"МУК 4.1.1227-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций никосульфурона в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"
(утв. Минздравом России 16.03.2003)

1. Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин) при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов). Разработчики методик контроля указаны в конце каждой из них.

2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при Минздраве России.

3. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко 16 марта 2003 года.

4. Введены впервые.

Фирма-производитель: Зенека (Великобритания).

Торговое наименование препарата: АКЦЕНТ, НИССХИН.

Название действующего вещества по номенклатуре ИСО: никосульфурон.

Название действующего вещества по номенклатуре ИЮПАК: 2-(4,6-диметоксипиримидин-2-илкарбамоил-сульфамоил)-N,N-диметилникотинамид.

Структурная формула (не приводится).

Молекулярная масса: 410,40.

Химически чистый никосульфурон представляет собой бесцветное кристаллическое вещество без запаха.

Температура плавления: 172 - 173 °С.

Растворимость: хорошо растворим в дихлорметане, толуоле, хлороформе; удовлетворительно - в ацетонитриле, ацетоне, этаноле; практически не растворим в гексане; растворимость в воде (в мг/л): 44 (рН 3,5) и 120000 (рН 7,0).

Область применения препарата: никосульфурон - послевсходовый гербицид для борьбы с широким кругом одно- и многолетних сорняков.

2.1.1. Принцип методики

Методика основана на определении никосульфурона с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

Отбор воздуха осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры "синяя лента".

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

2.1.2. Избирательность метода

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, а также пестицидов, применяемых в интенсивной технологии выращивания сельскохозяйственных культур (хлор- и фосфорорганические пестициды, симм-триазины, фенилмочевины, тио- и дитиокарбаматы).

2.1.3. Метрологическая характеристика метода (Р = 0,95)

Число параллельных определений - 6

Предел обнаружения в хроматографируемом объеме - 5,0 нг

Предел обнаружения - 0,01 мг/куб. м (при отборе 25 л воздуха)

Диапазон определяемых концентраций - 0,01 - 0,10 мг/куб. м

Среднее значение определения - 95,02%

Стандартное отклонение (S) - 1,18%

Относительное стандартное отклонение (DS) - 0,67%

Доверительный интервал среднего - 1,72%

Суммарная погрешность измерения не превышает 14%

Отбор проб воздуха рабочей зоны проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".

В течение 15 мин. последовательно отбирают 3 пробы, для чего воздух аспирируют в течение 5 мин. с объемным расходом 1 - 5 куб. дм/мин. через бумажный фильтр "синяя лента".

Фильтры с отобранными пробами, упакованные в полиэтиленовые пакеты, можно хранить в холодильнике не более 3 дней.

2.5.1. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

Отмеряют 300 мл ацетонитрила, прозрачного при 254 нм, переносят в колбу на 1000 мл, добавляют 5 мл уксусной кислоты и 695 мл бидистиллированной воды, фильтруют, дегазируют.

2.5.2. Кондиционирование колонки

Промыть колонку для ВЭЖХ системой ацетонитрил-вода-уксусная кислота (300:695:5) в течение 30 мин. при скорости подачи растворителя 1 мл/мин. Включить детектор и подождать стабилизации базовой линии (5 - 15 мин.).

2.5.3. Приготовление стандартных растворов

Стандартный раствор никосульфурона с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,01 г вещества в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в холодильнике не более 10 дней.

Рабочие стандартные растворы с концентрацией 0,25; 0,5; 1,0; 1,5; 2,5 мкг/мл готовят из раствора, содержащего 100 мкг/мл никосульфурона, соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ (п. 2.5.1). Растворы немедленно после приготовления помещаются в холодильник, где хранятся не более 3 суток.

2.5.4. Построение градуировочного графика

Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят по 20 мкл рабочего стандартного раствора никосульфурона с концентрацией 0,25; 0,5; 1,0; 1,5; 2,5 мкг/мл.

Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации.

Строят градуировочный график зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации никосульфурона в растворе в мкг/мл.

Бумажный фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл хлороформа, оставляют на 2 - 3 мин. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр дважды обрабатывают новыми порциями хлороформа объемом 10 мл.

Далее объединенный экстракт упаривают в грушевидных колбах на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 45 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в 1 мл подвижной фазы для ВЭЖХ (2.5.1) и анализируют по п. 2.7.

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Shimadzu (Япония)

Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,6 мм

Температура колонки: комнатная

Подвижная фаза: ацетонитрил-вода-уксусная кислота (300:695:5, по объему)

Скорость потока элюента: 1 мл/мин.

Рабочая длина волны: 254 нм

Чувствительность: 0,02 ед. абсорбции на шкалу

Объем вводимой пробы: 20 мкл

2.7.1. Неподвижная фаза: Lichrosorb RP 8, зернением 5 мкм

Время выхода никосульфурона: 6,5 - 7 мин.

2.7.2. Альтернативная неподвижная фаза:

Hipersil ODS, зернением 5 мкм

Время выхода никосульфурона: около 10 мин.

Линейный диапазон детектирования: 5 - 50 нг

Образцы, дающие пики большие чем стандартный раствор с концентрацией 2,5 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.

Содержание никосульфурона рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

где:

Т - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), °С;

Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;

u - расход воздуха при отборе пробы, куб. дм/мин.;

t - длительность отбора пробы, мин.

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными и легковоспламеняющимися веществами, электронагревательными приборами, сжатыми газами.

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95. ГСИ "Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".

Калинин В.А., Довгилевич Е.В., Калинина Т.С, Довгилевич А.В.

Московская сельскохозяйственная академия имени К.А. Тимирязева. 127550, Москва, Тимирязевская ул., д. 53/1, УНКЦ "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов". Телефон/факс: 976-43-26.