"МУК 4.1.846-99. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентраций 19-нортестостерона в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Минздравом России 31.12.1999)

Методические указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии "Научные основы гигиены труда и профпатологии". Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в декабре 1999 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 35) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Методические указания разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования".

Методики выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.687-98 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".

(Структурная формула не приводится)

М. м. 274,41

19-нортестостерон - белый с кремоватым оттенком кристаллический порошок с температурой плавления 119 - 123 °С. Не растворим в воде, растворим в бензоле, ацетоне, спирте.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

19-нортестостерон - малотоксичное соединение при внутрижелудочном введении. Оказывает выраженное анаболическое и слабое андрогенное действие. Проникает через кожу. 1 класс опасности.

ПДК в воздухе - 0,005 мг/куб. м.

Определение основано на применении высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения 19-нортестостерона в хроматографируемом объеме (20 мкл) - 0,008 мкг.

Нижний предел измерения вещества в воздухе - 0,0025 мг/куб. м (при отборе 80 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций вещества в воздухе от 0,0025 до 0,025 мг/куб. м.

Измерению не мешают метанол, бензол, эфир, ацетон, хлороформ.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 13%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, 1 час 40 мин.

Жидкостный хроматограф с УФ-детектором.

Хроматографическая колонка из нержавеющей стали длиной 0,25 м, с внутренним диаметром 8,2 мм, заполненная силикагелем "для хроматографии" (4,0 - 5,0 мкм), диаметр пор 6 - 60 нм.

Фильтродержатель.

Аспирационное устройство.

Колбы мерные вместимостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Пипетки вместимостью 1, 5, 10 мл, ГОСТ 23932-79.

Пробирки с пришлифованными пробками вместимостью 10 мл, ГОСТ 10515-75.

Стаканы химические вместимостью 50 мл, ГОСТ 10394-72.

Колбы грушевидные вместимостью 25 мл, ГОСТ 1770-74Е.

Вакуумная установка.

19-нортестостерон.

Спирт метиловый, х.ч., ГОСТ 6295-75.

Элюент: метиловый спирт дегазируют пропусканием гелия в течение 10 мин.

Стандартный раствор N 1 с концентрацией 500 мкг/мл 19-нортестостерона готовят растворением 0,050 г вещества в спирте метиловом в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение 10 дней.

Градуировочные растворы с концентрацией от 0,4 до 4,0 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 спиртом метиловым. Растворы устойчивы в течение суток.

Фильтры АФА-ВП-10, ТУ 85-743-80.

Воздух с объемным расходом 5 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-10, помещенный в фильтродержатель. Для измерения 0,5 ПДК следует отобрать 80 л воздуха. Срок хранения проб - в течение 12 суток.

Хроматографическая колонка промышленного изготовления.

Инжектируют в колонку хроматографа по 20 мкл градуировочных растворов 19-нортестостерона.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочную кривую, выражающую зависимость площади пиков (кв. мм) от содержания вещества в хроматографируемом объеме пробы (мкг).

Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя 5 параллельных измерений для каждой концентрации. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Фильтр с отобранной пробой помещают в бюкс, заливают 10 мл метанола. Отставляют на 30 мин., периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Экстракцию повторяют дважды. Степень десорбции вещества с фильтра составляет 98,7%. Экстракты объединяют и упаривают на роторном испарителе при температуре 70 °С до сухого остатка. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл метанола. Для анализа отбирают 0,3 мл раствора и с помощью шприца вводят в хроматограф 20 мкл раствора через инжекторное устройство.

Количественное определение содержания вещества в анализируемой пробе проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Концентрацию 19-нортестостерона в воздухе "С" (мг/куб. м) вычисляют по формуле:

где:

а - содержание вещества в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

В - общий объем раствора пробы, мл;

б - объем раствора пробы, взятый для хроматографирования, мл;

V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 760 мм рт. ст.) проводят по формуле: