"МУК 4.1.1519-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентраций S-[2][(4-амино-2-метил-5-пиримидинил)метил[формиламино]-1-[2-(фосфонокси)этил]-1-пропениловый эфир фенилкарботионовой кислоты (бенфотиамина) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Минздравом России 29.06.2003)

Методические указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии "Научные основы гигиены труда и профпатологии". Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в июне 2003 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 37) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Методика контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработана и подготовлена в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования".

Методика выполнена с использованием современных методов исследования, метрологически аттестована и дает возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.687-98 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".

Структурная формула не приводится.

М. м. 466,5.

Бенфотиамин - белый кристаллический порошок со слабым запахом, с температурой плавления 170 °C (с разложением). Плохо растворим в воде, мало растворим в 95% спирте, растворим в 1% растворе натрия гидроксида, ледяной уксусной кислоте, умеренно растворим в метаноле.

В воздухе находится в виде аэрозоля и паров.

Бенфотиамин не обладает местнораздражающим действием на кожу, однако проявляет слабое раздражающее действие на слизистые оболочки глаз.

ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,1 мг/куб. м.

Методика основана на применении высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр и в 90% метанол.

Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме (10 мкл) - 0,025 мкг.

Нижний предел измерения в воздухе - 0,05 мг/куб. м (при отборе 50 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций вещества в воздухе от 0,05 до 0,6 мг/куб. м.

Определение избирательно на стадиях сушки, просеивания, хранения и фасовки вещества.

Определению не мешают остаточные количества растворителей.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 20%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, - 2 часа.

Жидкостный хроматограф высокого давления "Милихром-1" или другой модели с УФ-детектором.

Весы лабораторные ВЛА-200 2-го кл., ГОСТ 24104-88Е.

Аспирационное устройство, ГОСТ 17.2.6.01-86.

Фильтродержатели, ТУ 95-72-05-77.

Колбы мерные вместимостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.

Пипетки вместимостью 1, 2, 5 мл, ГОСТ 29227-91.

Пробирки колориметрические с пришлифованными пробками вместимостью 10 мл, ГОСТ 25336-82Е.

Поглотительные приборы Рыхтера 7Р, ТУ 25-11-1081-75.

Воронки химические диаметром 30 мм, ГОСТ 25336-82Е.

Вакуумная установка или роторный испаритель ИР-1, ТУ 25-11-917-74.

Секундомер, ГОСТ 5072-97.

Линейка измерительная металлическая, ГОСТ 8309-75.

Лупа измерительная ЛИ-3-10Х, ГОСТ 8309-75.

pH-метр ЭВ-74.

Водяная баня, ТУ 64-1-2850-76.

Дистиллятор, ТУ 61-1-721-79.

Бенфотиамин, ФС 42-2379-85.

Метиловый спирт, ГОСТ 6995-77, 90% раствор.

Ортофосфорная кислота, ГОСТ 6552-80.

Элюент: к 100 мл 90% спирта метилового добавляют около 0,2 мл ортофосфорной кислоты до pH 2,8.

Стандартный раствор N 1 с концентрацией 500 мкг/мл бенфотиамина готовят растворением 0,0500 г вещества в 90% метаноле в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение двух недель при хранении в холодильнике.

Стандартный раствор N 2 с концентрацией 20 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 90% метанолом. Раствор устойчив в течение двух недель при хранении в холодильнике.

Градуировочные растворы с концентрацией 0,5-1-2-3-4-6 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 2 90% метанолом. Растворы применяют свежеприготовленными.

5 мл градуировочных стандартных растворов, что соответствует 2,5-5-10-15-20-30 мкг бенфотиамина, переносят в грушевидные колбы и упаривают досуха под вакуумом при температуре 50 - 60 °C. Сухой остаток растворяют в 1,0 мл элюента и хроматографируют.

Фильтр АФА-ХА-10, ТУ 95-743-80.

Воздух с объемным расходом 5 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ХА-10 и поглотительный сосуд Рыхтера 7Р, содержащий 10 мл 90% метанола. Поглотительный сосуд охлаждают смесью льда с хлористым натрием. Для измерения 1/2 ОБУВ следует отобрать 50 л воздуха. Пробы хранят в закрытых сосудах в течение суток в холодильнике.

Хроматографическая колонка промышленного изготовления.

Инжектируют в хроматограф от 0,025 до 0,3 мкг бенфотиамина из градуировочных растворов при максимальном объеме вводимой пробы 10 мкл.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

На основании полученных хроматограмм строят градуировочный график, выражающий зависимость площади пиков (кв. мм) от количества вещества в хроматографируемом объеме пробы (мкг).

Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя 5 параллельных измерений для каждого раствора. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Фильтр и содержимое поглотительного сосуда помещают в колориметрическую пробирку с пришлифованной пробкой, доводят объем до 10 мл 90% метанолом и оставляют при комнатной температуре на 15 минут, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр тщательно отжимают и удаляют. Степень десорбции вещества с фильтра - 96%. Полученный раствор сливают в грушевидную колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре 50 - 60 °C. Сухой остаток растворяют в 1,0 мл спирта метилового 90%, подкисленного кислотой ортофосфорной до pH 2,8.

Параллельно с анализом проб проводят хроматографирование раствора, полученного обработкой чистого фильтра.

Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях по отношению к тому же элюенту, что и при построении градуировочного графика.

Количественное содержание бенфотиамина (в мкг) в хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Концентрацию бенфотиамина (C, мг/куб. м) в воздухе вычисляют по формуле:

где:

a - количество вещества в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

б - хроматографируемый объем пробы, взятый для анализа, мл;

B - общий объем раствора пробы, мл;

V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (Приложение 1).

Методические указания разработаны ВНЦ БАВ, г. Москва.

Приведение объема воздуха к стандартным условиям проводят по следующей формуле: