"МУК 4.1.812-99. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентрации бис[1(1Н-2-пиридонил)]глиоксаля в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Минздравом России 30.12.1999)

Методические указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии "Научные основы гигиены труда и профпатологии". Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в декабре 1999 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 35) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Методические указания разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования".

Методики выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.687-98 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".

(Структурная формула не приводится)

М. м. 244

Относится к амидам щавелевой кислоты, применяется в качестве компонента хемилюминисцентной композиции.

В воздухе <...> находится в виде аэрозоля.

Раздражающим действием на кожные покровы не обладает, слизистые оболочки глаза раздражает только при воздействии порошка. ОБУВ в воздухе - 1 мг/куб. м.

Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора. Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения концентрации вещества в воздухе - 0,5 мг/куб. м (при отборе 50 л воздуха).

Нижний предел измерения - 0,25 мкг в анализируемом объеме пробы.

Диапазон измеряемых концентраций - 0,5 - 8,0 мг/куб. м.

Метод избирателен в присутствии дихлорангидрида щавелевой кислоты, пиридона-2 и ацетата 2-гидроксипиридина.

Суммарная погрешность не превышает +/- 19,5%.

Время выполнения измерений, включая отбор проб, 2 часа.

Хроматограф жидкостной микроколоночный типа "Милихром" с ультрафиолетовым детектором или хроматограф жидкостной другой марки, позволяющий детектировать пробы при 330 нм.

Колонка аналитическая хроматографическая КАХ-2. Длина колонки 80 мм, внутренний диаметр 2 мм.

Аспиратор для отбора проб воздуха, модель 822, ТУ 64-1-862-82.

Испаритель вакуумный, типа ЭРА-М.

Весы аналитические типа ВЛА-200 или ВЛР-200, ГОСТ 24104-80.

Пипетка 6-2-10, ГОСТ 20292-74.

Пипетка 8-2-0,2, ГОСТ 20292-74.

Стаканчик СВ-24/10, ГОСТ 25336-82.

Колба 0-25-14/23-ТС, ГОСТ 25336-82.

Колба 4-10-2, ГОСТ 1770-74.

Колба 4-50-2, ГОСТ 1770-74.

Цилиндр 4-100, ГОСТ 1770-74.

Цилиндр 1-10, ГОСТ 1770-74.

Воронка фильтрующая ВФ-ПОР 3,0 ХС, ГОСТ 25336-82.

Пробирка П40-17-100-14/23 ХС, ГОСТ 25336-82.

Бис[1-(1Н-2-пиридонил)]глиоксаль, 98%-ный.

Ацетонитрил, х.ч. ТУ 6-09-3534-87, подвергают дистилляции и фильтруют перед приготовлением подвижной фазы.

Метанол, х.ч., ГОСТ 6995-67, подвергают дистилляции и фильтруют перед приготовлением подвижной фазы.

Вода дистиллированная, ГОСТ 6709-72, подвергают дистилляции и фильтруют перед приготовлением подвижной фазы.

Подвижная фаза для ВЭЖХ состоит из смеси ацетонитрила, метанола и воды в объемном соотношении 20:25:55. Перед использованием подвижную фазу фильтруют и дегазируют.

Аналитический аэрозольный фильтр АФА-ВП-20, ТУ 957181-76.

Стандартный раствор бис[1-(1Н-2-пиридонил)]глиоксаля, содержащий 2 мг/мл препарата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г бис[1-(1Н-2-пиридонил)]глиоксаля и растворяют навеску в ацетонитриле. Раствор устойчив в течение 5 суток при хранении в темном месте.

Насадка хроматографической колонки - Сепарон SGS RP С18-супер (размер частиц 7 мкм) или подобного типа.

Воздух с объемным расходом 10 л/мин. аспирируется через фильтр АФА-ВП-20. Для определения 1/2 ОБУВ следует отобрать 50 л воздуха.

Срок хранения фильтра в темном месте - 5 суток.

Хроматографическую колонку, заполненную в заводских условиях, производства НПО "Научприбор" или МНПП "Элсико", имеющую эффективность не менее 5000 теоретических тарелок, подсоединяют к хроматографу.

Для количественного определения используют метод абсолютной калибровки. В хроматографическую колонку вводят по 2 мкл градуировочного раствора, приготовленного соответствующим разбавлением стандартного раствора, с концентрацией 0,125; 0,50; 1,0; 1,50 и 2 мг/мл.

На основании полученных данных строят градуировочный график, выражающий зависимость высоты пика от концентрации вещества. Построение градуировочного графика проводят из 5 параллельных определений для каждого раствора.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

Скорость потока подвижной фазы - 50 мкл/мин.;

Длина волны УФ-детектора - 330 нм;

Диапазон чувствительности - 0,4 ед. опт. плотности;

Время сканирования - 0,6 с;

Диапазон измерений самописца - 10 мв;

Скорость диаграммной ленты - 180 мм/час;

Объем вводимой пробы - 2 мкл;

Время удерживания - 9 мин.

Фильтры с отобранными пробами помещают в стаканчик, вносят 10 мл ацетонитрила, выдерживают при комнатной температуре 1 ч, раствор декантируют в колбу для упаривания, отжимают фильтр стеклянной палочкой о стенки стаканчика, фильтр удаляют, отжатый с фильтра раствор выливают в колбу для упаривания. Стаканчик промывают 5 мл ацетонитрила и растворитель переносят в колбу для упаривания. Объединенный экстракт фильтруют, упаривают досуха на роторном испарителе, сухой остаток растворяют в 0,2 мл ацетонитрила.

Вводят в хроматографическую колонку 2 мкл пробы, записывают хроматограмму, измерят высоту пика и по градуировочному графику находят концентрацию определяемого вещества.

Концентрацию вещества "С" в мг/куб. м в воздухе вычисляют по формуле:

где:

а - количество вещества в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

в - общий объем раствора пробы, мл;

б - объем раствора пробы, взятый для анализа, мл;

V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 760 мм рт. ст.) проводят по формуле: