"МУК 4.1.1923-04. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовых концентраций амидодианилинметана (дифенилгуанидина) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 18.08.2004)

1. Методические указания подготовлены: ГУ НИИ медицины труда РАМН (Л.Г. Макеева - руководитель, Г.В. Муравьева, Е.М. Малинина, Е.Н. Грицун, Г.Ф. Громова), при участии А.И. Кучеренко (Департамент госсанэпиднадзора Минздрава России).

2. Рекомендованы к утверждению на совместном заседании группы Главного эксперта Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию МЗ РФ по проблеме "Лабораторно-инструментальное дело и метрологическое обеспечение" и специалистов Проблемной комиссии "Научные основы медицины труда".

3. Утверждены и введены в действие Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 18 августа 2004 г.

4. Введены впервые.

Сборник методических указаний "Измерение концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны" (выпуск 47) разработан с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Включенные в данный сборник 13 методик контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования", ГОСТ Р 8.563-96 "Государственная система обеспечения единства измерений. Методики выполнения измерений", МИ 2335-95 "Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа", МИ 2336-95 "Характеристики погрешности результатов количественного химического анализа. Алгоритмы оценивания", ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002.

Методики выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и ниже их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в гигиенических нормативах ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.1314-03 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и дополнениях к ним.

Методические указания по измерению массовых концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для центров Госсанэпиднадзора, санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов и других заинтересованных министерств и ведомств.

Настоящие методические указания устанавливают количественный хроматографический анализ воздуха рабочей зоны на содержание дифенилгуанидина в диапазоне массовых концентраций от 0,05 до 0,5 мг/куб. м.

2.1. Структурная формула (не приводится).

2.3. Молекулярная масса 211,27.

2.4. Регистрационный номер CAS 102-06-7.

2.5. Физико-химические свойства. Дифенилгуанидин - твердое мелкокристаллическое вещество белого цвета без запаха. Температура плавления не ниже 145 °С. Дифенилгуанидин слабо растворяется в воде, растворим в этиловом, метиловом, изопропиловом спиртах, ацетонитриле. Растворимость в ацетонитриле составляет 10,7 г в 100 куб. см растворителя при 20 °С.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.6. Токсикологическая характеристика. Дифенилгуанидин по степени воздействия на организм относится ко 2 классу опасности (вещество высокоопасное): вызывает жжение в глазах, покраснение век, горечь во рту, болезненность в области пищевода. Длительное поступление пыли в организм может привести к разрыхлению десен, понижению кислотности желудочного сока. Длительный контакт с кожей может вызвать дерматиты и экземы.

Предельно допустимая концентрация (ПДК) дифенилгуанидина в воздухе рабочей зоны - 0,1 мг/куб. м.

Методика обеспечивает выполнение измерений массовой концентрации дифенилгуанидина с относительной погрешностью +/- 15% при доверительной вероятности 0,95.

Измерение массовой концентрации дифенилгуанидина выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с УФ-детектором. В качестве элюента используют смесь ацетонитрила и воды в объемном соотношении 20:80 с добавлением 1 куб. см ортофосфорной кислоты на 1 куб. дм элюента.

Измерение проводят при длине волны детектора 254 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания дифенилгуанидина в анализируемом объеме раствора - 0,05 мкг.

Нижний предел измерения массовой концентрации дифенилгуанидина в воздухе - 0,05 мг/куб. м (при отборе 270 куб. дм воздуха).

Метод специфичен в условиях производства на стадиях сушки и фасовки дифенилгуанидина.

Определению не мешают анилин, хлорциан.

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы.

Допускается применение других средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов и материалов, обеспечивающих показатели точности, установленные для данной МВИ.

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться меры противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91.

6.3. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцию по эксплуатации прибора.

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица с высшим или средним специальным образованием, прошедшие обучение работе на жидкостном хроматографе.

8.1. Процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С, атмосферном давлении 84 - 106 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.

8.2. Выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

Перед выполнением измерений проводятся следующие работы: очистка дифенилгуанидина, приготовление растворов, подготовка жидкостного хроматографа, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

9.1.1. Очистка дифенилгуанидина.

Помещают 20,0 г технического продукта дифенилгуанидина в стакан вместимостью 400 куб. см, растворяют в 200 куб. см этилового спирта, нагревают до кипения на электроплитке и фильтруют через предварительно подогретую в сушильном шкафу воронку Бюхнера с бумажным фильтром "синяя лента", фильтрат охлаждают до температуры 20 °С.

Выпавший осадок отфильтровывают через фильтр "синяя лента", тщательно отжимают и высушивают до постоянной массы (в четвертом десятичном разряде) в сушильном шкафу при температуре t = 100 +/- 2 °С.

9.1.2. Приготовление исходного стандартного раствора дифенилгуанидина с массовой концентрацией 0,25 мг/куб. см.

Навеску стандартного образца дифенилгуанидина по п. 5.2.1 массой 0,0250 г помещают в мерную колбу вместимостью 100 куб. см, растворяют в 5 куб. см ацетонитрила, затем доводят объем раствора до метки водно-ацетонитрильной смесью, приготовленной по п. 9.1.4.

Раствор устойчив в течение рабочего дня.

9.1.3. Приготовление элюента.

В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 200 куб. см ацетонитрила, 1 куб. см ортофосфорной кислоты и доводят объем раствора до метки дистиллированной водой.

Элюент готовят непосредственно перед проведением анализа. Приготовленный раствор хранится в течение рабочего дня.

9.1.4. Приготовление водно-ацетонитрильной смеси.

В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 200 куб. см ацетонитрила и доводят объем раствора до метки дистиллированной водой, перемешивают. Раствор хранится в течение недели.

Включение прибора и вывод его на рабочий режим проводят в соответствии с инструкцией, прилагаемой к прибору.

Аналитическую колонку устанавливают в ячейку термостата хроматографа и пропускают через нее элюент со скоростью 1 куб. см/мин. в течение 1 часа в условиях рабочего режима.

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (относительные единицы) от содержания дифенилгуанидина, устанавливают по пяти сериям растворов. Каждую серию, состоящую из шести градуировочных растворов и "холостого", готовят в мерных колбах вместимостью 50 куб. см. Для этого, в соответствии с табл. 1, в каждую колбу вносят соответствующий объем исходного стандартного раствора дифенилгуанидина, приготовленного по п. 9.1.2, доводят объемы растворов до меток водно-ацетонитрильной смесью, приготовленной по п. 9.1.4.

Градуировочные растворы устойчивы в течение рабочего дня.

Каждый из полученных растворов вводят с помощью микрошприца в инжектор хроматографа и хроматографируют в условиях, указанных в п. 9.5.

По полученным данным строят градуировочный график зависимости площади пика (относительные единицы) от содержания дифенилгуанидина в хроматографируемом объеме (мкг).

Проверку градуировочного графика проводят один раз в месяц или в случае изменения условий анализа.

Воздух с объемным расходом 20 куб. дм/мин. аспирируют через фильтр АФА ВП-10, помещенный в фильтродержатель.

Для измерения 1/2 ПДК дифенилгуанидина необходимо отобрать 270 куб. дм воздуха. Отобранные пробы хранятся в закрытых стаканчиках в течение суток.

Аэрозольный фильтр помещают в стакан, с помощью пипетки приливают 2 куб. см ацетонитрила и растворяют сорбированный на фильтре дифенилгуанидин. Затем с помощью пипетки приливают 8 куб. см дистиллированной воды и тщательно перемешивают.

Степень десорбции дифенилгуанидина с фильтра составляет 94% (определена экспериментально).

Полученный раствор с помощью микрошприца вводят в инжектор хроматографа и хроматографируют в условиях, указанных в п. 9.4, не менее 3 раз.

По полученным протоколам определяют среднее арифметическое значение площадей пиков дифенилгуанидина. По калибровочному графику находят содержание дифенилгуанидина в анализируемом растворе (мкг).

Массовую концентрацию дифенилгуанидина в воздухе рабочей зоны (С, мг/куб. м) вычисляют по формуле:

где:

а - содержание дифенилгуанидина, найденное по градуировочному графику, мкг;

в - общий объем анализируемого раствора, куб. см;

0,94 - степень извлечения дифенилгуанидина с фильтра получена экспериментально;

б - объем пробы, взятой для анализа, куб. см;

V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к нормальным условиям, куб. дм (Прилож. 1).

Результат количественного анализа представляют в виде:

С +/- ДЕЛЬТА мг/куб. м при Р = 0,95, где +/- ДЕЛЬТА - характеристика абсолютной погрешности.

Значение ДЕЛЬТА = +/- 0,15 х С мг/куб. м при Р = 0,95.

Образцами для оперативного контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Отбор проб воздуха осуществляют одновременно на два фильтра с использованием двух каналов аспиратора.

Отобранные пробы анализируют в точном соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа, т.е. получают два результата анализа двумя аналитиками, используют разные наборы мерной посуды, разные партии реактивов.

При превышении норматива контроля воспроизводимости эксперимент повторяют, при повторном превышении указанного норматива выясняют причины и по возможности устраняют их.

13.2.1. Приготовление аттестованных растворов дифенилгуанидина.

Навеску стандартного образца дифенилгуанидина по п. 5.2.1 массой 0,0250 г помещают в мерную колбу вместимостью 100 куб. см, растворяют с помощью ультразвуковой установки в 5 куб. см ацетонитрила, затем доводят объем раствора до метки водно-ацетонитрильной смесью, приготовленной по п. 9.1.4, получают исходный раствор с массовой концентрацией 0,25 мг/куб. см.

В три мерные колбы вместимостью по 50 куб. см помещают с помощью пипетки 0,4; 1,2; 2,0 куб. см исходного раствора и доводят до метки водно-ацетонитрильной смесью, приготовленной по п. 9.1.4. Получают растворы с массовыми концентрациями дифенилгуанидина 0,002 мг/куб. см (раствор 1), 0,006 мг/куб. см (раствор 2), 0,01 мг/куб. см (раствор 3).

Значения относительной погрешности приготовления массовой концентрации дифенилгуанидина в аттестованном растворе N 1 не превышает +/- 5,8%, в растворе N 2 - +/- 3,3%, в растворе N 3 - +/- 3,0% при доверительной вероятности Р = 0,95.

13.2.2. Измерение массовой концентрации дифенилгуанидина в аттестованных растворах.

Каждый из полученных по п. 13.2.1 растворов вводят с помощью микрошприца в инжектор хроматографа и хроматографируют в условиях п. 9.4.

Массу дифенилгуанидина в анализируемом объеме раствора а, мкг определяют по предварительно построенному градуировочному графику.

Массовую концентрацию дифенилгуанидина С, мг/куб. см, в анализируемом растворе рассчитывают по формуле:

13.2.3. Обработка результатов контроля погрешности MBИ.

Рассчитывают среднее арифметическое значение результатов двух измерений дифенилгуанидина в аттестованном растворе:

Если точность контрольных измерений признана неудовлетворительной, эксперимент повторяют с использованием других проб. При несоответствии полученных результатов норматива контроля точности выясняют причины и устраняют их.

Для проведения серии анализов из трех проб требуется 2 ч.

Методические указания разработаны: НИЦ "Экос" ЗАО "Алгама", г. Москва (В.С. Рыжов); Аналитическая лаборатория НИЦ ОАО "Химпром", г. Новочебоксарск (З.А. Ибрагимова, Л.А. Екатеринина).

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 101,33 кПа) проводят по формуле:

1. Аммиачно-калиевая селитра

2. Гексафторбутанол

3. Дифенилгуанидин (ВЭЖХ)

4. Дифенилгуанидин (фотометрия)

5. Кватернидин

6. Метиленхлорид

7. Толуилендиизоцианат

8. Хладон 227 еа

9. Хладон 227 са

10. Хлористый метил

11. Хлористый этил

12. Хлороформ

13. Цианхлорид

14. Четыреххлористый углерод