"МУК 4.1.1860-04. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентрации имидаклоприда в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе населенных мест методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Минздравом России 05.03.2004)

1. Методические указания подготовлены Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

3. Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.

4. Введены впервые.

Настоящие Методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе массовой концентрации имидаклоприда в диапазонах 0,05 - 0,5 мг/куб. м (воздух рабочей зоны); 0,004 - 0,04 мг/куб. м (атмосферный воздух).

Имидаклоприд - действующее вещество препарата ТАНРЕК, ВРК (200 г/л), фирма-производитель Август, Россия.

1-(6-хлорпиридин-2-илметил)-N-нитроимидазолидин-2-илиденамин (IUPAC).

Структурная формула (не приводится).

Область применения препарата

Имидаклоприд - инсектицид нервно-паралитического действия, эффективно уничтожает листовую тлю, белокрылку, минеров, трипсов, колорадского жука, долгоносиков на хлопчатнике, рисе, картофеле, кукурузе, сахарной свекле, овощных культурах, цитрусовых, косточковых и семечковых плодовых в течение вегетационного периода. Вещество обладает системной активностью и может использоваться для обработки почвы и наземных органов растений.

Ориентировочно безопасный уровень воздействия (ОБУВ) в воздухе рабочей зоны - 0,2 мг/куб. м, в атмосферном воздухе - 0,02 мг/куб. м.

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью дельта, не превышающей +/- 25%, при доверительной вероятности 0,95.

Измерения концентраций имидаклоприда выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

Концентрирование имидаклоприда из воздуха осуществляют на бумажный фильтр "синяя лента", экстракцию с фильтров проводят ацетоном.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 1 нг.

Определению не мешают компоненты препаративной формы.

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

Допускается применение другого оборудования и хроматографических колонок с аналогичными техническими характеристиками, обеспечивающими аналогичное разделение.

4.1. При работе с реактивами соблюдать требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами по ГОСТу 12.1.005.

4.2. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТом 12.1.019 и инструкцией по эксплуатации прибора.

К выполнению измерений допускают лиц, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях согласно ГОСТу 15150 при температуре воздуха (20 +/- 10) °С, атмосферном давлении 630 - 800 мм рт. ст. и влажности не более 80%;

- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

Перед выполнением измерений проводят очистку органических растворителей, подготовку подвижной фазы для ВЭЖХ, приготовление растворов, кондиционирование хроматографических колонок, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

7.1.1. Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

7.1.2. Очистка ацетона

Растворитель сушат над молекулярными ситами 4 А и подвергают фракционной перегонке на ректификационной колонне, целиком собранной из стекла с числом теоретических тарелок не менее 30. До начала отбора главной фракции приемник несколько раз промывают дистиллятом. Перегонку продолжают до тех пор, пока в сосуде для перегонки не останется приблизительно 100 куб. см ацетона. Температуру водяной бани следует снижать по мере уменьшения объема ацетона, во всех случаях она не должна превышать температуру кипения ацетона более чем на 20°.

7.1.3. Контроль чистоты ацетона

В круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 30 куб. см ацетона, упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха, в колбу вносят 5 куб. см подвижной фазы для ВЭЖХ (п. 7.2) и анализируют раствор в условиях хроматографирования по п. 7.6.1.

В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 300 куб. см ацетонитрила, доводят объем до метки дистиллированной водой, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

7.3.1. Исходный раствор имидаклоприда для градуировки (концентрация 1 мг/куб. см)

В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,1 г имидаклоприда, растворяют в 50 - 70 куб. см ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

7.3.2. Раствор N 1 имидаклоприда для градуировки (концентрация 10 мкг/куб. см)

В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 1 куб. см исходного стандартного раствора имидаклоприда с концентрацией 1 мг/куб. см (п. 7.3.1), разбавляют ацетонитрилом до метки. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

7.3.3. Рабочие растворы N 2 - 6 имидаклоприда для градуировки (концентрация 0,05 - 0,5 мкг/куб. см)

В 5 мерных колб вместимостью 100 куб. см помещают по 0,5; 1,0; 2,0; 3,0 и 5,0 куб. см раствора N 1 имидаклоприда с концентрацией 10 мкг/куб. см (п. 7.3.2), доводят до метки подвижной фазой (п. 7.2), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 6 с концентрацией имидаклоприда 0,05; 0,1; 0,2; 0,3 и 0,5 мкг/куб. см соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике не более 3-х дней.

7.4.1. Воздух рабочей зоны

Отбор проб воздуха проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".

В течение 15 минут последовательно отбирают 3 пробы, для чего воздух с объемным расходом 1 - 5 куб. дм/мин. аспирируют в течение 5 минут через фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации имидаклоприда на уровне 0,5 ОБУВ воздуха рабочей зоны необходимо отобрать 2,5 куб. дм воздуха.

7.4.2. Атмосферный воздух

Отбор проб воздуха проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 17.2.4.02-81 "ОПА. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ в воздухе населенных мест". Воздух со скоростью 5 куб. дм/мин. аспирируют через фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации имидаклоприда на уровне 0,8 ОБУВ атмосферного воздуха необходимо отобрать 15,6 куб. дм воздуха.

Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильной камере при +4 °С - 7 дней.

Промывают колонку подвижной фазой (п. 7.2) в течение 30 минут при скорости подачи растворителя 1 куб. см/мин. до установления стабильной базовой линии.

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (отн. единицы) от концентрации имидаклоприда в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной градуировки по 5-ти сериям растворов для градуировки. Каждую серию, состоящую из 5-ти растворов N 2 - 6, готовят по п. 7.3.3.

В инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.6.1. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают площадь пика имидаклоприда.

7.6.1. Условия хроматографирования

Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Zorbax ODS, зернением 5 мкм

Температура колонки: комнатная

Подвижная фаза: ацетонитрил - вода (30:70 по объему)

Скорость потока элюента: 1 куб. см/мин.

Рабочая длина волны: 268 нм

Чувствительность: 0,005 ед. абсорбции на шкалу

Объем вводимой пробы: 20 куб. мм

Время выхода имидаклоприда: 5,4 - 5,6 мин.

Линейный диапазон детектирования: 2 - 20 нг

7.7.1.2. Альтернативная неподвижная фаза

Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая Hypersil ODS, зернением 5 мкм.

Условия хроматографирования те же, что в п. 7.6.1.

Время выхода имидаклоприда 6,2 - 6,3 мин.

Градуировочный график проверяют ежедневно по анализу 1 - 2-х стандартных растворов различной концентрации. Если получаемые результаты отличаются более чем на +/- 6,0% от данных, заложенных в градуировочной характеристике, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие градуировочные растворы.

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 куб. см, заливают 10 куб. см ацетона, оставляют на 10 - 15 минут, периодически перемешивая. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 10 куб. см.

Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 55 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Сухой остаток растворяют в 5 куб. см подвижной фазы (п. 7.2), центрифугируют (фильтруют через слой стекловаты, помещенный в конусную химическую воронку) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.6.1.

Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию имидаклоприда в хроматографируемом растворе.

Перед анализом опытной пробы проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы - экстракта неэкспонированного фильтра.

Образцы, дающие пики, большие чем стандартный раствор с концентрацией 0,5 мкг/куб. см, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.

Массовую концентрацию имидаклоприда в пробе воздуха рабочей зоны (атмосферного воздуха), Х, мг/куб. м, при использовании градуировочного графика рассчитывают по формуле:

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95. ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа.

Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана, г. Мытищи Московской обл.