"МУК 4.1.931-99. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентраций 1-фенил-3-метил-5-пиразолона методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны"
(утв. Минздравом России 30.12.1999)

Методические указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии "Научные основы гигиены труда и профпатологии". Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в декабре 1999 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 36) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Данная методика контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработана и подготовлена в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования".

Методика выполнена с использованием современных методов исследования, метрологически аттестована и дает возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.687-98 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".

Структурная формула: (не приводится).

М. м. 174,2.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает общетоксическим действием.

ОБУВ в воздухе - 0,5 мг/куб. м.

Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения 1-фенил-3-метил-5-пиразолона в хроматографируемом объеме пробы (50 мкл) - 0,1 мкг.

Нижний предел измерения 1-фенил-3-метил-5-пиразолона в воздухе - 0,25 мг/куб. м (при отборе 40 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций 1-фенил-3-метил-5-пиразолона в воздухе от 0,25 до 5,0 мг/куб. м.

Определению не мешает присутствие тартразина, дибазола, мешает присутствие этадена, мерадина, аденинсульфата.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 20%.

Время выполнения измерения, включая отбор пробы, около 50 мин.

Микроколоночный жидкостной хроматограф "Милихром" или другие модели с УФ-детектором.

Электроаспиратор ЭА-1, ОСТ 95.10052-84.

Фильтродержатель.

Микроскоп отсчетный типа МПБ-2, ТУ 3.3-824-78.

Стеклянная ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5 (или другая такого же типа).

Колбы мерные вместимостью 25, 100 мл и 1 л, ГОСТ 1770-74.

Пипетки вместимостью 1, 5 и 10 мл, ГОСТ 20292-74.

Пробирки с пришлифованными пробками вместимостью 10 мл, ГОСТ 10515-75.

1-фенил-3-метил-5-пиразолон, ГОСТ 9593-74, содержание основного вещества не менее 98%.

Метанол (спирт метиловый) очищенный.

Метанол очищенный получают из метанола, ТУ 2222-78Е, путем ректификации. Ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2 х 2 х 0,2 мм). Основную фракцию отбирают при температуре 64,5 °С (атмосферное давление) в пределах колебаний +/- 0,1 °С.

0,067 М раствор динатрий фосфата готовят растворением 23,986 г натрия фосфорнокислого двузамещенного 12-водного в воде в мерной колбе вместимостью 1 л.

0,067 М раствор калийфосфата готовят растворением 9,078 г калия фосфорнокислого однозамещенного в воде в мерной колбе вместимостью 1 л.

0,067 М фосфатный буфер (рН 6,5) готовят, смешивая 311 мл 0,067 М раствора динатрийфосфата и 689 мл 0,067 М раствора калийфосфата.

0,02 М фосфатный буфер (рН 6,5) готовят соответствующим разбавлением 0,067 М фосфатного буфера (рН 6,5) водой.

Фосфатный буфер устойчив при хранении в холодильнике в течение месяца.

Растворитель: 0,067 М фосфатный буфер (рН 6,5) - метанол, 1:1.

Элюент: 0,067 М фосфатный буфер (рН 7,2) - метанол (3:2).

Стандартный раствор N 1 с концентрацией 1-фенил-3-метил-5-пиразолона 500 мкг/мл готовят растворением 0,05 г вещества в растворителе в мерной колбе вместимостью 100 мл.

Стандартный раствор N 2 с концентрацией 1-фенил-3-метил-5-пиразолона 40 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 растворителем.

Растворы устойчивы при хранении в холодильнике в течение суток.

Фильтры АФА-ВП-10, ТУ 85-743-80.

Воздух с объемным расходом 5 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-10. Для определения 0,5 ОБУВ достаточно отобрать 40 л воздуха.

Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике в течение месяца.

Хроматографическая колонка промышленного изготовления.

Количественный анализ проводят методом абсолютной калибровки с использованием градуировочных растворов, которые готовят с концентрацией от 0,002 до 0,04 мкг/мкл путем соответствующего разбавления стандартного раствора N 2 растворителем.

Растворы используют в день приготовления.

Инжектируют в хроматограф по 50 мкл каждого из градуировочных растворов, что соответствует содержанию от 0,1 до 2 мкг 1-фенил-3-метил-5-пиразолона.

На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочный график, выражающий зависимость площади пиков (кв. мм) от содержания 1-фенил-3-метил-5-пиразолона в хроматографируемом объеме пробы (мкг).

Построение градуировочных графиков необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя по 5 параллельных измерений для каждого инжектируемого объема. Проверку градуировочных графиков следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 5 мл растворителя и оставляют на 30 минут при комнатной температуре и периодическом помешивании. Степень десорбции с фильтра - 97,5%.

50 мкл анализируемого раствора инжектируют в колонку хроматографа.

Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях, по отношению к тем же элюентам, что и при построении градуировочных графиков.

Количественное определение содержания 1-фенил-3-метил-5-пиразолона в хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Концентрацию 1-фенил-3-метил-5-пиразолона "С" в воздухе (мг/ куб. м) вычисляют по формуле:

где:

а - содержание 1-фенил-3-метил-5-пиразолона в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

б - объем пробы, взятой на хроматографирование, мл;

в - общий объем анализируемого раствора, мл;

V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Приведение объема воздуха к условиям по ГОСТ 12.1.016-79 (температура 20 °С, давление 760 мм рт. ст.) проводят по следующей формуле: