"МУК 4.1.1571-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по спектрофотометрическому измерению концентраций 3бета-холест-5,7-диен-3-ола бензоата (бензоата-7-дегидрохолестерина) и 3бета-холест-5-ен-3-ола бензоата (бензоата холестерина) в воздухе рабочей зоны"
(утв. Минздравом России 29.06.2003)

Методические указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии "Научные основы гигиены труда и профпатологии". Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в июне 2003 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 37) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Методика контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработана и подготовлена в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования".

Методика выполнена с использованием современных методов исследования, метрологически аттестована и дает возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.687-98 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".

Структурная формула не приводится.

Бензоат холестерина.

Бензоат 7-дегидрохолестерин - белый кристаллический порошок без запаха и вкуса. Температура плавления - 134 °C. Растворим в жирах и органических растворителях, нерастворим в воде.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Бензоат 7-дегидрохолестерин является малотоксичным веществом, не обладает раздражающим действием на кожу и слизистые оболочки глаз кроликов. Обладает специфическим влиянием на липидный обмен.

ПДК бензоата 7-дегидрохолестерина в воздухе - 1 мг/куб. м. 3 класс опасности.

Бензоат холестерина - белый кристаллический порошок без запаха и вкуса. Температура плавления - 147 °C. Растворим в жирах и органических растворителях, нерастворим в воде.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Бензоат холестерина является малотоксичным веществом, не обладает раздражающим действием на кожу и слизистые оболочки глаз кроликов. Специфическое влияние на липидный обмен менее выражено.

ПДК бензоата холестерина в воздухе - 4 мг/куб. м. 3 класс опасности.

Определение основано на образовании окрашенного комплексного соединения при взаимодействии холестерина с уксусным ангидридом и серной кислотой в хлороформе с последующим фотометрическим измерением продукта реакции при длине волны 675 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания бензоата 7-дегидрохолестерина в анализируемом объеме раствора - 40 мкг.

Нижний предел измерения бензоата 7-дегидрохолестерина в воздухе - 0,5 мг/куб. м (при отборе 80 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций бензоата 7-дегидрохолестерина в воздухе от 0,5 до 10,0 мг/куб. м.

Определению не мешают: остаточные количества органических растворителей; мешают: холестерин и бензоат холестерина.

Нижний предел измерения содержания бензоата холестерина в анализируемом объеме раствора - 80 мкг.

Нижний предел измерения бензоата холестерина в воздухе - 2 мг/куб. м (при отборе 40 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций бензоата холестерина в воздухе от 2 до 20 мг/куб. м.

Определению не мешают: остаточные количества органических растворителей; мешают: холестерин и бензоат 7-дегидрохолестерин.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 20%.

Спектрофотометр Specord M-40, Carl Zess.

Весы аналитические ВЛА-200, ГОСТ 24104-88Е.

Аспирационное устройство, модель 822, ТУ 64-1-862-82.

Колбы мерные вместимостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.

Пипетки вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл, ГОСТ 29227-91.

Пробирки колориметрические с пришлифованными пробками вместимостью 10 мл, ГОСТ 25336-82Е.

Бюксы вместимостью 10 мл, ГОСТ 7148-70.

Роторный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Колбы грушевидные вместимостью 25 мл, ГОСТ 9737-70.

Воронки химические, ГОСТ 86-13-75.

Баня водяная лабораторная, МРТУ 64-186-23-68.

Стеклянные палочки.

Бензоат 7-дегидрохолестерин, СТП 0431-507-92.

Бензоат холестерина, содержание основного вещества не менее 99,0%.

Спирт этиловый, ректификат, ГОСТ 5963-67, 95% и в смеси с хлороформом в соотношении 3:2.

Кислота серная, ГОСТ 4204-77, хч, 1 н раствор.

Хлороформ, ГОСТ 215-74, хч.

Уксусный ангидрид, ГОСТ 5815-77, ч.

Стандартный раствор N 1 бензоата 7-дегидрохолестерина концентрацией 1000 мкг/мл готовят растворением 0,1400 г вещества в смеси этанол - хлороформ (3:2) в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

Стандартный раствор N 2 с концентрацией бензоата 7-дегидрохолестерина 200 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 смесью этанол - хлороформ (3:2). Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

Стандартный раствор N 1 бензоата холестерина концентрацией 1000 мкг/мл готовят растворением 0,1000 г вещества в смеси этанол - хлороформ (3:2) в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

Стандартный раствор N 2 с концентрацией бензоата холестерина 200 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 смесью этанол - хлороформ (3:2). Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

Фильтры АФА-ВП-10, ТУ 85-743-80.

Воздух с объемным расходом 10 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-10. Для измерения 1/2 ПДК бензоата 7-дегидрохолестерина следует отобрать 80 л воздуха, для измерения 1/2 ПДК бензоата холестерина - 40 л воздуха.

Градуировочные растворы (устойчивы в течение 7 часов) готовят согласно таблице.

Градуировочные растворы перемешивают, затем переносят в грушевидные колбы и упаривают досуха под вакуумом при температуре водяной бани 60 - 70 °C. Сухой остаток растворяют в 4 мл хлороформа, добавляют по 1 мл уксусного ангидрида и 0,1 мл концентрированной серной кислоты и перемешивают. Через 20 минут после стояния пробирок в темном месте проводят фотометрирование.

Измеряют оптическую плотность полученных растворов при длине волны 675 нм. Измерения проводят в кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм по отношению к контрольной пробе, не содержащей определяемого вещества (раствор N 1 по таблице).

Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им величины содержания вещества в градуировочном растворе (мкг).

Проверка градуировочного графика проводится 1 раз в 3 месяца или в случае использования новой партии реактивов.

Фильтр с отобранной пробой переносят в бюкс, заливают 5 мл растворителя (смеси этанол - хлороформ в соотношении 3:2) и оставляют на 15 минут, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр тщательно отжимают и удаляют. Степень десорбции бензоата 7-дегидрохолестерина с фильтра - 96%, а бензоата холестерина - 96,7%.

Раствор переносят в грушевидную колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре водяной бани 60 - 70 °C. Сухой остаток растворяют в 4 мл хлороформа, добавляют по 1 мл уксусного ангидрида и 0,1 мл концентрированной серной кислоты и перемешивают. Через 20 минут после стояния пробирок в темном месте проводят фотометрирование. Оптическую плотность полученных растворов пробы измеряют аналогично градуировочным растворам по сравнению с контролем, который готовят одновременно и аналогично пробе, используя чистый фильтр.

Количественное определение содержания веществ (в мкг) в анализируемой пробе проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Концентрацию веществ "C" в воздухе (в мг/куб. м) вычисляют по формуле:

где:

a - содержание вещества в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Приведение объема воздуха к стандартным условиям проводят по следующей формуле: