"МУК 4.1.1848-04. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств мефенпир-диэтила и мефенпира в зерне и соломе зерновых колосовых культур методами газожидкостной и высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Минздравом России 05.03.2004)

1. Методические указания подготовлены Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

3. Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.

4. Введены впервые.

Фирма-производитель: ЗАО Фирма "Август" (Россия).

Действующее вещество (антидот): мефенпир-диэтил.

Диэтиловый эфир (RS)-1-(2,4-дихлорфенил)-5-метил-2-пиразолин-3,5-дикарбоновой кислоты (IUPAC).

Структурная формула (не приводится).

Гигиенические нормативы (ГН 1.2.1323-03) для мефенпир-диэтила в России: ПДК в воде водоемов - 0,0004 мг/куб. дм, ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 1,3 мг/куб. м, МДУ в зерне хлебных злаков составляет 0,05 мг/кг.

Основной метаболит мефенпир-диэтила - мефенпир.

1-(2,4-дихлорфенил)-5-метил-2-пиразолин-3,5-дикарбоновая кислота (IUPAC).

Структурная формула (не приводится)

Молекулярная масса: 277,7.

Бесцветное кристаллическое вещество без запаха.

Температура плавления: 156,5 - 158 °С (с разл.).

Другие физико-химические и токсикологические характеристики мефенпира отсутствуют.

Гигиенические нормативы для мефенпира в России не установлены.

Область применения препарата:

Феноксапроп-Р-этил - послевсходовый гербицид системного действия из группы ингибиторов синтеза жирных кислот. В комбинации с антидотом - мефенпир-диэтилом используется для уничтожения однолетних злаков в посевах зерновых колосовых культур, в том числе ячменя, чувствительного к действию одного феноксапроп-Р-этила. В настоящее время препарат, содержащий в качестве действующего вещества феноксапроп-Р-этил (69 г/л), а в качестве антидота - мефенпир-диэтил (75 г/л), под торговым названием Ластик проходит регистрационные испытания в России и странах СНГ на озимой и яровой пшенице и яровом ячмене в качестве послевсходового гербицида при норме расхода 0,6 - 1,2 л/га и однократной обработке за сезон.

Мефенпир-диэтил - лабильное вещество и в растениях быстро метаболизируется до достаточно стабильного соединения - мефенпира.

2.1.1. Принцип методики

Методика основана на определении мефенпир-диэтила методом газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с детектором электронного захвата (ДЭЗ), мефенпира - методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) в обращенно-фазовом режиме со спектрофотометрическим детектором после предварительного извлечения перечисленных компонентов водным ацетонитрилом с последующим концентрированием и очисткой экстракта в системах несмешивающихся растворителей и на колонках с сорбентами.

Количественная обработка результатов анализа проводится методом абсолютной калибровки.

2.1.2. Избирательность методики

В предлагаемых условиях методика специфична в присутствии других пестицидов, применяемых в интенсивной технологии выращивания зерновых колосовых культур.

2.1.3. Метрологическая характеристика метода

--------------------------------

<*> При соотношении сигнал/шум, равном 5.

Газовый хроматограф "Shimadzu" (Япония) или любой аналогичный по техническим характеристикам, оборудованный детектором электронного захвата.

Кварцевая капиллярная колонка длиной 30 м и внутренним диаметром 0,32 мм с неподвижной фазой НР-5 (сополимер 5% фенилметил- и 95% диметилсилоксана), нанесенной на внутреннюю поверхность колонки. Толщина неподвижной фазы 0,25 мкм.

Микрошприц для ГЖХ фирмы "Agilent Technologies" или любой аналогичный вместимостью 10 мм.

Жидкостный хроматограф высокой эффективности фирмы "Agilent Technologies", модель 1100 (США) или любой аналогичный по техническим характеристикам, оборудованный вакуумным дегазатором, термостатом колонок, спектрофотометрическим детектором с измеряемой длиной волны и любой системой подачи подвижной фазы.

Колонка аналитическая Zorbax SB C18 (США) (средний размер частиц 5 мкм) длиной 250 мм и внутренним диаметром 4,6 мм или аналогичная, испытанная фирмой-изготовителем.

Петлевой инжектор с дозировочной петлей вместимостью 20 куб. мм.

Микрошприц для ВЭЖХ фирмы "Agilent Technologies" или любой аналогичный вместимостью 50 куб. мм.

Прибор для получения особо чистой (деионизированной) воды "Водолей" или любой аналогичный по техническим характеристикам.

Весы лабораторные GR-200 фирмы A&D, Япония, 2-го класса точности (зарегистрированы в Российском Государственном реестре средств измерений под N 18902-99) или любые аналогичные по метрологическим характеристикам.

Ванна ультразвуковая FINNSONIC OY (Финляндия) или любая аналогичная по техническим характеристикам.

Колбы мерные с притертыми или полиэтиленовыми пробками по ГОСТ 1770-74 вместимостью 50, 100 и 1000 куб. см.

Пипетки измерительные с расширенной градуировкой и полным сливом по ГОСТ 29227-91 вместимостью 1, 2, 5 и 10 куб. см.

Цилиндры мерные по ГОСТ 1770 вместимостью 50 и 500 куб. см.

Колбы остродонные с пришлифованными пробками вместимостью 100 и 250 куб. см по ГОСТ 25336-82.

Переход с боковым отводом по ГОСТ 8682-70.

Воронки с фильтром Шотта N 3 по ГОСТ 8682-70.

Воронки стеклянные по ГОСТ 8613-64.

Стеклянная колонка для препаративной хроматографии длиной около 300 мм и внутренним диаметром около 12 мм.

Стакан лабораторный типа ВН-50 вместимостью 50 куб. см.

Колбы конические с пришлифованными пробками вместимостью 200 куб. см по ГОСТ 25336-82.

Воронки делительные вместимостью 100 и 500 куб. см по ГОСТ 25336-82.

Шкаф сушильный ШС-1/80 СПУ ПГИЖ 6819454.006 (ТУ 3443-010-00141798-01) или любой аналогичный, пригодный для поддержания температуры не менее 150 °С.

Роторно-пленочный испаритель LABOROTA 4000 фирмы "Heidolph" (Германия) или аналогичный.

Насос вакуумный водоструйный по ГОСТ 10696-75.

Мельница электрическая лабораторная по ТУ 46-22-236-79 или аналогичная по техническим характеристикам.

Прибор для перегонки жидкостей при атмосферном давлении.

Источник чистого сжатого воздуха (баллон или безмасляный компрессор) или любого чистого инертного газа.

Набор для фильтрации элюентов для ВЭЖХ фирмы "MILLIPOR" или аналогичный с гидрофильными фторопластовыми мембранами типа МФФКГ пористостью 0,45 мкм по ТУ 6-55-221-1323-93.

Набор для фильтрации проб для ВЭЖХ фирмы "MILLIPOR" или аналогичный с капроновыми мембранами пористостью 0,2 мкм.

РН-метр-иономер ЭКСПЕРТ-001 фирмы "ЭКОНИКС-ЭКСПЕРТ" (ТУ 4215-001-52722949) или любой аналогичный по техническим характеристикам.

Электрод стеклянный комбинированный типа ЭСК-1060117 (ТУ 4215-004-35918409).

Стекловата, отмытая гексаном и высушенная при температуре 150 °С.

Мефенпир-диэтил с содержанием основного вещества 99,7 мас. % - стандартный образец.

Мефенпир с содержанием основного вещества 98,6 мас. % - стандартный образец.

Ацетонитрил марки "осч" (ТУ 6-09-14-2167).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709, деионизированная (удельная проводимость не более 0,12 мкS/см).

Гексан марки "хч" по ТУ 6-09-3375-78.

Гексан, сорт 1, "осч", производства НПК "Криохром".

Железо (II) сернокислое марки "хч" по ГОСТ 4148-78.

Калия перманганат марки "хч" по ГОСТ 20490-75.

Кальция хлорид марки "хч" по ГОСТ 4161-77.

Кислота ортофосфорная марки "хч" по ГОСТ 6552-80.

Кислота серная марки "хч" по ГОСТ 4204-77.

Кислота хлористоводородная марки "хч" по ГОСТ 3118-77.

Гидроксид натрия марки "хч" по ГОСТ 4328-77.

Сульфат натрия безводный марки "хч" по ГОСТ 4166-76.

Карбонат натрия марки "хч" по ГОСТ 83-63.

Метанол марки "хч" по ГОСТ 6995.

Этилацетат марки "хч" по ГОСТ 22300-76.

Эфир диэтиловый медицинский по ГОСТ 6265-74.

Азот сжатый баллонный марки "осч" по ГОСТ 9293-74.

Оксид алюминия для хроматографии нейтральный со средним размером частиц 70 мкм.

Силикагель для хроматографии фирмы Merck (grade 60, 70 - 230 mesh, 60 А).

Элюент I для препаративной колоночной хроматографии: смесь этилацетата и гексана (3:97 по объему).

Элюент II для препаративной колоночной хроматографии: смесь этилацетата и гексана (1:4 по объему).

Элюент III для препаративной колоночной хроматографии: смесь этилацетата и метанола (7:3 по объему).

Подвижная фаза для ВЭЖХ: смесь ацетонитрила, воды и ортофосфорной кислоты в объемном соотношении 49,5:50:0,5.

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79).

Пробы подсушивают до стандартной влажности и хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре при температуре не выше 4 °С не более 3 месяцев; перед анализом образцы размалывают на мельнице.

2.5.1. Подготовка и очистка растворителей и реактивов

Органические растворители перед началом работы очищают в соответствии с типовыми методиками. Гексан марки "хч" встряхивают в делительной воронке с небольшими порциями концентрированной серной кислоты до прекращения визуально наблюдаемого окрашивания свежей порции кислоты. Затем гексан последовательно промывают водой, 2%-ным водным раствором гидроксида натрия, после чего сушат над гидроксидом натрия и перегоняют.

Гексан, сорт 1, "осч", используют без дополнительной очистки.

Этилацетат встряхивают в делительной воронке с равным объемом 5%-ного раствора карбоната натрия, сушат над хлористым кальцием и перегоняют над свежепрокаленным при 150 °С оксидом алюминия.

Диэтиловый эфир (1 куб. дм) последовательно встряхивают в делительной воронке с 20 куб. см свежеприготовленного подкисленного раствора железного купороса (30 г сульфата железа и 1,54 г концентрированной серной кислоты в 55 куб. см воды), затем с 50 куб. см 0,5%-ного раствора перманганата калия, затем с 50 куб. см 5%-ного раствора гидроксида натрия и, наконец, с 50 куб. см воды, после чего сушат над хлористым кальцием и перегоняют над свежепрокаленным при 150 °С оксидом алюминия.

Оксид алюминия для хроматографии очищают многократной промывкой водой, отжимают на фильтре Шотта, трижды промывают метанолом и высушивают при 140 °С в течение 15 часов. Силикагель для хроматографии трижды промывают метанолом на фильтре Шотта и высушивают при 140 °С в течение 15 часов.

2.5.2. Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ (для определения мефенпира)

В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 0,5 куб. см ортофосфорной кислоты, прибавляют 500 куб. см отфильтрованной дистиллированной деионизированной воды и доводят объем до метки ацетонитрилом. Содержимое колбы тщательно перемешивают.

2.5.3. Кондиционирование хроматографической колонки для ВЭЖХ

Колонку промывают 25 куб. см ацетонитрила, затем подвижной фазой в течение 25 минут при скорости подачи элюента 1 куб. см/мин. Включают детектор и продолжают прокачивать элюент до стабилизации нулевой линии.

2.5.4. Кондиционирование хроматографической колонки для ГЖХ

Новую хроматографическую колонку кондиционируют при температуре 250 °С и скорости газа-носителя 2,5 мл/мин. в течение 10 часов.

2.5.5. Приготовление стандартных растворов

Основной стандартный раствор мефенпир-диэтила с концентрацией 100 - 150 мкг/куб. см готовят растворением 10 - 15 мг стандартного образца мефенпир-диэтила с содержанием основного вещества 99,7 мас. % в гексане сорта 1, "осч", в мерной колбе вместимостью 100 куб. см. Раствор хранят в холодильнике при температуре не выше -12 °С не более месяца.

Рабочие стандартные растворы с концентрациями 0,05; 0,1; 0,2 и 0,4 мкг/куб. см готовят из основного стандартного раствора мефенпир-диэтила соответствующим последовательным разбавлением гексаном. Растворы хранят в холодильнике не более 15 суток.

Основной стандартный раствор мефенпира с концентрацией 100 - 150 мкг/куб. см готовят растворением 10 - 15 мг стандартного образца мефенпира с содержанием основного вещества 98,6 мас. % в ацетонитриле в мерной колбе вместимостью 100 куб. см. Раствор хранят в холодильнике при температуре не выше -12 °С не более месяца.

Рабочие стандартные растворы с концентрациями 0,05; 0,1; 0,25 и 0,5 мкг/куб. см готовят из основного стандартного раствора мефенпира соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ (п. 2.5.2). Растворы хранят в холодильнике не более 3 суток.

2.5.6. Построение калибровочных графиков

Для построения калибровочного графика зависимости площади хроматографического пика мефенпир-диэтила от его концентрации в растворе в инжектор хроматографа вводят по 1 мкл рабочего стандартного раствора мефенпир-диэтила с концентрацией 0,05; 0,1; 0,2 и 0,4 мкг/куб. см. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений для каждой концентрации вещества. Строят калибровочный график зависимости площади хроматографического пика в относительных единицах от концентрации вещества в растворе в мкг/куб. см.

Для построения калибровочного графика зависимости площади хроматографического пика мефенпира от его концентрации в растворе в инжектор хроматографа вводят по 50 мкл рабочего стандартного раствора мефенпира с концентрацией 0,05; 0,1; 0,25 и 0,5 мкг/куб. см. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений для каждой концентрации вещества. Строят калибровочный график зависимости площади хроматографического пика в относительных единицах от концентрации вещества в растворе в мкг/куб. см.

2.5.7. Подготовка препаративной колонки с оксидом алюминия для очистки сконцентрированного экстракта мефенпир-диэтила

В нижнюю часть колонки помещают небольшой тампон из стекловаты, закрывают кран и приливают 10 куб. см гексана. Затем в колонку быстро заливают при помощи стеклянной воронки суспензию 5 г оксида алюминия в 20 куб. см гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента, после чего пропускают через колонку раствор 170 мг воды в 30 куб. см этилацетата со скоростью 1 - 2 капли в секунду, затем 10 куб. см гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него 2 г безводного сульфата натрия. Колонку промывают 10 куб. см гексана, после чего она готова к работе.

2.5.8. Проверка хроматографического поведения мефенпир-диэтила на колонке с оксидом алюминия

В круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см отбирают 0,05 куб. см стандартного раствора мефенпир-диэтила с концентрацией 100 - 150 мкг/куб. см, удаляют растворитель слабым потоком чистого сжатого воздуха или инертного газа, остаток количественно переносят тремя порциями по 1 куб. см гексана на подготовленную колонку. Промывают колонку 20 куб. см смеси этилацетат - гексан (3:97 по объему), затем 60 куб. см смеси этилацетат - гексан (1:4 по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Отбирают фракции по 5 см каждая, упаривают досуха, растворяют в 2 куб. см гексана (сорт 1, "осч") и анализируют на содержание мефенпир-диэтила по п. 2.7.

Рассчитывают содержание вещества в каждой фракции элюата, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.

Примечание: Хроматографический профиль мефенпир-диэтила может меняться при использовании новой партии сорбента и растворителей.

2.5.9. Подготовка препаративной колонки с силикагелем для очистки сконцентрированного экстракта мефенпира

В нижнюю часть колонки помещают небольшой тампон из стекловаты, закрывают кран и приливают 10 куб. см этилацетата. Затем в колонку быстро заливают при помощи стеклянной воронки суспензию 5 г силикагеля в 20 куб. см этилацетата. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента, после чего пропускают через колонку 30 куб. см смеси этилацетат - метанол (1:1 по объему), затем 10 см этилацетата. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него 2 г безводного сульфата натрия. Колонку промывают 20 куб. см этилацетата, после чего она готова к работе.

2.5.10. Проверка хроматографического поведения мефенпира на колонке с силикагелем

В круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см отбирают 0,05 куб. см стандартного раствора мефенпира с концентрацией 100 - 150 мкг/куб. см, удаляют растворитель слабым потоком чистого сжатого воздуха или инертного газа, остаток количественно переносят тремя порциями по 1 куб. см этилацетата на подготовленную колонку. Промывают колонку 20 куб. см этилацетата, затем 90 куб. см смеси этилацетат - метанол (7:3 по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Отбирают фракции по 5 куб. см каждая, упаривают досуха, растворяют в 1 куб. см подвижной фазы для ВЭЖХ (п. 2.6.2) и анализируют на содержание мефенпира по п. 2.7. Рассчитывают содержание вещества в каждой фракции элюата, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.

Примечание: Хроматографический профиль мефенпира может меняться при использовании новой партии сорбента и растворителей.

2.6.1. Экстракция мефенпир-диэтила и мефенпира

Навеску размолотого зерна (10 г) или соломы (5 г) помещают в коническую колбу, прибавляют 100 куб. см 80%-ного водного раствора ацетонитрила и помещают в ультразвуковую ванну на 3 минуты. Полученный экстракт переносят (декантируют) на фильтр Шотта, присоединенный через переходник к грушевидной колбе, и фильтруют при помощи водоструйного насоса. Остаток растительного материала в конической колбе повторно экстрагируют в ультразвуковой ванне в течение 3 минут, полученный экстракт фильтруют в ту же грушевидную колбу. Фильтрат выпаривают на роторно-пленочном испарителе при температуре не выше 45 °С до водной фазы объемом около 15 см.

2.6.2. Выделение фракций, содержащих мефенпир-диэтил и мефенпир

Водный остаток переносят в делительную воронку вместимостью 100 куб. см, прибавляют 15 куб. см деионизированной воды и мефенпир-диэтил экстрагируют гексаном тремя порциями по 20 куб. см. Отдельно собирают водный и объединенный органический слой, причем органический слой (гексановая вытяжка) собирают в остродонную колбу, последовательно пропуская каждую его порцию через слой (около 3 г) безводного сульфата натрия.

Водный слой подкисляют соляной кислотой до рН около 2, переносят в ту же делительную воронку, прибавляют 30 куб. см гексана и смесь интенсивно встряхивают в течение одной минуты. Органический слой отбрасывают. Содержащийся в водном слое мефенпир экстрагируют диэтиловым эфиром тремя порциями по 20 куб. см. Объединенный органический слой (эфирная вытяжка) собирают в отдельную остродонную колбу, последовательно пропуская каждую его порцию через слой (около 3 г) безводного сульфата натрия.

2.6.3. Очистка сконцентрированной гексановой вытяжки на колонке с оксидом алюминия

Объединенную гексановую вытяжку, содержащую мефенпир-диэтил, из п. 2.6.2, выпаривают практически досуха на роторно-пленочном испарителе при температуре не выше 45 °С. Остаток продувают досуха слабой струей сжатого воздуха или инертного газа. Сухой остаток растворяют при помощи ультразвуковой ванны в гексане и количественно переносят тремя порциями по 1 куб. см на подготовленную по п. 2.5.7 колонку с оксидом алюминия. Дают раствору стечь до верхнего края сорбента, колонку промывают 20 куб. см смеси этилацетат - гексан (3:97 по объему) и элюат отбрасывают. Мефенпир-диэтил элюируют 40 куб. см смеси этилацетат - гексан (1:4 по объему), элюат собирают в чистую остродонную колбу и выпаривают практически досуха на роторно-пленочном испарителе при температуре не выше 40 °С. Остаток продувают досуха слабой струей сжатого воздуха или инертного газа. Сухой остаток растворяют при помощи ультразвуковой ванны в 2 куб. см гексана (сорт 1, "осч") и анализируют на содержание мефенпир-диэтила по п. 2.7.1.

2.6.4. Очистка сконцентрированной эфирной вытяжки на колонке с силикагелем

Объединенную эфирную вытяжку, содержащую мефенпир, из п. 2.6.2, выпаривают практически досуха на роторно-пленочном испарителе при температуре не выше 40 °С. Остаток продувают досуха слабой струей сжатого воздуха или инертного газа. Сухой остаток растворяют при помощи ультразвуковой ванны в этилацетате и количественно переносят тремя порциями по 1 куб. см на подготовленную по п. 2.5.9 колонку с силикагелем. Дают раствору стечь до верхнего края сорбента, колонку промывают 20 куб. см этилацетата и элюат отбрасывают, затем 60 куб. см смеси этилацетат - метанол (7:3 по объему), которые также отбрасывают. Мефенпир элюируют 70 куб. см метанола, элюат собирают в чистую остродонную колбу и выпаривают практически досуха на роторно-пленочном испарителе при температуре не выше 40 °С. Остаток продувают досуха слабой струей сжатого воздуха или инертного газа. Сухой остаток растворяют при помощи ультразвуковой ванны в 1 куб. см подвижной фазы для ВЭЖХ, приготовленной по пункту 2.5.2, и анализируют на содержание мефенпира по п. 2.7.2.

2.7.1. Мефенпир-диэтил

Газовый хроматограф "Shimadzu" (Япония), оборудованный детектором электронного захвата.

Кварцевая капиллярная колонка длиной 30 м и внутренним диаметром 0,32 мм с неподвижной фазой НР-5 (сополимер 5% фенилметил- и 95% диметилсилоксана), нанесенной на внутреннюю поверхность колонки. Толщина неподвижной фазы 0,25 мкм.

Температура термостата колонки 235 °С, инжектора - 250 °С, детектора - 320 °С.

Скорость потока газа-носителя (азота), куб. см/мин.:

Объем вводимой пробы - 2 куб. мм.

Время удерживания мефенпир-диэтила - 6,7 мин.

Время записи одной хроматограммы - 30 мин.

Чувствительность детектора: 5 пА на шкалу.

Линейный диапазон детектирования: 0,1 - 0,8 нг.

Альтернативная колонка: кварцевая капиллярная колонка длиной 10 м и внутренним диаметром 0,32 мм с неподвижной фазой SE-30 (полидиметилсилоксан), нанесенной на внутреннюю поверхность колонки. Толщина неподвижной фазы 0,6 мкм.

Температура термостата колонки 220 °С, инжектора - 250 °С, детектора - 300 °С.

Скорость потока газа-носителя (азота), куб. см/мин.:

Объем вводимой пробы - 2 куб. мм.

Время удерживания мефенпир-диэтила - 18,1 мин.

Образцы, в которых площадь пика мефенпир-диэтила больше, чем в стандартном растворе с концентрацией 0,4 мкг/куб. см, разбавляют гексаном.

2.7.2. Мефенпир

Жидкостный хроматограф высокой эффективности фирмы "Agilent Technologies", модель 1100 (США).

Колонка аналитическая Zorbax SB C18 (США) (средний размер частиц 5 мкм) длиной 250 мм и внутренним диаметром 4,6 мм.

Температура термостата колонки: 25 °С.

Подвижная фаза: ацетонитрил - вода - ортофосфорная кислота в объемном соотношении 49,5:50:0,5.

Объемный расход элюента: 1 куб. см/мин.

Рабочая длина волны детектора: 305 нм.

Объем вводимой пробы: 50 куб. мм.

Чувствительность: 0,002 ед. абсорбции на шкалу.

Время удерживания мефенпира: 4,1 минуты.

Линейный диапазон детектирования: 1 - 10 нг.

Время записи одной хроматограммы: 30 мин.

Альтернативная неподвижная фаза: Диасорб 130-С16 Т (колонка длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм и зернением 7 мкм).

Подвижная фаза: ацетонитрил - вода - ортофосфорная кислота (60:39,9:0,1 по объему). Образцы, в которых площадь пика мефенпира больше, чем в стандартном растворе с концентрацией 0,5 мкг/куб. см, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами.

ЗАО Фирма "Август".

ВНИИ фитопатологии.