"МУК 4.1.4010-24. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методика измерений массовой концентрации 2-[[4-(1,1-диметилэтил)-2,6-диметилфенил]метил]-4,5-дигидро-1H-имидазола гидрохлорида (ксилометазолина гидрохлорид) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 19.02.2024)

1. Разработаны АО "ВНЦ БАВ" (Голубева М.И., Крымова Л.И., Федорова Э.А., Яни С.П.); АО "Нижфарм" (Каменская Н.В., Удалова Ю.Р.).

2. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 19 февраля 2024 г.

3. Введены впервые.

1.1. Настоящие методические указания (далее - МУК) описывают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для измерений массовой концентрации ксилометазолина гидрохлорида в воздухе рабочей зоны в диапазоне массовых концентраций 0,05 - 0,5 мг/м³.

1.2. МУК носят рекомендательный характер.

2.1. Физико-химические свойства ксилометазолина гидрохлорида.

Эмпирическая формула: C₁₆H₂₄N₂·HCl.

Молекулярная масса: 280,84.

Регистрационный номер CAS: 1218-35-5.

Ксилометазолина гидрохлорид белый или почти белый кристаллический порошок без запаха с температурой плавления плюс 317 - 329 °C, легко растворим в воде, в этаноле и метаноле, трудно растворим в диметилсульфоксиде.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.2. Токсикологическая характеристика ксилометазолина гидрохлорида:

относится к лекарственным средствам, действующим на периферические, преимущественно нейромедиаторные адренергические процессы, входит в группу местных сосудосуживающих средств (деконгестантов) с действием; по строению и действию близок к нафазолину (нафтизин);

высокоопасное вещество при поступлении внутрь, выявлено чрезвычайно выраженное местное раздражающее и выраженное кожно-резорбтивное действие, обладает слабо выраженной кумулятивной активностью и общетоксическим действием.

3.1. При соблюдении условий проведения анализа <1> и методики, изложенной в настоящих МУК, при выполнении измерений массовой концентрации ксилометазолина гидрохлорида метрологические характеристики не превышают значений, представленных в таблице 3.1 (при доверительной вероятности P = 0,95).

--------------------------------

<1> ГОСТ Р ИСО 5725-1 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-2 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-3 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-4 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-5 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-6 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст (далее - ГОСТ Р ИСО 5725-(1 - 6).

4.1. Измерение массовой концентрации ксилометазолина гидрохлорида выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с ультрафиолетовым (далее - УФ) детектированием. Метод основан на разделении ксилометазолина гидрохлорида и других компонентов анализируемой смеси на хроматографической колонке, заполненной сорбентом с последующей регистрацией ксилометазолина гидрохлорида с помощью УФ детектора. Сигнал детектора прямо пропорционален концентрации ксилометазолина гидрохлорида в анализируемой пробе.

Измерение проводят при длине волны 220 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на аналитические аэрозольные фильтры.

Минимально определяемое содержание ксилометазолина гидрохлорида в анализируемом объеме пробы - 0,1 мкг.

Нижний предел измерений массовой концентрации ксилометазолина гидрохлорида в воздухе - 0,05 мг/м³ (при отборе 1000 дм³ воздуха).

Метод специфичен в условиях приготовления препаративных форм на основе ксилометазолина гидрохлорида. Измерению не мешает: калия дигидрофосфат.

5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы, приведенные в таблицах 5.1 - 5.3.

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами в соответствии с ГОСТ 12.1.007, ГОСТ 12.1.005.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ соблюдают требования противопожарной безопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004. Содержание вредных веществ в воздухе не превышает гигиенических нормативов <2>.

--------------------------------

<2> Таблицы 2.1, 2.2 СанПиН 1.2.3685-21 "Гигиенические нормативы и требования к обеспечению безопасности и (или) безвредности для человека факторов среды обитания", утвержденные постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 28.01.2021 N 2 (зарегистрировано Минюстом России 29.01.2021, регистрационный N 62296), с изменениями, внесенными постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 30.12.2022 N 24 (зарегистрировано Минюстом России 09.03.2023, регистрационный N 72558).

6.3. При выполнении измерений с использованием спектрофотометра соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на спектрофотометр.

6.4. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения в соответствии с ГОСТ 12.4.009. Организуется обучение работников безопасности труда.

7.1. Измерения в соответствии с методикой, изложенной в настоящих МУК, может выполнять специалист, имеющий опыт работы на жидкостном хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.

8.1. Условия приготовления растворов и подготовки проб к анализу:

температура воздуха плюс (20 +/- 5) °C;

атмосферное давление (84 - 106) кПа;

относительная влажность воздуха не более 80%.

8.2. Выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9.1. Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовка жидкостного хроматографа, установление градуировочной характеристики, отбор проб воздуха.

9.2. Приготовление растворов

9.2.1. Приготовление основного раствора ксилометазолина гидрохлорида: основной раствор ксилометазолина гидрохлорида с массовой концентрацией 1000 мкг/см³ готовят растворением 0,1000 +/- 0,0002 г ксилометазолина гидрохлорида в воде особо чистой в мерной колбе вместимостью 100 см³. Срок хранения раствора - в течение двух недель при температуре от плюс 2 до плюс 8 °C в холодильнике.

9.2.2. Приготовление рабочего раствора ксилометазолина гидрохлорида: рабочий раствор ксилометазолина гидрохлорида с массовой концентрацией 250 мкг/см³ готовят разбавлением 12,5 см³ основного раствора ксилометазолина гидрохлорида водой особо чистой в мерной колбе вместимостью 50 см³. Срок хранения раствора в течение недели при температуре от плюс 2 до плюс 8 °C в холодильнике.

9.2.3. Приготовление подвижной фазы А (ПФ А): раствор калия фосфорнокислого однозамещенного в воде особо чистой с концентрацией 1,36 г/дм³, доведенный до pH 3,0 с помощью фосфорной кислоты концентрированной: 1,36 г калия фосфорнокислого однозамещенного растворяют в 950 см³ воды особо чистой в мерной колбе вместимостью 1000 см³, доводят pH раствора фосфорной кислотой концентрированной до значения pH 3,0 (потенциометрически). Объем раствора в колбе доводят водой особо чистой до метки и перемешивают. Перед использованием подвижную фазу фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор не менее 0,45 мкм, дегазируют (вакуумная дегазация). Срок хранения раствора составляет 1 месяц в хорошо укупоренной таре, в холодильнике.

9.2.4. Приготовление подвижной фазы Б (далее - ПФ Б): ацетонитрил: ацетонитрил перед использованием фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор не менее 0,45 мкм, дегазируют (вакуумная дегазация). Срок хранения раствора составляет 1 месяц в хорошо укупоренной таре, в холодильнике.

9.3. Подготовка хроматографа

9.3.1. Подготовку хроматографа проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.4. Установление градуировочной характеристики

9.4.1. Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пиков (приборные единицы) от содержания ксилометазолина гидрохлорида в анализируемом объеме градуировочных растворов, устанавливают методом абсолютной градуировки по шести сериям измерений по шести концентрациям вещества в каждой серии и контрольного раствора N 0 согласно таблице 9.1.

На аэрозольные фильтры, помещенные в стаканчики для взвешивания, пипеткой вместимостью 1 см³ наносят основной раствор ксилометазолина гидрохлорида с массовой концентрацией 1000 мкг/см³ и рабочий раствор ксилометазолина гидрохлорида с массовой концентрацией 250 мкг/см³ в соответствии с таблицей 9.1. Фильтры подсушивают при комнатной температуре, затем, используя пипетку вместимостью 5,0 см³, приливают по 5,0 см³ воды особо чистой и оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтры тщательно отжимают, растворы сливают в мерные пробирки с пришлифованными пробками вместимостью 10 см³. Фильтры повторно обрабатывают 5,0 см³ водой особо чистой и оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой, затем фильтры снова тщательно отжимают и удаляют. Растворы сливают в те же мерные пробирки вместимостью 10 см³, объем в пробирках доводят до 10,0 см³ водой особо чистой. Далее растворы фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм в хроматографические виалы. Аналогично обрабатывается чистый аналитический аэрозольный фильтр (контрольный раствор).

Инжектируют в хроматограф по 0,02 см³ каждого из градуировочных растворов.

По полученным данным строят градуировочную характеристику зависимости площади пика (приборные единицы) от содержания ксилометазолина гидрохлорида в анализируемом объеме градуировочных растворов (мкг).

9.5. Условия хроматографирования (таблица 9.2)

9.6. Градиентная программа (таблица 9.3)

9.7. Контроль стабильности градуировочной характеристики

9.7.1. Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят не реже 1 раза в три месяца, а также при смене реактивов или изменении условий анализа (после ремонта и поверки прибора). Один раз в год градуировочную характеристику устанавливают заново.

Для контроля стабильности в качестве образцов используют вновь приготовленные градуировочные растворы с массовыми концентрациями исследуемого вещества по п. 9.4.1 (соответствующие началу, середине и концу диапазона измерений) и анализируют в точном соответствии с методикой.

Градуировочную характеристику считают стабильной, если для каждого контрольного образца выполняется условие (1):

где: S_изм, S_гр - значение площади пика (приборные единицы) ксилометазолина гидрохлорида в образце для контроля, измеренное и найденное по градуировочной характеристике соответственно;

К_гр - норматив контроля, который определяется по формуле (2):

где: U, % - значение относительной расширенной неопределенности при коэффициенте охвата к = 2, (таблица 3.1).

Если условие стабильности не выполняется только для одного образца, то выполняют повторное хроматографирование этого образца с целью исключения результата, содержащего грубую ошибку.

Если градуировочная характеристика не стабильна и (условие (1) не выполняется для двух или более образцов градуировочных растворов), выясняют причины нестабильности и повторяют контроль стабильности с использованием других образцов (таблица 9.1) для установления градуировочной характеристики, предусмотренных методикой.

При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики ее устанавливают заново.

9.8. Отбор проб воздуха

9.8.1 Отбор проб проводят в соответствии с методическими документами <3>.

--------------------------------

<3> ГОСТ 12.1.005 "Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны", утвержденный и введенный в действие постановлением Госстандарта СССР от 29.09.1988 N 3388; приложение 9 к Р 2.2.2006 "Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда", утвержденное Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 29.07.2005.

Отбор проб должен проводиться в зоне дыхания при характерных производственных условиях. Одновременно отбирают две пробы. При отборе проб регистрируют температуру воздуха и атмосферное давление.

Воздух аспирируют через аналитический аэрозольный фильтр с площадью рабочей поверхности 20 см², помещенный в фильтродержатель, снабженный металлической сеткой. Для определения массовой концентрации ксилометазолина гидрохлорида на уровне 0,05 мг/м³ (1/2 ориентировочного безопасного уровня воздействия (ОБУВ) отбирают не менее 1000 дм³ воздуха. Срок хранения отобранных проб в стаканчиках для взвешивания трое суток в холодильнике при температуре от плюс 2 до плюс 8 °C.

10.1. Аэрозольный фильтр с отобранной пробой помещают в стаканчик для взвешивания и пипеткой вместимостью 5 см³ приливают 5,0 см³ воды особо чистой, помешивая при этом стеклянной палочкой в течение 15 мин для лучшего растворения вещества. Затем аэрозольный фильтр тщательно отжимают, раствор сливают в мерную пробирку с пришлифованной пробкой вместимостью 10 см³.

Аэрозольный фильтр повторно обрабатывают 5,0 см³ воды особо чистой и оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой, затем тщательно отжимают и удаляют. Раствор сливают в ту же мерную пробирку, объем раствора доводят до 10 см³ водой особо чистой. Далее раствор фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 45 мм в хроматографическую виалу.

Хроматографический анализ проб выполняют в тех же условиях, что и хроматографирование градуировочных растворов.

Регистрируют не менее двух хроматограмм для каждой анализируемой пробы, соблюдая все условия, требуемые для градуировки хроматографической системы.

Устанавливают содержание ксилометазолина гидрохлорида (а в мкг) в анализируемом объеме пробы по градуировочной характеристике (п. 9.4.1).

11.1. Массовую концентрацию ксилометазолина гидрохлорида в воздухе рабочей зоны C, мг/м³, вычисляют по формуле (3):

где: а - содержание вещества в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочной характеристике, мкг;

B - общий объем раствора пробы, см³;

б - анализируемый объем раствора пробы, см³;

V₂₀ - объем воздуха, отобранный для анализа, приведенный к условиям в соответствии с методическими документами <4> при температуре плюс 293 К (20 °C) и атмосферном давлении 101,3 кПа (760 мм рт. ст.), дм³ (приложение 1, 2 к настоящим МУК).

--------------------------------

<4> ГОСТ 8.395 "Нормальные условия измерений при поверке. Общие требования", введенный в действие постановлением Госстандарта СССР от 28.07.1980 N 3853.

За результат измерений принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, если выполняется условие приемлемости (4):

где: C₁, C₂ - результаты параллельных определений массовой концентрации ксилометазолина гидрохлорида в воздухе, мг/м³;

r - значение предела повторяемости, % (таблица 3.1).

Если условие (4) не выполняется, выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и повторяют выполнение измерений в соответствии с методикой измерений.

12.1. Результат количественного химического анализа представляют в виде формулы (5):

где: - среднее арифметическое значение результатов n определений, признанных приемлемыми, мг/м³;

U, % - относительная расширенная неопределенность измерений при коэффициенте охвата к = 2 (таблица 3.1).

Если полученный результат измерений ниже нижней (выше верхней) границы диапазона измерений, то производят следующую запись в журнале: "массовая концентрация ксилометазолина гидрохлорида менее 0,05 мг/м³ (более 0,5 мг/м³)".

13.1 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.

Проверку приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости проводят:

при возникновении спорных ситуаций между двумя лабораториями;

при проверке совместимости результатов измерений, полученных при сравнительных испытаниях (при проведении аккредитации лабораторий и инспекционного контроля).

Для проведения проверки приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости каждая лаборатория использует пробы, оставленные на хранение.

Приемлемость результатов измерений, полученных в двух лабораториях, оценивают сравнением разности этих результатов с критической разностью CD_0,95 по формуле (6):

где: C_ср1, C_ср2 - средние значения массовой концентрации ксилометазолина гидрохлорида, полученные в первой и второй лабораториях, мг/м³;

CD_0,95 - значение критической разности, % (таблица 3.1).

Если критическая разность не превышена, то приемлемы оба результата измерений, проводимых двумя лабораториями, и в качестве окончательного результата используют их среднеарифметическое значение.

Если критическая разность превышена, то выполняют процедуры, предусмотренные методическими документами <5>.

--------------------------------

<5> Пункт 5.3.3 ГОСТ Р ИСО 5725-6.

При разногласиях руководствуются методическими документами <6>.

--------------------------------

<6> Пункт 5.3.4 ГОСТ Р ИСО 5725-6.

13.2. Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории

13.2.1. Контроль качества результатов измерений в лаборатории при реализации методики осуществляют в соответствии с методическими документами <7>, используя контроль стабильности среднеквадратического (стандартного) отклонения повторяемости <8> и показателя правильности <9>.

--------------------------------

<7> ГОСТ Р ИСО 5725-6.

<8> Пункт 6.2.2 ГОСТ Р ИСО 5725-6.

<9> Пункт 6.2.4 ГОСТ Р ИСО 5725-6.

Рекомендуется устанавливать контролируемый период так, чтобы количество результатов контрольных измерений было от 20 до 30.

При неудовлетворительных результатах контроля, например, при превышении предела действия или регулярном превышении предела предупреждения, выясняют причины этих отклонений, в том числе проводят смену реактивов, проверяют работу оператора.

1.1. Приведение объема воздуха к стандартным условиям при температуре плюс 293 К (20 °C) и атмосферном давлении 101,33 кПа (760 мм рт. ст.) по формуле (7):

где: V_t - объем воздуха, отобранный для анализа, дм³;

P - барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);

t - температура воздуха в месте отбора пробы, °C.

Для удобства расчета V₂₀ используется таблица коэффициентов (приложение 2 к настоящим МУК). Для приведения воздуха к стандартным условиям умножают V_t на соответствующий коэффициент.

1. Федеральный закон от 30.03.1999 N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения".

2. СанПиН 1.2.3685-21 "Гигиенические нормативы и требования к обеспечению безопасности и (или) безвредности для человека факторов среды обитания".

3. Р 2.2.2006 "Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда".

4. ГОСТ 12.1.005 "Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".

5. ГОСТ Р ИСО 5725-(1 - 6) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

6. ГОСТ 8.395 "Нормальные условия измерений при поверке. Общие требования".

7. ГОСТ OIML R 76-1-2011 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".

8. ГОСТ 12.1.007 "Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".

9. ГОСТ 12.1.019 "Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".

10. ГОСТ 12.1.004 "Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования".

11. ГОСТ 12.4.009 "Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание".

12. ГОСТ 1770 "Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия".

13. ГОСТ 29227 "Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования".

14. ГОСТ Р 58144 "Вода дистиллированная. Технические условия".

15. ГОСТ 25336 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".