"МУК 4.1.1242-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций трибенурон-метила в атмосферном воздухе населенных мест методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"
(утв. Минздравом России 16.03.2003)

1. Подготовлены: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана; Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева; при участии Департамента Госсанэпиднадзора Минздрава России. Разработчики методики указаны в конце.

2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при Минздраве России.

3. Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко 16 марта 2003 г.

4. Введены впервые.

5. Введены с 1 июля 2003 г.

Настоящие Методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в атмосферном воздухе массовой концентрации трибенурон-метила в диапазоне 0,0024 - 0,024 мг/куб. м.

Трибенурон-метил - действующее вещество препарата ГРАНСТАР, СТС (750 г/кг), фирма-производитель Дюпон де Немур Интернэшнл С.А., Швейцария.

2-{[N-(6-метил-4-метокси-1,3,5-триазин-2-ил)-N-метилкарбамоил]-сульфамоил} - бензойная кислота, метиловый эфир (IUPAC).

Константа диссоциации рКа - 5.

Трибенурон-метил стабилен при температуре до 45 °С. Устойчив к гидролизу при pH 8 - 10, быстро разрушается в водных растворах при pH < 7 и pH > 12. Относительно неустойчив в большинстве органических растворителей.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

Область применения препарата. Трибенурон-метил рекомендуется к применению в качестве послевсходового гербицида широкого спектра активности для борьбы со многими широколистными сорными растениями на посевах зерновых колосовых культур.

Ориентировочно безопасный уровень воздействия (ОБУВ) в атмосферном воздухе - 0,003 мг/куб. м.

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей +/- 25%, при доверительной вероятности - 0,95.

Измерения концентраций трибенурон-метила выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

Концентрирование трибенурон-метила из воздуха осуществляют на бумажные фильтры "синяя лента", экстракцию с фильтра проводят этиловым спиртом.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 1 - 5 нг.

Определению не мешают компоненты препаративной формы, а также пестициды, применяемые при выращивании зерновых колосовых культур.

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1005-88.

4.2. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

К выполнению измерений допускают лиц, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С и относительной влажности не более 80%;

- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

Перед выполнением измерений проводят очистку ацетонитрила, подготовку подвижных фаз для ВЭЖХ, силиконирование стеклянной посуды, приготовление растворов, кондиционирование хроматографических колонок, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 ч, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

7.2.1. Подвижная фаза N 1

В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 560 куб. см бидистиллированной воды, 1 куб. см ортофосфорной кислоты, добавляют 440 куб. см ацетонитрила, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

7.2.2. Подвижная фаза N 2

7.2.2.1. Приготовление 0,2%-ного раствора ортофосфорной кислоты. В мерную колбу объемом 1000 куб. см помещают 500 куб. см бидистиллированной воды, 2 куб. см ортофосфорной кислоты, перемешивают, доводят до метки бидистиллированной водой и еще раз тщательно перемешивают.

7.2.2.2. Приготовление подвижной фазы N 2. В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 500 куб. см ацетонитрила, 100 куб. см метилового спирта и 400 куб. см 0,2%-ного раствора ортофосфорной кислоты. Смесь тщательно перемешивают, фильтруют и дегазируют.

В мерную колбу объемом 1000 куб. см помещают 1,6 куб. см 25%-ного водного раствора аммиака, доводят до метки ацетонитрилом и тщательно перемешивают.

Для силиконирования стекла (создания на поверхности стекла органилсиликоновой пленки с хорошими гидрофобными и адгезивными свойствами) использован 3%-ный раствор полиметилсилоксановой жидкости ПМС-100 в хлороформе. Перед силиконированием посуду тщательно моют и обезжиривают, просушивают, затем на несколько минут заливают раствором силикона (возможно его многократное использование). После выдерживания в сушильном шкафу при температуре 180 - 210 °С в течение 2 ч посуда готова к работе.

7.5.1. Исходный раствор трибенурон-метила для градуировки (концентрация 100 мкг/куб. см)

В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,01 г трибенурон-метила, растворяют в 50 - 70 куб. см 0,012 н аммиачного раствора ацетонитрила, доводят до метки этим же раствором, тщательно перемешивают. Раствор хранится в морозильной камере в течение суток.

Рабочие градуировочные растворы трибенурон-метила готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного стандартного раствора.

7.5.2. Рабочие растворы трибенурон-метила для градуировки

7.5.2.1. Градуировочные растворы N 1 - 5 (концентрация 0,5 - 5 мкг/куб. см). В 5 мерных колб вместимостью 100 куб. см помещают по 0,5; 1,0; 2,0; 3,0 и 5,0 куб. см исходного стандартного раствора с концентрацией 100 мкг/куб. см (п. 7.5.1), доводят до метки подвижной фазой N 2 (п. 7.2.2), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 6 с концентрацией трибенурон-метила 0,05; 0,1; 0,2; 0,3 и 0,5 мкг/куб. см соответственно.

7.5.2.2. Градуировочные растворы N 6 - 11 (концентрация 0,05 - 1,0 мкг/куб. см). В 5 мерных колб вместимостью 50 куб. см помещают по 0,5; 1,0; 2,0; 3,0 и 5,0 куб. см стандартного раствора N 5 с концентрацией 5 мкг/куб. см, доводят до метки подвижной фазой N 1 (п. 7.2.1), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 6 - 11 с концентрацией трибенурон-метила 0,05; 0,1; 0,2; 0,3, 0,5 и 1,0 мкг/куб. см соответственно.

Рабочие стандартные растворы готовят непосредственно перед хроматографированием.

Отбор проб воздуха проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 17.2.4.02-81 "ОПА. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ в воздухе населенных мест". Воздух со скоростью 5 куб. дм/мин. аспирируют через фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации трибенурон-метила на уровне 0,8 ОБУВ атмосферного воздуха необходимо отобрать 45 - 100 куб. дм воздуха.

Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильной камере при +4 °С - 2 дня.

Промывают колонку подвижной фазой (п. 7.2) в течение 30 мин. при скорости подачи растворителя 0,4 или 0,1 куб. см/мин. до установления стабильной базовой линии.

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (отн. единицы) от концентрации трибенурон-метила в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 5 растворам для градуировки: растворы N 1 - 5 или растворы N 6 - 11.

При проведении измерений с детектированием при длине волны 230 нм используют растворы для градуировки N 6 - 10, при длине волны 254 нм - растворы N 1 - 5 или N 7 - 11.

В инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм градуировочного раствора N 6 - 11 или по 10 куб. мм раствора N 1 - 5 и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.7.1. Осуществляют не менее 3 параллельных измерений.

7.8.1. Условия хроматографического анализа

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:

7.8.1.1. Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Perkin-Elmer (США)

Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 2,1 мм, содержащая Spherisorb S5 ODS 2, зернением 5 мкм.

Температура колонки: комнатная.

Подвижная фаза: ацетонитрил-вода-ортофосфорная кислота (44:56:0,1, по объему).

Скорость потока элюента: 0,4 куб. см/мин.

Рабочая длина волны: 230 (254) нм.

Чувствительность:

0,01 ед. абсорбции на шкалу (длина волны 230 нм),

0,005 ед. абсорбции на шкалу (длина волны 254 нм).

Объем вводимой пробы: 20 куб. мм.

Ориентировочное время выхода трибенурон-метила: 7,8 - 8,0 мин.

Линейный диапазон детектирования:

1 - 10 нг (при длине волны 230 нм),

2 - 20 нг (при длине волны 254 нм).

7.8.1.2. Альтернативные условия хроматографирования

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Милихром (Россия).

Колонка стальная длиной 64 мм, внутренним диаметром 2 мм, содержащая

Сепарон С18, зернением 5 мкм.

Температура колонки: комнатная.

Подвижная фаза: ацетонитрил-метанол-0,2%-ная ортофосфорная кислота (50:10:40, по объему).

Скорость потока элюента: 100 куб. мм/мин.

Рабочая длина волны: 254 нм.

Чувствительность: 0,2 ед. абсорбции на шкалу.

Объем вводимой пробы: 10 куб. мм.

Ориентировочное время выхода трибенурон-метила: 4,3 - 4,4 мин.

Линейный диапазон детектирования: 5 - 50 нг.

Образцы, дающие пики большие, чем рабочий градуировочный раствор с максимальной для используемых условий хроматографирования концентрацией, разбавляют соответствующей подвижной фазой.

Градуировочный график проверяют ежедневно по анализу 1 - 2 стандартных растворов различной концентрации. Если получаемые результаты отличаются более чем на 6% от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие стандартные растворы.

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 куб. см, заливают 10 куб. см этилового спирта, помещают на встряхиватель на 10 мин. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями этилового спирта объемом 10 куб. см.

Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 2 куб. см подвижной фазы N 1 (п. 7.2.1) или в 0,5 куб. см подвижной фазы N 2 (п. 7.2.2) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.8.1.1 или 7.8.1.2, соответственно.

Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика.

Перед анализом опытной пробы проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы - экстракта неэкспонированного фильтра.

Массовую концентрацию трибенурон-метила в пробе атмосферного воздуха, X, мг/куб. м, рассчитывают по формуле:

где:

C - концентрация трибенурон-метила в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/куб. см;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;

где:

T- температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), °С;

P - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;

u - расход воздуха при отборе пробы, куб. дм/мин.;

t - длительность отбора пробы, мин.

Примечание. Идентификация и расчет концентрации трибенурон-метила в пробах могут быть проведены с помощью компьютерных программ обработки хроматографических данных.

где:

d - норматив оперативного контроля сходимости, мг/куб. м;

При превышении норматива оперативного контроля сходимости измерения повторяют. При повторном превышении норматива d выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

Результат количественного анализа представляют в виде:

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95 "ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".

Ракитский В.Н., Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Волкова В.Н. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана, г. Мытищи Московской обл.).