"МУК 4.1.4004-24. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методика измерений массовой концентрации 2-[[6-[(3R)-3-амино-1-пиперидинил)]-3,4-дигидро-3-метил-2,4-диоксо-1(2H)-пиримидинил]метил] бензонитрила монобензоата (алоглиптина бензоат) в воздухе рабочей зоны методом спектрофотометрии. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 19.02.2024)

1. Разработаны АО "ВНЦ БАВ" (М.И. Голубева, Л.И. Крымова, Э.А. Федорова); ООО "НТФ "Хромос" (С.С. Налимова).

2. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 19 февраля 2024 г.

3. Введены впервые.

1.1. Настоящие методические указания (далее - МУК) описывают порядок применения спектрофотометрического метода для измерений массовой концентрации алоглиптина бензоата в воздухе рабочей зоны в диапазоне 0,05 - 0,25 мг/м³.

1.2. МУК носят рекомендательный характер.

2.1. Физико-химические свойства алоглиптина бензоата.

Эмпирическая формула: C₁₈H₂₁N₅O₂·C₇H₆O₂.

Молекулярная масса: 461,51.

Регистрационный номер CAS: 850649-62-6.

Алоглиптина бензоат - белый кристаллический порошок с температурой плавления плюс 182,5 °C, негигроскопичен, растворим в диметилсульфоксиде, мало растворим в спирте, воде (19,2 мг/см³), метаноле, хлороформе, тетрагидрофуране, изонитриле, изопропиловом спирте, очень мало растворим в октаноле и изопропилацетате, практически нерастворим в диэтиловом эфире и толуоле.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.2. Токсикологическая характеристика алоглиптина бензоата:

- представитель пероральных противодиабетических препаратов группы глиптинов;

- оказывает выраженное местное раздражающее действие на слизистые оболочки глаз, верхних дыхательных путей и легких, обладает слабой кумулятивной активностью и общетоксическим действием.

3.1. При соблюдении условий проведения анализа <1> и методики, изложенной в настоящих МУК, при выполнении измерений массовой концентрации алоглиптина бензоата метрологические характеристики не превышают значений, представленных в табл. 3.1.

--------------------------------

<1> ГОСТ Р ИСО 5725-1 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-2 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-3 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-4 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-5 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-6 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст (далее ГОСТ Р ИСО 5725-(1 - 6).

4.1. Измерение массовой концентрации алоглиптина бензоата выполняют методом спектрофотометрии с ультрафиолетовым (далее - УФ) детектированием. Метод основан на способности растворов алоглиптина бензоата в воде поглощать УФ-излучение и измерении относительной оптической плотности полученных растворов.

Измерение проводят при длине волны 278 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на аналитические аэрозольные фильтры.

Минимально определяемое содержание алоглиптина бензоата в анализируемом объеме пробы - 60 мкг.

Нижний предел измерений массовой концентрации алоглиптина бензоата в воздухе - 0,05 мг/м³ (при отборе 1200 дм³ воздуха).

Метод специфичен в условиях приготовления препаративных форм на основе алоглиптина бензоата. Измерению не мешают: маннитол, целлюлоза микрокристаллическая, гидроксипропилцеллюлоза, кроскармеллоза натрия, магния стеарат.

5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы, приведенные в табл. 5.1 - 5.3.

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами в соответствии с ГОСТ 12.1.007, ГОСТ 12.1.005.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ соблюдают требования противопожарной безопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004. Содержание вредных веществ в воздухе не превышает гигиенических нормативов <2>.

--------------------------------

<2> Таблицы 2.1, 2.2 СанПиН 1.2.3685-21 "Гигиенические нормативы и требования к обеспечению безопасности и (или) безвредности для человека факторов среды обитания", утвержденные постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 28.01.2021 N 2 (зарегистрировано Минюстом России 29.01.2021, регистрационный N 62296), с изменениями, внесенными постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 30.12.2022 N 24 (зарегистрировано Минюстом России 09.03.2023, регистрационный N 72558).

6.3. При выполнении измерений с использованием спектрофотометра соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на спектрофотометр.

6.4. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения в соответствии с ГОСТ 12.4.009. Организуется обучение работников безопасности труда.

7.1. Измерения в соответствии с методикой, изложенной в настоящих МУК, может выполнять специалист, имеющий опыт работы на спектрофотометре, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.

8.1. Условия приготовления растворов и подготовки проб к анализу:

температура воздуха плюс (20 +/- 5) °C;

- атмосферное давление 84 - 106 кПа;

- относительная влажность воздуха, не более 80%.

8.2. Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9.1. Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовка спектрофотометра, установление градуировочной характеристики, отбор проб воздуха.

9.2. Приготовление растворов.

9.2.1. Приготовление основного раствора алоглиптина бензоата: основной раствор алоглиптина бензоата с массовой концентрацией 1000 мкг/см³ готовят растворением (0,1000 +/- 0,0002) г алоглиптина бензоата в воде дистиллированной в мерной колбе вместимостью 100 см³. Срок хранения раствора трое суток в темном месте при температуре плюс 5 °C.

9.2.2. Приготовление рабочего раствора алоглиптина бензоата: рабочий раствор алоглиптина бензоата с массовой концентрацией 200 мкг/см³ готовят разбавлением 10,0 см³ основного раствора алоглиптина бензоата водой дистиллированной в мерной колбе вместимостью 50 см³. Срок хранения раствора трое суток в темном месте при температуре плюс 5 °C.

9.3. Подготовка спектрофотометра.

9.3.1. Подготовку спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.4. Установление градуировочной характеристики.

9.4.1. Градуировочную характеристику, выражающую зависимость относительной оптической плотности раствора от содержания алоглиптина бензоата в анализируемом объеме градуировочных растворов, устанавливают по шести сериям измерений по шести концентрациям вещества в каждой серии и контрольного раствора N 0 согласно табл. 9.1.

На аэрозольные фильтры, помещенные в бюксы, пипеткой вместимостью 1 см³ наносят основной раствор алоглиптина бензоата с массовой концентрацией 1000 мкг/см³ и рабочий раствор алоглиптина бензоата с массовой концентрацией 200 мкг/см³ в соответствии с табл. 9.1. Фильтры подсушивают при комнатной температуре и пипеткой вместимостью 5,0 см³, приливают по 5,0 см³ воды дистиллированной и оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтры тщательно отжимают, растворы сливают в мерные пробирки с пришлифованными пробками вместимостью 10 см³. Фильтры повторно обрабатывают 5,0 см³ воды дистиллированной и оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой, затем фильтры тщательно отжимают и удаляют. Растворы сливают в те же пробирки и доводят объем до 10,0 см³ водой дистиллированной. Аналогично обрабатывают чистый аналитический аэрозольный фильтр (контрольный раствор N 0, табл. 9.1).

Относительную оптическую плотность градуировочных растворов измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 278 нм по отношению к контрольному раствору, не содержащему алоглиптина бензоат (табл. 9.1, раствор N 0).

По полученным данным строят градуировочную характеристику: на ось ординат наносят средние значения относительных оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им величины содержания алоглиптина бензоата в мкг.

9.5. Контроль стабильности градуировочной характеристики.

9.5.1. Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят не реже 1 раза в три месяца, а также при смене реактивов или изменении условий анализа (после ремонта и поверки прибора). Один раз в год градуировочную характеристику устанавливают заново.

Для контроля стабильности в качестве образцов используют вновь приготовленные градуировочные растворы с массовыми концентрациями алоглиптина бензоата (п. 9.4.1). соответствующими верхней, нижней границе и середине диапазона измерений, которые анализируют в соответствии с методикой.

Градуировочную характеристику считают стабильной, если для каждого контрольного образца выполняется условие (1):

где: D_изм, D_гр - значение относительной оптической плотности образца для контроля, измеренное и найденное по градуировочной характеристике;

K_гр - норматив контроля, который определяется по формуле (2):

где: U, % - значение относительной расширенной неопределенности при коэффициенте охвата к = 2 (табл. 3.1).

Если условие стабильности не выполняется только для одного образца, то выполняют повторное измерение относительной оптической плотности этого образца с целью исключения результата, содержащего грубую ошибку.

Если градуировочная характеристика не стабильна, (условие (1) не выполняется для двух или более образцов градуировочных растворов) выясняют причины нестабильности и повторяют контроль стабильности с использованием других образцов (табл. 9.1) для установления градуировочной характеристики, предусмотренных методикой.

При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики ее устанавливают заново.

9.6. Отбор проб воздуха.

9.6.1. Отбор проб проводят в соответствии с методическими документами <3>.

--------------------------------

<3> ГОСТ 12.1.005 "Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны", утвержденный и введенный в действие постановлением Госстандарта СССР от 29.09.1988 N 3388; приложение 9 к Р 2.2.2006-05 "Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда", утвержденное Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 29.07.2005.

Одновременно отбирают две пробы. При отборе проб фиксируется температура воздуха и атмосферное давление.

Воздух аспирируют через аналитический аэрозольный фильтр с площадью рабочей поверхности 20 см², помещенный в фильтродержатель, снабженный металлической сеткой. Для определения массовой концентрации алоглиптина бензоата на уровне 0,05 мг/м³ (1/2 ориентировочного безопасного уровня воздействия (ОБУВ) отбирают не менее 1200 дм³ воздуха в течение 15 мин. Срок хранения отобранных проб в бюксах - в течение недели при температуре от плюс 2 до плюс 8 °C.

10.1. Аэрозольный фильтр с отобранной пробой помещают в бюкс, пипеткой вместимостью 5 см³ приливают 5,0 см³ воды дистиллированной, помешивая при этом стеклянной палочкой в течение 15 мин для лучшего растворения вещества. Затем аэрозольный фильтр тщательно отжимают, раствор сливают в мерную пробирку с пришлифованной пробкой вместимостью 10 см³ через воронку с бумажным фильтром.

Аэрозольный фильтр повторно обрабатывают 5,0 см³ воды дистиллированной и оставляют на 15 мин, помешивая стеклянной палочкой, фильтр снова тщательно отжимают и удаляют. Раствор сливают через тот же бумажный фильтр в ту же мерную пробирку вместимостью 10 см³, объединяя растворы. Доводят объем раствора в пробирке до метки водой дистиллированной и перемешивают.

Относительную оптическую плотность анализируемой пробы измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 278 нм по отношению к контрольному раствору, полученному при обработке чистого аэрозольного фильтра.

Устанавливают содержание алоглиптина бензоата (a в мкг) в анализируемом объеме пробы по градуировочной характеристике (п. 9.4.1).

Примечание: Фильтрование проб проводят для удаления нерастворимых в воде дистиллированной вспомогательных веществ, входящих в состав препаративных форм алоглиптина бензоата.

11.1. Массовую концентрацию алоглиптина бензоата в воздухе рабочей зоны C, мг/м³, вычисляют по формуле (3):

где: a - содержание вещества в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочной характеристике, мкг;

V₂₀ - объем воздуха, отобранный для анализа, приведенный к условиям в соответствии с методическими документами при температуре плюс 293 К (20 °C) и атмосферном давлении 101,3 кПа (760 мм рт. ст.), дм³ (приложение 1, 2 к настоящим МУК).

За результат измерений принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, если выполняется условие приемлемости (4):

где: C₁, C₂ - результаты параллельных определений массовой концентрации алоглиптина бензоата в воздухе, мг/м³;

r - значение предела повторяемости, % (табл. 3.1).

Если условие (4) не выполняется, выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и повторяют выполнение измерений в соответствии с методикой измерений.

12.1. Результат количественного химического анализа представляют в виде формулы (5):

где: - среднее арифметическое значение результатов n определений, признанных приемлемыми, мг/м³;

U, % - относительная расширенная неопределенность измерений при коэффициенте охвата к = 2 (табл. 3.1).

Если полученный результат измерений ниже нижней (выше верхней) границы диапазона измерений, то производят следующую запись в журнале: "массовая концентрация алоглиптина бензоата менее 0,05 мг/м³ (более 0,25 мг/м³)".

13.1. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.

Проверку приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости проводят:

- при возникновении спорных ситуаций между двумя лабораториями;

- при проверке совместимости результатов измерений, полученных при сравнительных испытаниях (при проведении аккредитации лабораторий и инспекционного контроля).

Для проведения проверки приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости каждая лаборатория использует пробы, оставленные на хранение.

Приемлемость результатов измерений, полученных в двух лабораториях оценивают сравнением разности этих результатов с критической разностью CD_0,95 по формуле (6):

где C_ср1, C_ср2 - средние значения массовой концентрации алоглиптина бензоата, полученные в первой и второй лабораториях, мг/м³;

CD_0,95 - значение критической разности, % (табл. 3.1).

Если критическая разность не превышена, то приемлемы оба результата измерений, проводимых двумя лабораториями, и в качестве окончательного результата используют их среднеарифметическое значение. Если критическая разность превышена, то выполняют процедуры, предусмотренные методическими документами <5>.

--------------------------------

<5> Пункт 5.3.3 ГОСТ Р ИСО 5725-6.

При разногласиях руководствуются методическими документами <6>.

--------------------------------

<6> Пункт 5.3.4 ГОСТ Р ИСО 5725-6.

13.2. Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории.

13.2.1. Контроль качества результатов измерений в лаборатории при реализации методики осуществляют в соответствии с методическими документами <7>, используя контроль стабильности среднеквадратического (стандартного) отклонения повторяемости <8> и показателя правильности <9> аналитической стадии методики. Образцы для контроля показателя правильности готовят путем нанесения на аэрозольный фильтр выбранного контрольного раствора, операции аналогичны п. 9.4.1.

--------------------------------

<7> ГОСТ Р ИСО 5725-6.

<8> Пункт 6.2.2 ГОСТ Р ИСО 5725-6.

<9> Пункт 6.2.4 ГОСТ Р ИСО 5725-6.

Рекомендуется устанавливать контролируемый период так, чтобы количество результатов контрольных измерений было от 20 до 30.

При неудовлетворительных результатах контроля, например, при превышении предела действия или регулярном превышении предела предупреждения, выясняют причины этих отклонений, в том числе проводят смену реактивов, проверяют работу оператора.

1.1. Приведение объема воздуха к стандартным условиям при температуре плюс 293 К (20 °C) и атмосферном давлении 101,33 кПа (760 мм рт. ст.) по формуле (7):

где: V_t - объем воздуха, отобранный для анализа, дм³;

P - барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);

t - температура воздуха в месте отбора пробы, °C.

Для удобства расчета V₂₀ используется таблица коэффициентов (приложение 2 к настоящим МУК). Для приведения воздуха к стандартным условиям умножают V_t на соответствующий коэффициент.

1. Федеральный закон от 30.03.1999 N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения".

2. СанПиН 1.2.3685-21 "Гигиенические нормативы и требования к обеспечению безопасности и (или) безвредности для человека факторов среды обитания".

3. Р 2.2.2006-05 "Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда".

4. ГОСТ 12.1.005 "Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".

5. ГОСТ Р ИСО 5725-(1 - 6) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

6. ГОСТ 8.395 "Нормальные условия измерений при поверке. Общие требования".

7. ГОСТ OIML R 76-1-2011 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".

8. ГОСТ 12.1.007 "Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".

9. ГОСТ 12.1.019 "Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".

10. ГОСТ 12.1.004 "Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования".

11. ГОСТ 12.4.009 "Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание".

12. ГОСТ 1770 "Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия".

13. ГОСТ 29227 "Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования".

14. ГОСТ Р 58144 "Вода дистиллированная. Технические условия".

15. ГОСТ 25336 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".