссийского НИИ защиты растений, Санкт-Петербург.

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 10.06.2010 N 1).

3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 2 августа 2010 г.

4. Введены в действие с 1 октября 2010 г.

5. Введены впервые.

Название действующего вещества по ICO: Метазахлор.

Название по IUPAC: 2-хлор-N-(пиразол-1-илметил)ацет-2',6'-ксилидид.

Структурная формула (не приводится).

Мол. масса: 277,8.

Растворимость: в воде 430 мг/л (20 °C); ацетон, хлороформ > 1000, этилацетат 590, этанол 200, все в г/кг (20 °C).

Стабилен как минимум 2 года при 40 °C.

Область применения: гербицид, предназначен для борьбы с однолетними злаковыми и двудольными сорняками.

Гигиенические нормативы: МДУ в капусте 0,02 мг/кг.

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

Метрологическая характеристика метода представлена в табл. 1 и 2.

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в таблице 2.

Методика основана на определении метазахлора методом капиллярной газожидкостной хроматографии с использованием электронозахватного детектора после его извлечения из образцов органическим растворителем, очистке путем перераспределения между двумя жидкими фазами и дополнительной очистке на патроне с силикагелем. Идентификация метазахлора проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.

Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

В обычных условиях пиклорам и его препараты устойчивы, с основаниями пиклорам образует хорошо растворимые в воде соли.

Допускается использование реактивов квалификацией не ниже указанных.

Допускается использование другого вспомогательного оборудования с техническими характеристиками не хуже указанных.

4.1. При проведении работы необходимо соблюдать требования техники безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами (ГОСТ 12.1.005, ГОСТ 12.1.007). Организация обучения работников безопасности труда по ГОСТ 12.0.004.

При выполнении измерений с использованием газового хроматографа и работе с электроустановками соблюдать правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкциями по эксплуатации приборов.

4.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом газожидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.

При выполнении измерений выполняют следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха 20 +/- 5 °C и относительной влажности не более 80%.

- выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

Отбор проб капусты проводят в соответствии с ГОСТ 1724-85 "Капуста белокочанная свежая. Заготовка и поставка" или ГОСТ 7967-87 "Капуста краснокочанная свежая. Заготовка и поставка". Для длительного хранения образцы капусты помещают в герметично закрытый двойной полиэтиленовый пакет и хранят в морозильной камере с температурой -18 °C.

Капиллярную колонку перед анализом кондиционируют в токе азота при температуре 250 °C до установления нулевой линии.

Насыщенный раствор NaCl.

В коническую колбу на 250 куб. см наливают 150 куб. см дистиллированной воды и насыпают в нее хлористый натрий при постоянном перемешивании до тех пор, пока осадок не перестанет растворяться. Колбу выдерживают в течение 30 мин. при комнатной температуре, периодически помешивая раствор. Если осадок растворился, добавляют еще хлористого натрия и процедуру повторяют до образования стойкого осадка.

Точную навеску метазахлора (0,010 +/- 0,001 г) помещают в мерную колбу объемом 100 куб. см, растворяют в гексане, доводят до метки и получают основной раствор с концентрацией 100 мкм/мл.

Градуировочные растворы с концентрациями 1,0, 0,5, 0,2, 0,1 мкг/куб. см готовят из стандартного раствора методом последовательного разбавления гексаном по объему. Для приготовления раствора с концентрацией 1,0 мкг/куб. см в мерную колбу на 100 куб. см вносят 1 куб. см основного раствора и доводят до метки гексаном. Для получения градуировочных растворов с концентрациями 0,5, 0,2, 0,1 мкг/куб. см разбавляют предыдущий раствор (1 мкг/куб. см) в 2, 5 и 10 раз.

Все растворы хранят в холодильнике не больше одного месяца.

Для построения градуировочного графика в хроматограф вводят по 1 куб. мм каждого из градуировочных растворов (3 параллельных определения для каждой концентрации, не менее 4-х точек по диапазону измеряемых концентраций), измеряют высоты или площади пиков и строят график зависимости среднего значения высоты или площади пика от концентрации метазахлора в градуировочном растворе (мкг/куб. см).

Градуировочную характеристику необходимо проверять при замене реактивов, хроматографической колонки или элементов хроматографической системы, а также при отрицательном результате контроля градуировочного коэффициента.

Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего условия:

Навеску измельченных кочанов капусты (20 +/- 0,1) г помещают в коническую колбу, заливают 50 куб. см 50%-ного водного ацетона и экстрагируют метазахлор в ультразвуковой ванне в течение 10 мин. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр "красная лента", остаток с фильтра переносят обратно в колбу и экстракцию повторяют еще два раза, используя каждый раз по 50 куб. см 50%-ного водного ацетона. От объединенного фильтрата берут аликвоту 1/2, соответствующую 10 г навески, и упаривают ее на ротационном испарителе до водного остатка при температуре не выше 40 °C. К остатку добавляют 10 куб. см насыщ. раствора NaCl, доводят объем до 50 куб. см дистиллированной водой и переносят в делительную воронку. Метазахлор трижды экстрагируют гексаном по 25 куб. см. После разделения фаз органический слой собирают в круглодонную колбу, фильтруя через слой безводного сульфата натрия (10 г). Гексан упаривают на ротационном испарителе при температуре не выше 40 °C. Сухой остаток очищают на патроне с силикагелем (п. 9.2).

Очистку проводят на концентрирующем патроне ДИАПАК СИЛИКАГЕЛЬ. Патрон промывают 3 куб. см гексана.

Сухой остаток, полученный при упаривании очищенных по п. 10.1 экстрактов, количественно переносят тремя порциями по 1 куб. см гексана в патрон. Промывают патрон последовательно 2 куб. см гексана, 20 куб. см элюента N 1 (гексан:этилацетат 19:1). Фильфат отбрасывают. Метазахлор элюируют последовательно 10 куб. см элюента N 2 (гексан:этилацетат 9:1) и 5 куб. см элюента N 3 (гексан:этилацетат 8:2). Элюат собирают в грушевидную колбу и упаривают на ротационном испарителе при температуре не выше 40 °C. Сухой остаток растворяют в 1 куб. см гексана и 1 куб. мм вводят в испаритель хроматографа.

Газовый хроматограф "Кристалл 2000М" с ДЭЗ; колонка кварцевая капиллярная, длина 30 м, диаметр 0,32 мм с неподвижной фазой НР-1 (0,25 мкм); температура термостата колонки в программируемом режиме от 140 °C (1 мин.) до 180 °C со скоростью 20 °C/мин.; температура испарителя 250 °C, температура детектора 300 °C; газ-носитель - азот, расход газа-носителя 52,5 мл/мин. (давление 90 кПа), сброс - 50 мл/мин., поддув в ДЭЗ - 30 мл/мин., деление потока 1:20; хроматографируемый объем 1 куб. мм, анализируемый объем 1 куб. см. Время удерживания метазахлора 9 мин. 5 сек. +/- 5 сек.

Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки, содержание метазахлора в образце капусты (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

V - объем пробы, подготовленной для хроматографического анализа, куб. см;

P - навеска анализируемого образца, г;

C - концентрация стандартного раствора метазахлора, мкг/куб. см.

Содержание остаточных количеств метазахлора в анализируемом образце вычисляют как среднее из 2-х параллельных определений.

При получении зашкаленных пиков анализируемый экстракт разбавляют гексаном.

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

Результат анализа представляют в виде:

ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

дельта - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.

В случае, если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

"содержание вещества в пробе "менее нижней границы определения" (например: менее 0,01 мг/кг <*>).

--------------------------------

<*> 0,01 мг/кг - предел обнаружения метазахлора в капусте.

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.

где ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

дельта - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений, Санкт-Петербург.