"МУК 4.1.914-99. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентраций 2-(4-метил-1-пиперазинил)-10-метил-3,4-диазофенаксазина дигидрохлорида дигидрат (азафена) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Минздравом России 30.12.1999)

Методические указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии "Научные основы гигиены труда и профпатологии". Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в декабре 1999 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 36) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Данная методика контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработана и подготовлена в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования".

Методика выполнена с использованием современных методов исследования, метрологически аттестована и дает возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.687-98 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".

Структурная формула (не приводится).

М. м. 388,3.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает общетоксическим действием.

ОБУВ в воздухе 0,4 мг/куб. м.

Методика основана на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения азафена в хроматографируемом объеме (50 мкл) 0,05 мкг.

Нижний предел измерения концентрации азафена в воздухе 0,2 мг/м (при отборе 25 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций азафена в воздухе от 0,2 до 4 мг/куб. м.

Определению не мешает присутствие пикалина и диазафеноксазина.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 19,57%.

Время выполнения измерения, включая отбор пробы, около 40 минут.

Микроклоночный жидкостной хроматограф "Милихром" или другие модели с УФ-детектором.

Стеклянная ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5, ТУ 25-1173.131-85 (или другая такого же типа). Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2 х 2 х 0,2 мм).

Весы аналитические ВЛР-200, ГОСТ 19491-74, или другие того же класса.

Электроаспиратор ЭА-1, ОСТ 95.10052-84.

Фильтродержатель, ТУ 95.7205-77.

Микроскоп отсчетный типа МПБ-2, ТУ 3-3.824-76.

Колбы мерные вместимостью 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Пипетки мерные вместимостью 5 мл, ГОСТ 20292-74.

Градуированные пробирки с пришлифованными пробками вместимостью 10 мл, ГОСТ 10515-75.

Азафен, ФС 42-1613-81, 99% чистоты.

Калий марганцевокислый (калий перманганат), ТУ 20490-75.

Ацетонитрил очищенный

Ацетонитрил очищенный получают из ацетонитрила, ТУ 6-09-3534-82, путем ректификации с предварительной химической обработкой, которая заключается в кипячении растворителя с обратным холодильником в присутствии перманганата калия из расчета 1 г перманганата калия на 1 л растворителя. Кипячение проводится до полного перехода перманганата калия в двуокись марганца. Перед ректификацией осадок двуокиси марганца отделяют путем фильтрации через фильтр Шотта N 4. Ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2 х 2 х 0,2 мм). Основную фракцию отбирают при температуре 81,6 °С (атмосферное давление) в пределах колебаний +/- 0,1 °С.

0,067 М раствор динатрийфосфата готовят растворением 23,877 г натрия фосфорнокислого двузамещенного 12-водного в воде в мерной колбе вместимостью 1 л.

0,067 М раствор калийдифосфата готовят растворением 9,078 г калия фосфорнокислого однозамещенного в воде в мерной колбе вместимостью 1 л.

0,067 М фосфатный буфер (рН 7,8) готовят смешивая 915 мл 0,067 М раствора динатрийфосфата и 85 мл 0,067 М раствора калийдифосфата.

0,005 М фосфатный буфер (рН 7,8) готовят соответствующим разбавлением 0,067 М фосфатного буфера водой.

Фосфатный буфер устойчив при хранении в холодильнике в течение месяца.

Элюент: ацетонитрил-0,005 М фосфатный буфер (рН 7,8), 5:1.

Стандартный раствор N 1 с концентрацией азафена 500 мкг/мл готовят растворением 0,05 г вещества в элюенте в мерной колбе вместимостью 100 мл.

Стандартный раствор N 2 с концентрацией азафена 25 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 элюентом.

Растворы используют в день приготовления.

Фильтры аналитические стекловолокнистые, ТУ 8-ЮП-1-77.

Воздух с объемным расходом 5 л/мин. аспирируют через аналитический стекловолокнистый фильтр. Для определения 0,5 ОБУВ достаточно отобрать 25 л воздуха.

Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике в течение месяца.

Хроматографическая колонка промышленного изготовления.

Инжектируют в хроматограф от 0,050 до 1 мкг азафена.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочный график, выражающий зависимость площади пиков (кв. мм) от содержания азафена в хроматографируемом объеме пробы (мкг).

Построение градуировочных графиков необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя по 5 параллельных измерений для каждого инжектируемого объема. Проверку градуировочных графиков следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 5 мл элюента и оставляют на 15 мин. при комнатной температуре и периодическом помешивании. Степень десорбции с фильтра 97,5%.

Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях по отношению к тому же элюенту, что и при построении градуировочного графика.

Количественное определение содержания азафена в хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Концентрация азафена "С" в воздухе (в мг/куб. м) вычисляют по формуле:

где:

а - содержание азафена в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

б - объем пробы, взятой на хроматографирование, мкл;

в - общий объем анализируемого раствора, мкл;

V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Приведение объема воздуха к условиям по ГОСТ 12.1.016-79 (температура 20 °С, давление 760 мм рт. ст.) проводят по следующей формуле: