"МУК 4.1.1748-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовых концентраций стрихнидин-10-она нитрата (стрихнина нитрата) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"
(утв. Минздравом России 29.06.2003)

1. Подготовлены Научно-исследовательским институтом медицины труда РАМН (Л.Г. Макеева, Г.В. Муравьева, Е.М. Малинина, Е.Н. Грицун, Г.Ф. Громова); Российским государственным медицинским университетом (Е.Б. Гугля, А.В. Лиманцев), при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.И. Кучеренко).

2. Разработаны сотрудниками Российского государственного медицинского университета Е.Б. Гуглей, А.В. Лиманцевым.

3. Рекомендованы к утверждению на совместном заседании группы Главного эксперта Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию по проблеме "Лабораторно-инструментальное дело и метрологическое обеспечение" и методбюро п/секции "Промышленно-санитарная химия" Проблемной комиссии "Научные основы медицины труда".

4. Рекомендованы к утверждению Комиссией по Государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Министерстве здравоохранения Российской Федерации.

5. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации 29 июня 2003 г.

6. Введены впервые.

Сборник методических указаний "Измерение концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны" (выпуск 46) разработан с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Включенные в данный сборник методики контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования", ГОСТ Р 8.563-96 "Государственная система обеспечения единства измерений. Методики выполнения измерений", МИ 2335-95 "Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа", МИ 2336-95 "Характеристики погрешности результатов количественного химического анализа. Алгоритмы оценивания".

Методики выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и ниже их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в гигиенических нормативах ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны", ГН 2.2.5.1314-03 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и дополнениях к ним.

Методические указания по измерению массовых концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для центров госсанэпиднадзора, санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов и других заинтересованных министерств и ведомств.

Настоящие Методические указания устанавливают количественный хроматографический анализ воздуха рабочей зоны на содержание стрихнина нитрата в диапазоне массовых концентраций от 0,0075 до 0,1500 мг/куб. м.

2.1. Структурная формула (не приводится).

2.3. Молекулярная масса 397,4.

2.4. Регистрационный номер CAS 66-32-0.

2.5. Физико-химические свойства.

2.6. Токсикологическая характеристика.

Стрихнина нитрат - чрезвычайно токсичное вещество. Обладает нейротоксическим действием. Проникает через неповрежденные кожные покровы, необходима защита кожи и глаз.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) в воздухе рабочей зоны - 0,015 мг/куб. м.

Методика обеспечивает выполнение измерений массовых концентраций стрихнина нитрата с погрешностью не более +/- 25% при доверительной вероятности 0,95.

Измерения массовых концентраций стрихнина нитрата основаны на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением спектрофотометрического детектора при длине волны 254 нм.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания стрихнина нитрата в хроматографируемом объеме раствора 0,040 мкг.

Нижний предел измерения массовых концентраций стрихнина нитрата в воздухе 0,0075 мг/куб. м (при отборе 400 куб. дм воздуха).

Метод специфичен в условиях производства готовой лекарственной формы стрихнина нитрата. Определению не мешают сопутствующие вещества (магния карбонат, натрия карбоксиметилцеллюлоза, аэросил, твин-80).

5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

5.2. Реактивы

Допускается применение иных средств измерения, вспомогательных устройств, реактивов и материалов, обеспечивающих показатели точности, установленные для данных Методических указаний.

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ соблюдают меры противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-76.

6.3. При выполнении измерений с использованием хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

К выполнению измерений и обработке результатов допускаются лица с высшим или средним специальным образованием, имеющие навыки работы на жидкостном хроматографе.

8.1. Приготовление растворов и подготовку проб к анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха (20 +/- 5) °С, атмосферном давлении 84 - 106 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.

8.2. Измерения на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9.1. Приготовление растворов

9.1.1. Стандартный раствор N 1 стрихнина нитрата в растворе элюента концентрацией 500 мкг/куб. см готовится растворением 25 мг вещества в мерной колбе вместимостью 50 куб. см. При растворении колбу помещают на 5 мин. в ультразвуковую ванну.

9.1.2. Стандартный раствор N 2 стрихнина нитрата в растворе элюента концентрацией 100 мкг/куб. см готовится разбавлением 5 куб. см стандартного раствора N 1 в колбе вместимостью 50 куб. см. Растворы устойчивы в течение месяца при хранении в холодильнике.

9.1.3. Раствор дигидрофосфата калия концентрацией 0,02 М готовят растворением 1,36 г указанной соли в 500 куб. см дистиллированной воды в колбе данного объема.

9.1.4. Раствор элюента готовят смешиванием с помощью мерного цилиндра 250 куб. см 0,02 М раствора дигидрофосфата калия и 250 куб. см ацетонитрила. Раствор доводят до рН 4 ортофосфорной кислотой. Непосредственно перед измерением раствор фильтруют с помощью набора для фильтрации растворов.

9.1.5. Раствор уксусной кислоты в ацетонитриле готовят в мерной колбе на 100 куб. см. Приливают в колбу несколько куб. см ацетонитрила, добавляют пипеткой 2 куб. см уксусной кислоты и доводят до метки ацетонитрилом.

9.2. Подготовка прибора

Общую подготовку прибора осуществляют согласно инструкции по эксплуатации.

9.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость величины хроматографического сигнала от массы анализируемого вещества в хроматографируемом объеме пробы, устанавливают по методу абсолютной градуировки с использованием серии растворов согласно табл. 1.

Растворы помещают в пробоотборное устройство хроматографа.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

состав элюента: ацетонитрил - 0,02 М дигидрофосфат калия, 1:1, рН 4;

скорость потока элюента 100 куб. мм/мин.;

объем вводимой пробы 10 куб. мм;

длина волны спектрофотометрического детектора 254 нм;

время удерживания стрихнина нитрата 2 мин. 20 с.

На полученной хроматограмме измеряют площади пиков с помощью интегратора хроматографа (в условных единицах) при анализе 6 растворов разных концентраций и холостой пробы, проводя не менее 5 параллельных определений для каждого раствора, и строят градуировочную зависимость площади пика (в условных единицах) от количества компонента в пробе (мкг). Проверку градуировочной характеристики проводят при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в неделю.

9.4. Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 20 куб. дм/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП. Для измерения содержания стрихнина нитрата на уровне 1/2 ОБУВ достаточно отобрать 400 куб. дм воздуха. Пробы можно хранить в течение недели.

Фильтр с отобранной пробой помещают с помощью пинцета в бюкс и приливают пипеткой 7,5 куб. см раствора уксусной кислоты в ацетонитриле, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин. Отбирают пипеткой 5 куб. см раствора и сливают в колбу для упаривания. Степень десорбции с фильтра 95%. Упаривают раствор досуха на вакуумном испарителе при комнатной температуре и растворяют в 0,5 куб. см элюента, обрабатывая ультразвуком в течение 5 мин. Хроматографирование раствора пробы проводят в тех же условиях, что и хроматографирование градуировочных растворов. Количественное определение содержания анализируемого вещества в растворе проводят по предварительно построенной градуировочной характеристике.

Массовую концентрацию стрихнина нитрата (С, мг/куб. м) в воздухе вычисляют по формуле:

Результат количественного анализа представляют в виде (С +/- ДЕЛЬТА) мг/куб. м, Р = 0,95, где ДЕЛЬТА - характеристика погрешности, ДЕЛЬТА = 0,18С + 0,0005.

Значения характеристики погрешности, норматива оперативного контроля погрешности и норматива оперативного контроля воспроизводимости приведены в табл. 2 в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе С.

13.1. Оперативный контроль воспроизводимости

При превышении расхождения между двумя результатами норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

Внутренний оперативный контроль воспроизводимости проводят не реже чем 1 раз в месяц.

13.2. Оперативный контроль точности

Внутренний оперативный контроль точности проводят не реже чем 1 раз в месяц.

Для проведения серии анализов из 6 проб при последовательном отборе проб воздуха требуется 3,5 ч.

Методические указания разработаны Российским государственным медицинским университетом (Гугля Е.Б., Бидевкина М.В.).

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 101,33 кПа) проводят по формуле: