"МУК 4.1.193-96. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентраций аллергена клещевины в воздухе рабочей зоны"
(утв. Госкомсанэпиднадзором России 08.06.1996)

1. Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (выпуск N 29) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

2. Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны утверждены и.о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместителем Главного государственного санитарного врача Российской Федерации 8 июня 1996 г.

3. Введены впервые.

4. Методические указания разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТа 12.1.005-88. ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования", ГОСТа 12.1.016-79. ССБТ "Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ" и ГОСТа Р 1.5-92, п. 7.3. Методические указания одобрены на совместном заседании группы Главного эксперта Федеральной комиссии по санитарно-гигиеническому нормированию "Лабораторно-инструментальное дело и метрологическое обеспечение" и методбюро п/секции "Промышленно-санитарная химия" Проблемной комиссии "Научные основы гигиены труда и профпатологии".

Ответственные исполнители: Г.А. Дьякова, С.И. Муравьева.

Исполнители: Г.А. Дьякова, Е.М. Малинина, С.М. Попова, Е.Н. Грицун.

Аллерген клещевины - прозрачная жидкость соломенного цвета. Содержание белкового азота в пределах 0,08 - 0,12 мг/куб. см.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Аллерген.

ПДК в воздухе рабочей зоны не установлена.

Определение аллергена клещевины основано на реакции пассивной гемагглютинации эритроцитов под действием аллергена клещевины.

Нижний предел измерения содержания аллергена клещевины в анализируемой пробе - 0,2 мкг.

Нижний предел измерения концентрации аллергена клещевины в воздухе - 0,001 мг/куб. м (при отборе 400 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций в воздухе - от 0,001 до 0,1 мг/куб. м.

Измерению не мешают: альдегиды, кетоны.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 25%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, - около 2 ч.

Воздух с объемным расходом 20 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-10, помещенный в фильтродержатель.

Для определения 0,001 мг/куб. м необходимо отобрать 400 л воздуха.

Срок хранения отобранных проб - 1 месяц.

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан и заливают 3 мл 0,9%-ного раствора хлористого натрия, оставляют на 10 - 15 мин., периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения, затем фильтр отжимают и удаляют.

Степень десорбции вещества с фильтра - 98%.

Полученный раствор сливают в коническую пробирку, затем центрифугируют в течение 3 мин. при 3000 об./мин.

В первые 24 лунки 1 и 2-го рядов планшета для иммунологических реакций вносят по 0,05 мл физиологического раствора. В первую лунку добавляют 0,05 мл эталонного раствора аллергена клещевины с концентрацией 0,1 мг/мл. Тщательно перемешивают автоматическим дозатором. Затем отбирают из этой лунки 0,05 мл раствора и переносят его в следующую лунку. Эту операцию повторяют до 24-й лунки. Из последней лунки отбирают 0,05 раствора и помещают в пробирку с 0,1 М раствором соляной кислоты для инактивации. Затем в каждую лунку добавляют по 0,05 мл 1%-ной суспензии опытных эритроцитов.

Во все лунки III - IV и V рядов вносят по 0,05 мл физиологического раствора.

В первую лунку III ряда вносят 0,05 мл исследуемой пробы, перемешивают дозатором, отбирают 0,05 мл и переносят во вторую лунку. Эту операцию повторяют до 36-й лунки.

Из последней лунки отбирают 0,05 мл раствора и помещают в пробирку с 0,1 М раствором соляной кислоты для инактивации. Затем во все лунки с исследуемой пробой добавляют по 0,05 мл 1%-ной суспензии опытных эритроцитов.

С первой по 24-ю лунку VI и VII рядов планшета вносят по 0,05 мл физиологического раствора.

Затем в первую лунку VI-го ряда вносят 0,05 мл экстракта пробы и проводят последовательное разведение аналогично разведению исследуемой пробы в III - VI и V рядах.

Затем во все лунки вносят по 0,05 мл 1%-ной суспензии контрольных эритроцитов, планшет встряхивают в горизонтальной плоскости на поверхности стола и термостатируют при температуре 37 °С в течение 40 - 60 мин. Затем проводят учет результатов.

Концентрацию аллергена клещевины определяют по номеру последней лунки в рядах I и II, в которой прошла гемагглютинация. Отмечают также лунки, в которых прошла гемагглютинация опытных эритроцитов экстрактом пробы в рядах с III по V и контрольных эритроцитов экстрактом пробы в рядах VI и VII.

При обнаружении гемагглютинации в рядах VI и VII значение, характеризующее номер последней лунки, в которой прошла гемагглютинация, вычисляют от значения, характеризующего номер лунки в рядах с III по V-й, в которой прошла гемагглютинация.

При отсутствии гемагглютинации в рядах VI и VII (что бывает при отсутствии в пробе рицина) операция корректировки номера лунки в рядах с III по V не производится.

В таблице, используя уточненное значение номера лунки в рядах с III по V-й, находят коэффициент разбавления экстракта пробы, вызвавшего гемагглютинацию опытных эритроцитов. Концентрацию аллергена клещевины в данной лунке рядов III - V принимают равной концентрации аллергена клещевины в последней лунке с положительной реакцией гемагглютинации в рядах I - II (по эталонному раствору аллергена клещевины).

Методические указания разработаны НИИ санитарии, гигиены и профзаболеваний и НИИ химии растительных веществ, г. Ташкент.