"МУК 4.1.630-96. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению о-нитроанилина в атмосферном воздухе методом тонкослойной хроматографии"
(утв. Госкомсанэпиднадзором России 31.10.1996)

Настоящие методические указания устанавливают методику количественного химического анализа атмосферного воздуха для определения в нем содержания о-нитроанилина в диапазоне концентраций 0,0033 - 0,033 мг/м3 методом тонкослойной хроматографии.

Мол. масса 138,13.

о-нитроанилин - кристаллическое вещество оранжевого цвета, температура плавления - 71,5 °C. Растворим в хлороформе, ацетоне, этиловом спирте, бензоле. Растворимость в воде - 0,126 г/100 см3 при 25 °C. В воздухе находится в виде аэрозоля и паров.

Поражает печень, сердечно-сосудистую и центральную нервную системы.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) - 0,006 мг/м3.

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей +/- 18%, при доверительной вероятности 0,95.

Измерения концентрации о-нитроанилина выполняют методом тонкослойной хроматографии с денситометрическим окончанием.

Концентрирование о-нитроанилина из воздуха осуществляют в сорбционные трубки. Десорбцию проводят водой, экстракцию о-нитроанилина - органическим растворителем.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 0,1 мкг.

Определению не мешают: анилин, м- и п-нитроанилины, нитробензол, галоидзамещенные анилины.

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства и реактивы.

4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТу 12.1.005-88.

4.2. При работе с электроаспиратором следует соблюдать правила электробезопасности в соответствии с ГОСТом 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

К выполнению измерений допускают лиц, имеющих квалификацию не ниже ст. лаборанта, с опытом работы в тонкослойной хроматографии.

Процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях согласно ГОСТу 15150-69 при температуре воздуха (20 +/- 10) °C, атмосферном давлении 630 - 800 мм рт. ст. и влажности воздуха не более 80%.

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовка сорбционных трубок, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

Исходный раствор о-анилина для градуировки (c = 1 мг/см3). 50 мг о-нитроанилина вносят в колбу вместимостью 50 см3, доводят объем до метки водой и тщательно перемешивают. Раствор устойчив при хранении в холодильнике в течение месяца.

Рабочий раствор о-нитроанилина для градуировки (c = 0,01 мг/см3). 1 см3 исходного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3, доводят объем до метки водой и тщательно перемешивают. Раствор устойчив в течение месяца при хранении в холодильнике.

Сорбционный раствор. К 40 см3 дистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 100 см3 добавляют 2,7 см3 концентрированной серной кислоты, перемешивают, добавляют 20 см3 глицерина и доводят до метки водой. Раствор устойчив в течение длительного времени.

Подвижная фаза для хроматографии. Смесь бензола и этанола в объемном соотношении 20:1.

Проявляющий реагент N 1 (диазотирующий). В смесь 46 см3 дистиллированной воды и 4 см3 концентрированной соляной кислоты вносят 1 г нитрата натрия. Раствор готовят перед употреблением.

Проявляющий реагент N 2 (азосочетающий). 2,8 г гидроксида калия растворяют в 50 см3 воды, затем добавляют 0,1 г 1-нафтола и тщательно перемешивают. Раствор устойчив в течение длительного времени.

Гидроксида калия 50% раствор. 50 г гидроксида калия растворяют в 50 см3 дистиллированной воды. Раствор устойчив в течение длительного времени.

Сорбционный раствор при помощи резиновой груши засасывают в сорбционную трубку таким образом, чтобы полностью смочить стеклянную крошку. Затем грушей выдувают избыток сорбционного раствора. Трубки пригодны к эксплуатации в течение длительного времени.

Градуировочную характеристику устанавливают на градуировочных растворах о-нитроанилина. Она выражает зависимость интенсивности окраски пятна на хроматограмме от содержания о-нитроанилина в пятне и устанавливается по 3-м сериям растворов для градуировки. Каждую серию, состоящую из 6-ти растворов, готовят в мерных колбах вместимостью 100 см3. Для этого в каждую колбу вносят рабочий раствор для градуировки в соответствии с табл. 1, доводят до метки водой и тщательно перемешивают.

10 см3 каждого градуировочного раствора помещают в стакан, добавляют раствор гидроксида калия до pH 8 - 9, хлорид натрия до насыщения, затем раствор переносят в делительную воронку. Экстракцию проводят хлороформом, 3 раза порциями по 5 см3, встряхивая по 5 мин. Экстракт отделяют от водной фазы, пропускают через слой безводного сульфата натрия, помещают в градуированную конусообразную пробирку и испаряют хлороформ до объема 5 см3.

На хроматографической пластине на расстоянии 15 мм от края намечают линию старта. 0,5 см3 каждого раствора наносят на линию старта в виде отдельных пятен диаметром не более 10 мм по обеим сторонам от центра линии старта (этот участок оставляют для нанесения раствора пробы) на расстоянии 15 мм друг от друга. Содержание о-нитроанилина в пятнах градуировочной шкалы указано в таблице. Хроматографический анализ шкалы стандартов проводят одномоментно с анализом пробы в условиях, изложенных в п. 8.

Отбор проб проводят согласно ГОСТу 17.2.3.01-86.

Воздух со скоростью 10 дм3/мин аспирируют в течение 30 мин через сорбционную трубку, заполненную сорбционным раствором. Пробу можно хранить не более 3-х суток.

После отбора пробы через сорбционную трубку пропускают 10 см3 воды, засасывая и выдувая воду в стаканчик несколько раз резиновой грушей. В смыв добавляют 50% раствор гидроксида калия до pH 8 - 9, хлорид натрия до насыщения, затем раствор переносят в делительную воронку. Обработку пробы проводят аналогично п. 7.3, далее 0,5 см3 полученного экстракта с помощью микрошприца или микропипетки наносят в центр линии старта хроматографической пластинки с градуировочной шкалой.

В хроматографическую камеру вносят подвижную фазу (высота слоя 0,5 см), через 30 мин в нее помещают хроматографическую пластину и развивают хроматограмму на высоту 10 см. Затем пластину вынимают из камеры, подсушивают на воздухе, обрабатывают из пульверизатора сначала проявляющим реагентом N 1 и после подсушивания - реагентом N 2. о-нитроанилин обнаруживается в виде розовых пятен с Rf = 0,72 на светлом фоне.

Количество о-нитроанилина в пятне пробы находят с помощью денситометра любого типа (БИАН, ХРОМОСКАН и др.) по отношению интегральных значений содержания вещества в пятнах пробы и градуировочной шкалы.

Концентрацию о-нитроанилина в атмосферном воздухе (мг/м3) вычисляют по формуле:

m - количество о-нитроанилина в пробе, найденное по градуировочной шкале, мкг;

- общий объем раствора пробы, см3;

- объем анализируемого раствора пробы, см3;

- объем отобранного воздуха, приведенный к нормальным условиям, дм3;

- объем воздуха, отобранный для анализа, дм3;

P - атмосферное давление в месте отбора пробы, мм рт. ст.;

t - температура воздуха в месте отбора пробы, °C.

Методические указания разработаны И.И. Пиленковой, А.Д. Фатьяновой (ВНИ технологический институт гербицидов и регуляторов роста растений, г. Уфа).