Таблица 2
??????????????????????????????????????????????????????????????????
? Анализируемый ? p = 0,95, n = 5 ?
? объект ??????????????????????????????????????????????????
? ? Добавлено, ?Обнаружено, % ? Доверительный ?
? ? мг/кг ? ? интервал, +/- % ?
??????????????????????????????????????????????????????????????????
?Масло ? 0,05 ? 72 ? 15,9 ?
? ? 0,1 ? 81 ? 14,8 ?
? ? 0,5 ? 85 ? 13,0 ?
??????????????????????????????????????????????????????????????????
?Семена ? 0,02 ? 80 ? 15,7 ?
? ? 0,05 ? 85 ? 14,4 ?
? ? 0,1 ? 95 ? 12,1 ?
??????????????????????????????????????????????????????????????????
?Соломка льна ? 0,02 ? 75 ? 15,7 ?
? ? 0,05 ? 82 ? 15,1 ?
? ? 0,1 ? 86 ? 14,5 ?
??????????????????????????????????????????????????????????????????
Таблица 3
В МОДЕЛЬНЫХ ПРОБАХ ВОДЫ И ПОЧВЫ (p = 0,95, n = 6)
??????????????????????????????????????????????????????????????????
?Анализируемые? Внесено, ?Извлечено, %? Доверительный интервал ?
? объекты ?мг/куб. дм, ? ? среднего результата, % ?
? ? мг/кг ? ? ?
??????????????????????????????????????????????????????????????????
?Вода ? 0,001 ? 77,3 ? +/- 4,6 ?
? ? 0,002 ? 82,6 ? +/- 4,1 ?
? ? 0,004 ? 85,8 ? +/- 3,5 ?
? ? 0,008 ? 88,7 ? +/- 3,2 ?
??????????????????????????????????????????????????????????????????
?Почва ? 0,05 ? 74,5 ? +/- 5,3 ?
? ? 0,1 ? 78,2 ? +/- 4,9 ?
? ? 0,2 ? 82,7 ? +/- 4,4 ?
? ? 0,4 ? 85,5 ? +/- 3,8 ?
??????????????????????????????????????????????????????????????????
2.2.1. Реактивы, материалы и растворы
Аналитический стандарт
квизалофоп-П-тефурила
Аналитический стандарт
квизалофоп-свободной кислоты
Аналитический стандарт
квизалофоп-П-метила
Азот газообразный, высокой чистоты ТУ 301-07-25-89
Ацетон, осч ТУ 2633-004-11291058-94
Ацетонитрил, хч ТУ 6-09-4326-76
Вода дистиллированная и перегнанная
над KMnO и щелочью
4
Водород газообразный, высокой чистоты ТУ 301-07-27-90
н-Гексан, хч ТУ 6-09-3375-78
Гелий газообразный (сжатый) ТУ 51-940-80
очищенный марки "А"
Диэтиловый эфир, ч ГОСТ 6262-79
Кислота серная, осч ГОСТ 14262-78
Кислота соляная, осч 23-4 ТУ 6-09-01-794-90
Калия гидроксид, чда ГОСТ 24363-80
Натрий серно-кислый безводный, чда ГОСТ 4166-76
Натрий хлористый, чда ГОСТ 4233-77
N-нитрозометилмочевина ТУ 6-09-11-1643-82
Оксид алюминия для хроматографии, ч,
размер частиц 100 - 200 мкм, 1-й степени
активности по Брокману, нейтральный
Стандартные растворы квилазофоп-П-тефурила
в ацетоне с концентрацией 0,05 и 0,5 мг/мл
для фортификации проб
Стандартные растворы квизалофоп-свободной
кислоты в ацетоне с концентрациями
0,2; 0,5; 1,0; 2,0; 4,0; 8,0 мкг/мл
для построения калибровочных графиков
Стандартные растворы квизалофоп-П-метила
в н-гексане с концентрацией 0,05; 0,5 мг/мл
2.2.2. Приборы, аппаратура, посуда
Газовый хроматограф с ДЭЗ, ДПР или ТИД
Колонка хроматографическая набивная
стеклянная длиной 1,0 м и внутренним
диаметром 4,0 мм с неподвижной фазой 5%
OV-17 на Inerton Super-AW, 0,16 - 0,20 мм
Колонка хроматографическая капиллярная
кварцевая длиной 15 м и внутренним
диаметром 0,53 мм с неподвижной фазой
NBW-30 (типа OV-101) толщиной 1 мкм
Колонка хроматографическая набивная стеклянная
длиной 1,0 м и внутренним диаметром 3,0 мм с
неподвижной фазой 5% SE-30 на хроматоне
N-Super, 0,125 - 0,160 мм
Колонка хроматографическая капиллярная
кварцевая длиной 5 м и внутренним
диаметром 0,53 мм с неподвижной фазой
НР-1 (типа SE-30) толщиной 2,65 мкм
Колонки хроматографические стеклянные
длиной 300 мм и внутренним диаметром 10 мм
для очистки экстрактов
Аппарат для встряхивания или аналогичный ТУ 64-1-1081-73
Баня водяная ТУ 64-1-2850-76
Весы аналитические типа ВЛА-200 ГОСТ 34104-80
ИС NORMPROD: примечание.
Взамен ГОСТ 24104-80 с 1 января 1989 года Постановлением
Госстандарта СССР от 23.06.1988 N 2472 введен в действие
ГОСТ 24104-88. Взамен ГОСТ 24104-88 с 1 июля 2002 года
Постановлением Госстандарта России от 26.10.2001 N 439-ст введен
Весы лабораторные типа ВЛКТ-500 ГОСТ 24104-80
Пробирки мерные конические на 10 мл ГОСТ 1770-74
Воронка Бюхнера ГОСТ 9147-80
Воронки делительные емкостью 500 и 1000 мл ГОСТ 25336-82
Воронки для фильтрования стеклянные ГОСТ 25336-82
Колба Бунзена емкостью 250 мл ГОСТ 25336-82
Колбы круглодонные емкостью 250 мл ГОСТ 25336-82
Колбы мерные емкостью 250, 1000 мл ГОСТ 1770-74
Колбы плоскодонные на 250, 500 мл ГОСТ 25336-82
Колбы мерные емкостью 10, 50, 100 мл ГОСТ 1770-74
ИС NORMPROD: примечание.
Взамен ГОСТ 10394-72 Постановлением Госстандарта СССР
от 15.07.1982 N 2670 с 1 января 1984 года введен в действие
Концентраторы грушевидные ГОСТ 10394
(конические) НШ 19, КГУ-100-14/19, ТС
Мельница лабораторная (кофемолка)
Микрошприц МШ 10А ТУ 64-1-2850
Насос стеклянный вакуумный водоструйный ГОСТ 10696-75
Пипетки мерные, емкостью 0,1, 1, 2, 5 и 10 мл ГОСТ 20292-74
Ротационный испаритель ИР-1М или аналогичного типа ТУ 25-11-917-76
Сито с диаметром отверстий 1,0 мм
Стаканы стеклянные на 100 мл ГОСТ 6236
ИС NORMPROD: примечание.
ГОСТ 2823-73 утратил силу с 1 апреля 1989 года. Действовал
ГОСТ 27544-87 ("ИУС", N 4, 1989). Взамен ГОСТ 27544-87
Постановлением Госстандарта СССР от 30.03.1990 N 691 с 1 января
Термометр градуировочный ГОСТ 2823-73
(при погружении всей нижней части)
Универсальная индикаторная бумага ТУ 6-09-1181-76
Установка для перегонки растворителей
при атмосферном давлении
Установка для упаривания органических
растворителей в токе азота
Установка ультразвуковая (УЗ-баня) "Серьга"
УЗМ 002 или другая аналогичного типа. Выходная
электрическая мощность генератора не менее 70
Вт; рабочая частота установки - 22 кГц +/- 7,5%
Фильтры бумажные "красная лента" ТУ 6-09-1678-86
Фильтры бумажные "белая лента" ТУ 6-09-1678-86
Фильтры бумажные "синяя лента" ТУ 6-09-1678-86
ИС NORMPROD: примечание.
Постановлением Госстандарта СССР от 15.07.1982 N 2670
Фильтр Шотта IV ГОСТ 9775-61
Флаконы стеклянные (типа пенициллиновых)
емкостью 5 и 10 мл
Чашка фарфоровая ГОСТ 9147-80
2.3.1. Подготовка и очистка реактивов и растворителей
Перед началом работы рекомендуется проверить чистоту применяемых органических растворителей. Для этого 100 мл растворителя упаривают в ротационном испарителе при температуре 40 °C до объема 1,0 мл и хроматографируют. При обнаружении мешающих определению примесей проводят очистку растворителей в соответствии с общепринятыми методиками.
2.3.2. Подготовка и кондиционирование хроматографической набивной колонки
Подготовленной насадкой заполняют стеклянную колонку и уплотняют ее под вакуумом. Колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и кондиционируют ее при рабочем расходе газа-носителя и температуре 280 °C в течение 8 - 10 ч.
2.3.3. Приготовление стандартных растворов
2.3.3.1. Стандартные растворы квизалофоп-П-метила. Для приготовления маточного стандартного раствора навеску квизалофоп-П-метила массой 0,1 г растворяют в гексане в мерной колбе емкостью 200 мл. После растворения вещества раствор в колбе доводят до метки гексаном. Полученный раствор соответствует концентрации 0,5 мг/мл. Далее 1,0 мл гексанового раствора с концентрацией 0,5 мг/мл помещают в мерную колбу емкостью 100 мл и доводят гексаном до метки. Полученный раствор имеет концентрацию 5,0 мкг/мл.
Мерные колбы закрывают пробками и растворы тщательно перемешивают. Срок годности растворов не более 0,5 года при условии хранения в холодильнике.
Данные растворы используют для определения времени удерживания квизалофоп-П-метила в целях дальнейшей идентификации вещества в анализируемых пробах и отработки условий хроматографирования.
При изучении полноты определения квизалофоп-П-тефурила и квизалофоп-свободной кислоты для фортификации модельных проб используют ацетоновые растворы квизалофоп-П-тефурила с концентрацией 0,05 или 0,5 мг/мл.
2.3.3.2. Стандартные растворы квизалофоп-свободной кислоты. Для приготовления маточного стандартного раствора квизалофоп-свободной кислоты навеску массой 0,1 г растворяют в ацетоне в мерной колбе емкостью 200 мл. После растворения вещества раствор в колбе доводят до метки ацетоном. Полученный раствор соответствует концентрации 0,5 мг/мл. Далее 1,0 мл ацетонового раствора с концентрацией 0,5 мг/мл помещают в мерную колбу емкостью 100 мл и доводят ацетоном до метки. Полученный раствор имеет концентрацию 5,0 мкг/мл. Из этого раствора получают методом дальнейших последовательных разведений ацетоном растворы следующих концентраций: 0,2; 0,5; 1,0; 2,0; 4,0; 8,0 мкг/мл.
Мерные колбы закрывают пробками и растворы тщательно перемешивают. Срок годности растворов не более 0,5 года при условии хранения в холодильнике.
Полученные растворы используют для построения калибровочных графиков.
2.3.4. Построение калибровочных графиков
Для построения калибровочного графика осуществляется следующая процедура: по 1,0 мл приготовленных ацетоновых растворов квизалофоп-свободной кислоты (см. п. 2.3.3.2) упаривают досуха в токе азота при комнатной температуре и далее переходят к стадиям метилирования (п. 2.5.4) и очистки (п. 2.5.5). В результате получают растворы квизалофоп-П-метила различных концентраций в 1,0 мл гексана.
Осуществляют не менее 5 параллельных измерений и находят среднее значение высоты (площади) хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты (площади) хроматографического пика от концентрации квизалофоп-свободной кислоты.
2.3.5. Подготовка и кондиционирование хроматографических колонок с оксидом алюминия 1 степени активности по Брокману для очистки экстрактов
Оксид алюминия прогревают в фарфоровой чашке в термостате при 150 °C в течение 5 ч и охлаждают до комнатной температуры (1 степень активности по Брокману). Колбу с оксидом алюминия хранят герметично закрытой. Нижний зауженный конец стеклянной колонки закрывают тампоном из хлопковой ваты и заполняют (при легком встряхивании) 5,0 г оксида алюминия (высота слоя ~ 7,0 см). Над слоем оксида алюминия помещают слой безводного сульфата натрия высотой 2,0 см и перед использованием промывают колонку 20,0 мл гексана.
В пенициллиновый флакон емкостью 5,0 мл помещают навеску нитрозометилмочевины 100 - 120 мг и флакон пломбируют резиновой пробкой. В другой флакон такого же объема наливают 2,0 мл диэтилового эфира. Флакон пломбируют резиновой пробкой и охлаждают в морозильной камере в течение 1 ч при температуре 8 - 10 °C. Затем готовят установку для получения диазометана (схема установки представлена на рис. 6 - не приводится). Резиновую пробку флакона с эфиром прокалывают медицинской иглой диаметром 1,0 мм таким образом, чтобы один конец находился над поверхностью эфира, а другой выходил наружу (для сброса излишнего давления диазометана). Два флакона после этого соединяют между собой гибкой полихлорвиниловой трубкой-перемычкой, на концах которой герметично вставлены медицинские иглы диаметром 2,0 мм. Одна игла находится в свободном объеме флакона с нитрозометилмочевиной, другая игла погружается в слой эфира на дно флакона-приемника. Затем пробка флакона с нитрозометилмочевиной прокалывается иглой медицинского шприца на 1,0 мл, и из шприца по каплям вносится 50%-ный водный раствор гидроокиси калия. Образовавшийся в ходе реакции диазометан пропускается через эфир до насыщения (появление желтизны спелого лимона). Процедуру обязательно проводят в работающем вытяжном шкафу.
Отбор проб для анализа проводят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными 21.08.79, N 2051-79.
Пробы воды при наличии взвеси фильтруют через бумажный фильтр белая лента и хранят в закрытой стеклянной таре при температуре 4 - 6 °C не более 3 дней.
Пробы почвы просушивают до воздушно-сухого состояния при комнатной температуре в отсутствии прямого солнечного света и хранят в закрытой стеклянной или полиэтиленовой таре.
Семена и соломку просушивают до воздушно-сухого состояния и хранят до анализа в закрытой стеклянной или полиэтиленовой таре.
Пробы почвы перед анализом рассыпают на бумаге или кальке и пестиком разминают крупные комки, из проб пинцетом удаляют включения: корни растений, насекомых, камни, стекло, кости, уголь и другие. После этого пробы почвы растирают в ступке пестиком, просеивают через сито с диаметром отверстий 1,0 мм и после перемешивания отбирают усредненную аналитическую пробу.
Перед анализом сухие пробы измельчают: семена - в лабораторной мельнице (кофемолке), соломку - ножницами и после перемешивания отбирают усредненную аналитическую пробу.
2.5.1. Вода
Аналитическую пробу воды объемом 500 куб. см помещают в делительную воронку емкостью 1000 мл и добавляют 5,0 мл 5%-ного водного раствора гидроокиси калия. Содержимое воронки перемешивают встряхиванием и оставляют на 60 мин. при температуре 4 - 6 °C. После этого в воронку добавляют 100 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия. Содержимое воронки перемешивают, добавляют 100 мл н-гексана и энергично встряхивают в течение 2 мин. После 5-минутного отстаивания нижний водно-солевой слой сливают в мерную колбу емкостью 1000 мл, а верхний гексановый слой отбрасывают. Водно-солевую фракцию возвращают в делительную воронку и процедуру очистки пробы повторяют еще раз с использованием 50 мл гексана. Делительную воронку промывают водопроводной и ополаскивают дистиллированной водой.
В водно-солевую фракцию, находящуюся в колбе, добавляют при постоянном перемешивании по каплям концентрированную серную кислоту до уровня pH 1 - 2. Водно-солевую фракцию помещают в делительную воронку и добавляют 75 мл смеси гексан-диэтиловый эфир (80:20 по объему). Содержимое воронки энергично встряхивают в течение 2 мин. После 5-минутного отстаивания нижний водно-солевой слой сливают в мерную колбу емкостью 1000 мл, а верхний гексано-эфирный слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия (толщина слоя - 1,0 - 1,5 см), помещенный в воронке для фильтрования на бумажный фильтр "синяя лента", в круглодонную колбу емкостью 250 мл. Экстрагирование и фильтрование повторяют еще два раза с использованием последовательно 75 и 50 мл смеси гексан-диэтиловый эфир (80:20 по объему). После этого водно-солевую фракцию отбрасывают.
Объединенный гексано-эфирный экстракт, находящийся в колбе, помещают в ротационный вакуумный испаритель и упаривают растворители досуха при температуре 40 °C. Во флакон после его охлаждения до комнатной температуры вносят 1 мл свежеприготовленного эфирного раствора диазометана (п. 2.3.6), флакон закрывают пробкой и оставляют при комнатной температуре на 2 ч. После этого в работающем вытяжном шкафу в токе азота при комнатной температуре во флаконе упаривают досуха диэтиловый эфир и остаточные концентрации диазометана. Во флакон с сухим остатком вносят 0,5 мл ацетона и проводят количественное определение квизалофоп-П-тефурила по п. 2.6.
2.5.2. Почва
Аналитическую пробу почвы массой 20,0 +/- 0,1 г помещают в плоскодонную колбу емкостью 250 мл, добавляют 50 мл 1,0%-ного водного раствора гидроокиси калия и 50 мл ацетона. Содержимое колбы перемешивают встряхиванием и подвергают обработке ультразвуком в УЗ-бане по 5 мин. два раза. Колбу с пробой закрывают и оставляют на 14 - 16 ч (на ночь) при комнатной температуре. После этого содержимое колбы встряхивают, подвергают обработке ультразвуком в УЗ-бане по 5 мин. два раза и фильтруют через бумажный фильтр "белая лента" под вакуумом на воронке Бюхнера в колбу Бунзена емкостью 250 мл. Оставшуюся часть пробы в колбе промывают 20 мл ацетона и экстракт также фильтруют.
При использовании аппарата для встряхивания в плоскодонную колбу с аналитической пробой вносят 50 мл 1,0%-ного водного раствора гидроокиси калия и 50 мл ацетона и встряхивают в течение 60 мин. Колбу с пробой закрывают и оставляют на 14 - 16 ч (на ночь) при комнатной температуре. После этого содержимое колбы встряхивают 30 мин. с использованием аппарата для встряхивания и фильтруют через бумажный фильтр "белая лента" под вакуумом на воронке Бюхнера в колбу Бунзена емкостью 250 мл. Оставшуюся часть пробы в колбе промывают 20 мл ацетона и экстракт также фильтруют.
Объединенный экстракт количественно переносят в делительную воронку емкостью 500 мл, добавляют 50 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия. Содержимое воронки перемешивают, добавляют 50 мл гексана и энергично встряхивают в течение 2 мин. После 5-минутного отстаивания нижний слой сливают в мерную колбу емкостью 250 мл, а верхний гексановый слой отбрасывают. Водно-солевую фракцию возвращают в делительную воронку и процедуру очистки экстракта повторяют еще раз с использованием 50 мл гексана. Делительную воронку промывают водопроводной и ополаскивают дистиллированной водой.
В водно-солевую фракцию, находящуюся в колбе, добавляют при постоянном перемешивании по каплям концентрированную серную кислоту до уровня pH 1 - 2. Водно-солевую фракцию переносят в делительную воронку и добавляют 50 мл смеси гексан-диэтиловый эфир (80:20, по объему). Содержимое воронки энергично встряхивают в течение 2 мин. После 5-минутного отстаивания нижний слой сливают в мерную колбу емкостью 250 мл, а верхний гексано-эфирный слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия (толщина слоя - 1,0 - 1,5 см), помещенный в воронке для фильтрования на бумажный фильтр "синяя лента", в круглодонную колбу емкостью 250 мл. Экстрагирование и фильтрование повторяют еще два раза с использованием последовательно 50 и 30 мл смеси гексан-диэтиловый эфир (80:20 по объему). После этого водно-солевую фракцию отбрасывают.
Колбу с объединенным гексано-эфирным экстрактом помещают в ротационный вакуумный испаритель и упаривают растворители досуха при температуре 40 °C. Во флакон после его охлаждения до комнатной температуры вносят 1 мл свежеприготовленного эфирного раствора диазометана (п. 2.3.6), флакон закрывают пробкой и оставляют при комнатной температуре на 2 ч. После этого в работающем вытяжном шкафу в токе азота при комнатной температуре во флаконе упаривают досуха диэтиловый эфир и остаточные концентрации диазометана. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона и проводят количественное определение квизалофоп-П-тефурила по п. 2.6.
2.5.3. Семена, масло и соломка льна
2.5.3.1. Экстракция семян. Навеску измельченных семян массой 10,0 +/- 0,1 г помещают в плоскодонную колбу емкостью 250 мл, заливают 100 мл ацетона и подвергают обработке ультразвуком в УЗ-бане в течение 5 мин. Затем для отделения механических примесей от образовавшейся суспензии экстракт пропускают через коническую воронку с хлопковой ватой в химический стакан. Воронку и вату промывают 10 мл ацетона. Далее экстракт фильтруют с помощью воронки Бюхнера (фильтр "белая лента") с последующей промывкой фильтра 10 мл ацетона. Экстракт переносят в делительную воронку емкостью 500 мл, добавляют 100 мл 0,5%-ного водного раствора гидроокиси калия и выдерживают смесь в течение 1 ч.
Далее в воронку добавляют 150 мл насыщенного раствора хлорида натрия, перемешивают и добавляют 50 мл гексана. Воронку встряхивают в течение 2 мин. и после разделения слоев нижний водный слой собирают в колбу, а гексановый слой отбрасывают. Делительную воронку тщательно промывают дистиллированной водой и переносят в нее водную фракцию, добавляют 50 мл гексана и процедуру повторяют еще раз. Водный слой собирают в плоскодонную колбу емкостью 500 мл и подкисляют 2,0 - 2,5 мл концентрированной HCl (до pH 1,0 - 2,0), контролируя pH с помощью индикаторной бумаги, и пропускают через фильтр Шотта N 4. Затем водную фракцию переносят в чистую делительную воронку емкостью 500 мл и добавляют 100 мл смеси гексан-диэтиловый эфир (1:1). Воронку встряхивают в течение минуты и после разделения слоев (выдерживать не менее 30 мин.) водный слой отбрасывают. В случае образования эмульсии в оставшийся органический слой добавляют несколько капель этилового спирта, осторожно перемешивают и пропускают через коническую воронку с ватой и слоем безводного сульфата натрия (толщина 1,0 - 1,5 см) в грушевидную колбу емкостью 200 мл. Воронку и сульфат натрия промывают 5 мл гексана. Объединенный экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани 40 °C до объема 5 - 10 мл. Остаток экстракта переносят в коническую колбу или пенициллиновый флакон и упаривают досуха в токе азота при температуре 60 °C. Дальнейшие метилирование и очистку экстракта проводят в соответствии с п. п. 2.5.4 и 2.5.5.
2.5.3.2. Экстракция масла. Образец масла массой 5,0 +/- 0,1 г помещают в делительную воронку емкостью 500 мл, добавляют 120 мл гексана и хорошо перемешивают. Затем в делительную воронку добавляют 200 мл ацетонитрила, воронку интенсивно встряхивают в течение 1 мин. и выдерживают смесь не менее 30 мин. После разделения слоев нижний ацетонитрильный слой переносят в делительную воронку емкостью 1000 мл, добавляют 180 мл 0,5%-ного раствора гидроокиси калия и выдерживают смесь 1 ч при комнатной температуре. Затем в делительную воронку добавляют 100 мл насыщенного раствора хлорида натрия и хорошо перемешивают. Далее в делительную воронку добавляют 100 мл гексана, интенсивно встряхивают в течение 2 мин. и после разделения слоев нижний водный слой сливают в плоскодонную колбу емкостью 500 мл, гексановый слой отбрасывают. Делительную воронку тщательно промывают, водную фракцию переносят в воронку и повторно проводят процедуру очистки с использованием 100 мл гексана.
Далее водную фракцию подкисляют 3,0 - 3,5 мл концентрированной HCl (до pH 1,0 - 2,0). Делительную воронку тщательно промывают и переносят в нее подкисленную водную фракцию. В делительную воронку добавляют 100 мл смеси гексан-диэтиловый эфир (1:1). Воронку интенсивно встряхивают в течение 2 мин. и после разделения слоев нижний водный слой отбрасывают, а органическую фазу пропускают через коническую воронку с ватой и слоем безводного сульфата натрия (толщина 1,0 - 1,5 см) в грушевидную колбу емкостью 200 мл. Воронку и сульфат натрия промывают 5 мл гексана. Объединенный экстракт упаривают на ротационном испарителе при температуре водяной бани 40 °C до объема 5 - 10 мл. Остаток экстракта переносят в коническую колбу или пенициллиновый флакон и упаривают досуха в токе азота при температуре 60 °C. Дальнейшие метилирование и очистку экстракта проводят в соответствии с п. п. 2.5.4 и 2.5.5.
2.5.3.3. Экстракция соломки льна. Измельченный образец соломки льна массой 10,0 +/- 0,1 г помещают в плоскодонную колбу емкостью 250 мл, заливают 150 мл ацетона и подвергают обработке ультразвуком в УЗ-бане в течение 5 мин. Затем экстракт отфильтровывают с помощью воронки Бюхнера (на фильтре "красная лента"). Фильтр промывают 10 мл ацетона. Экстракт переносят в делительную воронку емкостью 500 мл, добавляют 150 мл 0,5%-ного водного раствора гидроокиси калия и выдерживают смесь в течение 1 ч при комнатной температуре. Далее добавляют 75 мл насыщенного раствора хлорида натрия, перемешивают и добавляют 50 мл гексана. Воронку встряхивают в течение 2 мин. и после разделения слоев нижний водный слой собирают, а гексановый слой отбрасывают. Делительную воронку тщательно промывают дистиллированной водой и переносят в нее водную фракцию, добавляют 50 мл гексана и процедуру повторяют еще раз. Водный слой собирают в плоскодонную колбу емкостью 500 мл и подкисляют 2,5 - 3,0 мл концентрированной HCl (до pH 1,0 - 2,0). После этого водную фракцию переносят в чистую делительную воронку емкостью 500 мл и добавляют 100 мл смеси гексан-диэтиловый эфир (1:1). Воронку встряхивают в течение 2 мин. и после разделения слоев водный слой отбрасывают, а органическую фазу пропускают через коническую воронку с ватой и слоем безводного сульфата натрия (толщина 1,0 - 1,5 см) в грушевидную колбу емкостью 200 мл. Воронку и сульфат натрия промывают 5 мл гексана. Объединенный экстракт упаривают на ротационном испарителе при температуре водяной бани 40 °C до объема 5 - 10 мл. Остаток экстракта переносят в коническую колбу или пенициллиновый флакон и упаривают досуха в токе азота при 60 °C. Дальнейшие метилирование и очистку экстракта проводят в соответствии с п. п. 2.5.4 и 2.5.5.
К сухому остатку (из п. п. 2.5.3.1, 2.5.3.2, 2.5.3.3) добавляют 1,0 мл эфира, насыщенного диазометаном, флакон закрывают и оставляют на 40 мин. при комнатной температуре. Затем эфир упаривают в токе азота досуха, растворяют сухой остаток в 2,0 мл гексана и экстракт подвергают очистке по п. 2.5.5.
Гексановый экстракт (из п. 2.5.4) количественно переносят на подготовленную колонку с оксидом алюминия 1-й степени активности по Брокману. После этого колонку промывают 20 мл н-гексана, который отбрасывают. Квизалофоп-П-метил элюируют 30 мл диэтилового эфира со скоростью не более 60 капель в минуту в грушевидную колбу-концентратор. Элюат упаривают в токе азота досуха при комнатной температуре. Сухой остаток растворяют в 1,0 мл гексана и анализируют на содержание квизалофоп-П-метила в соответствии с п. 2.6.
2.6.1. Для набивной колонки с неподвижной фазой 5% OV-17
Газовый хроматограф "Hewlett-Packard 5890"
с ДЭЗ (порог чувствительности по линдану
-10
не более 3 x 10 мг/с) или газовый
хроматограф "Цвет-500" с ДПР (порог
чувствительности по линдану
-10
не более 5 x 10 мг/с)
Колонка стеклянная спиральная длиной
1,0 м и внутренним диаметром 4,0 мм
Носитель - Inerton Super-AW (0,16 -
0,20 мм) с неподвижной фазой 5% OV-17
-10
Рабочая шкала электрометра 2 x 10 А
Скорость протяжки ленты самописца 0,3 см/мин.
Скорость потока газа-носителя (азота в/ч ) 40 куб. см/мин.
Температура колонки 280 °C
испарителя 290 °C
детектора 300 °C
Объем вводимой пробы 2,0 мкл
Время удерживания квизалофоп-П-метила 5,0 +/- 0,1 мин.
Линейный диапазон определения 0,2 - 20 нг
После выполнения 5 - 7 анализов набивную колонку следует прогреть при температуре 300 °C в течение 1 ч.
2.6.2. Для набивной колонки с неподвижной фазой 5% SE-30
Газовый хроматограф "Цвет-500" с ТИД или ДПР
Колонка хроматографическая набивная
длиной 1 м и внутренним диаметром 3 мм
с неподвижной фазой 5% SE-30 на
хроматоне N-Super, 0,125 - 0,16 мм
-10
Показания электрометра 32 x 10
Скорость движения ленты самописца 0,25 см/мин.
Температура испарителя 260 °C
колонки 260 °C
детектора 310 °C
Расход газа-носителя (азота в/ч) 40 куб. см/мин.
Расход водорода и воздуха для ТИД 15 и 300 куб. см/мин.
соответственно
Объем вводимой пробы 2 мкл
Время удерживания квизалофоп-П-метила 2,7 +/- 0,2 мин.
Предел детектирования 0,5 нг
Линейный диапазон детектирования 0,5 - 8,0 нг
2.6.3. Для капиллярной колонки с неподвижной фазой NBW-30 (типа OV-101)
Газовый хроматограф "Hewlett-Packard 589О"
с ДЭЗ (порог чувствительности по линдану
-10
не более 3 x 10 мг/с) или газовый
хроматограф "Цвет-500" с ДПР (порог
чувствительности по линдану
-10
не более 5 x 10 мг/с)
Колонка кварцевая капиллярная длиной 15 м,
внутренним диаметром 0,53 мм с неподвижной
фазой NBW-30 (типа OV-101) толщиной 1 мкм
-10
Рабочая шкала электрометра 2 x 10 А
Скорость потока азота в/ч 10 куб. см/мин.
Скорость потока дополнительного 40 куб. см/мин.
газа (азота в/ч) к детектору
Температура колонки 250 °C
испарителя 270 °C
детектора 300 °C
Объем вводимой пробы 2,0 мкл
Время удерживания квизалофоп-П-метила 3,0 +/- 0,1 мин.
Линейный диапазон определения 0,2 - 20 нг
2.6.4. Для капиллярной колонки с неподвижной фазой SE-30
Газовый хроматограф с ТИД или ДЭЗ
Колонка кварцевая капиллярная длиной 5 м,
внутренним диаметром 0,53 мм с неподвижной
фазой НР-1 (типа SE-30), 2,65 мкм
Температура колонки программирование
от 180 (3 мин.) до
280 °C (15 мин.)
со скоростью
10 °C/мин.
испарителя 260 °C
детектора 300 °C
Расход газов:
газа-носителя (гелий марки "А") 7 куб. см/мин.
водорода и воздуха к ТИД 30 и 300 куб. см/мин.
соответственно
дополнительного газа (гелий 60 куб. см/мин.
марки "А") к ТИД
дополнительного газа (азот в/ч) к ДЭЗ 40 куб. см/мин.
Объем вводимой пробы 1 мкл
Время удерживания квизалофоп-П-метила 11,7 +/- 0,1 мин.
Предел детектирования 0,5 нг
Линейный диапазон детектирования 0,5 - 8,0 нг
Регистрацию хроматограмм при работе на газовом хроматографе "Hewlett-Packard 5890" проводили на электронном интеграторе "HP 3396" (параметры интегрирования: порог обнаружения пиков (Thrsh) = 4, ширина пика (PkWd) = 0,04). При использовании газового хроматографа "Цвет-500" может быть применен самописец КСП-4 (при обработке результатов вручную) или компьютерная система обработки данных типа "Мультихром".
Содержание квизалофоп-П-тефурила рассчитывают методом внешнего
стандарта по формуле:
H x A x V x 1,2
1
X = ----------------,
H x m
0
где:
X - содержание квизалофоп-П-тефурила в пробе, мг/кг или
мг/куб. дм;
H - высота (площадь) пика анализируемого вещества,
1
мм (кв. мм);
H - высота (площадь) пика стандартного раствора
0
квизалофоп-П-метила, мм (кв. мм);
A - концентрация стандартного раствора квизалофоп-П-метила,
мкг/мл;
V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования,
мл;
m - объем (куб. см) или масса (г) аналитической пробы;
1,2 - коэффициент пересчета, учитывающий соотношение
молекулярных масс квизалофоп-П-метила и квизалофоп-П-тефурила.
При получении достоверных результатов измерений конечный
результат записывается следующим образом:
X = (х +/- ДЕЛЬТА),
где:
X - содержание остаточных количеств квизалофоп-П-тефурила в
анализируемой пробе;
х - среднее из трех параллельных результатов измерений;
ДЕЛЬТА - показатель погрешности измерений, соответствующий
диапазону, в который попадает величина х.
Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами, а также требования, изложенные в документации на приборы.
Долженко В.И., Крылов А.И., Николаев М.Я., Шеболдасова Н.М., Жаковская З.А., Тарарин П.А., Григорьева Л.В. (ВНИИ защиты растений, 189620, Санкт-Петербург - Пушкин, шоссе Подбельского, 3).
Вернуться в "Каталог нормативных документов"
Источник информации: https://internet-law.ru/documents/prod/metodicheskie-ukazaniya/7/muk_4_57145.html
На правах рекламы:
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||