"РД 52.18.800-2013. Руководящий документ. Массовая концентрация полициклических ароматических углеводородов в пробах воды. Методика измерений методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Росгидрометом 31.12.2013)

1 РАЗРАБОТАН Федеральным государственным бюджетным учреждением "Хабаровский центр по гидрометеорологии и мониторингу окружающей среды с функциями регионального специализированного метеорологического центра Всемирной службы погоды" (ФГБУ "Хабаровский ЦГМС-РСМЦ"), Федеральным государственным бюджетным учреждением "Научно-производственное объединение "Тайфун" (ФГБУ "НПО "Тайфун") Росгидромета

2 РАЗРАБОТЧИКИ Е.Г. Иванова, Л.Н. Артеменко, М.А. Запевалов, канд. хим. наук; Н.Н. Лукьянова, канд. хим. наук; Г.В. Власова, А.О. Корунов

3 СОГЛАСОВАН с Управлением мониторинга загрязнения окружающей среды, полярных и морских работ Росгидромета .......

4 УТВЕРЖДЕН заместителем Руководителя Росгидромета 31.12.2013

5 АТТЕСТОВАН ФГБУ "НПО "Тайфун" Росгидромета

Свидетельство об аттестации методики (метода) измерений N 18.29.800/01.00305-2011/2013 выдано 24.12.2013

6 ЗАРЕГИСТРИРОВАН ФГБУ "НПО "Тайфун" от 20.01.2014 за номером РД 52.18.800-2013

7 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

1.1 Настоящий руководящий документ устанавливает методику измерений массовой концентрации полициклических ароматических углеводородов (ПАУ), приведенных в таблице 1, в пробах воды поверхностных водных объектов и очищенных сточных вод (далее - вода) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

1.2 Диапазоны измеряемых значений массовой концентрации ПАУ, мкг/дм³, в пробах воды приведены в таблице 1.

1.3 Анализ проб воды с массовой концентрацией ПАУ, превышающей концентрации, указанные в таблице 1, проводят с разбавлением экстрактов в соответствии с 11.3.2 настоящего документа.

1.4 Настоящий руководящий документ предназначен для использования в лабораториях, выполняющих измерения массовой концентрации ПАУ в воде.

Примечание - Предельно допустимая концентрация бенз(a)пирена в воде водных объектов хозяйственно-питьевого и культурно-бытового водопользования составляет 0,01 мкг/дм³ в соответствии с ГН 2.1.5.2280, нафталина - 10 мкг/дм³ и бифенила - 1,0 мкг/дм³ в соответствии с ГН 2.1.5.1315.

В настоящем руководящем документе использованы ссылки на следующие нормативные документы:

ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике

ГОСТ Р 51592-2000 Вода. Общие требования к отбору проб

ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ Р 12.1.019-2009 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты

ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание

ГОСТ 17.1.5.04-81 Охрана природы. Гидросфера. Приборы и устройства для отбора, первичной обработки и хранения проб природных вод. Общие технические условия

ГОСТ 17.1.5.05-85 Охрана природы. Гидросфера. Общие требования к отбору проб поверхностных и морских вод, льда и атмосферных осадков

МИ 1317-2004 Государственная система обеспечения единства измерений. Результаты и характеристики погрешности измерений. Формы представления. Способы использования при испытаниях образцов продукции и контроле их параметров

МИ 2881-2004 Государственная система обеспечения единства измерений. Методики количественного химического анализа. Процедуры проверки приемлемости результатов анализа

РМГ 76-2004 Государственная система обеспечения единства измерений. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа

РМГ 61-2010 Государственная система обеспечения единства измерений. Показатели точности, правильности, прецизионности методик количественного химического анализа. Методы оценки

ПНД Ф 12.13.1-03 Методические рекомендации. Техника безопасности при работе в аналитических лабораториях (Общие положения)

ГН 2.1.5.1315-03 Предельно допустимые концентрации (ПДК) химических веществ в воде водных объектов хозяйственно-питьевого и культурно-бытового водопользования

ГН 2.1.5.2280-07 Предельно допустимые концентрации (ПДК) химических веществ в воде водных объектов хозяйственно-питьевого и культурно-бытового водопользования. Дополнения и изменения 1 к ГН 2.1.5.1315-03

В настоящем руководящем документе применены следующие термины с соответствующими определениями:

3.1 высокоэффективная жидкостная хроматография; ВЭЖХ: Один из эффективных методов разделения сложных смесей веществ, широко применяемый как в аналитической химии, так и в химической технологии.

3.2 полициклические ароматические углеводороды; ПАУ: Органические соединения, для которых характерно наличие в химической структуре двух и более конденсированных бензольных колец.

3.3 стандартный образец предприятия; СОП: Аттестованный раствор ПАУ в ацетонитриле, предназначен для градуировки газовых и жидкостных хроматографов, контроля показателей точности выполняемых измерений при определении массовых концентраций ПАУ в воде.

Погрешность измерений соответствует приписанным характеристикам, приведенным в таблице 1.

5.1 При выполнении измерений применяют следующие средства измерений:

- хроматограф жидкостный (например, типа Knauer серии Smartline) (далее - хроматограф), оборудованный следующими устройствами:

1) детектор спектрофотометрический 4-канальный (например, типа Smartline 2600) с записью спектра в диапазоне длин волн от 190 до 500 нм;

2) градиентный насос высокого давления (например, типа Smartline 1000) с низким уровнем пульсации потока, с точностью 0,5%, воспроизводимостью значений скорости потока 0,1%;

3) устройство для дегазации элюента с объемом вакуумирующей камеры - менее 0,5 мл, с модулем дегазатора, рассчитанного на максимальные скорости элюирования, равные 10 и 50 мл/мин;

4) устройство для термостатирования колонок, позволяющее поддерживать температуру в диапазоне от 5 °C до 85 °C с точностью установки +/- 0,3 °C;

5) хроматографическая колонка с обращенной фазой C18 (например, типа Диасфер-110), длиной 250 мм, внутренним диаметром 4 мм, диаметром частиц 5 мкм;

6) устройство ввода пробы - шестипортовый, трехканальный инжектор с дозировочной петлей 0,10 см³;

7) система управления хроматографом, сбора информации и обработки данных на базе персонального компьютера с программным обеспечением (например, типа EuroChrom).

- весы специального класса точности по ГОСТ Р 53228-2008 с наибольшим пределом взвешивания 210 г и пределами допустимой погрешности, равными:

1) +/- 0,5 мг при взвешивании в интервале от 0,01 до 50 г включ.,

2) +/- 1,0 мг при взвешивании в интервале от 50 до 200 г включ.,

3) +/- 1,5 мг при взвешивании в интервале от 200 до 210 г включ.;

- гиря для юстировки весов массой 200 г типа E 2 по ГОСТ OIML R 111-1-2009;

- барометр-анероид М-67 по ТУ 2504-1797-75;

- колба исполнения 2, класса 2 вместимостью 100 см³ по ГОСТ 1770-74;

- пробирка исполнения 2 вместимостью 5 см³ с ценой деления 0,1 см³ из химически стойкого стекла по ГОСТ 1770-74;

- цилиндры исполнения 1 вместимостью 10, 100 и 1000 см³ 1-го класса точности по ГОСТ 1770-74;

- пипетки градуированные типа 1 вместимостью 1 см³, 2 см³ и 5 см³ 2-го класса точности по ГОСТ 29228-91;

- термометр ртутный стеклянный лабораторный с диапазоном измерений от 0 °C до +150 °C и ценой деления 1 °C;

- груша-дозатор типа "Universal" (Alla France) вместимостью 100 см³;

- микрошприцы типа "Hamilton" вместимостью 100 и 200 мм³;

- дозатор пипеточный механический одноканальный переменного объема от 0,02 до 0,2 см³ типа P 200 ("Gilson");

- ротаметр типа РМ по ГОСТ 13045-81.

Примечание - Допускается использование других средств измерений, обеспечивающих точность измерений, указанную в таблице 1.

5.2 При выполнении измерений применяют следующие вспомогательные устройства и оборудование:

- бидистиллятор стеклянный по ТУ 25-11-1592-81;

- бутылки из бесцветного и темного стекла под крышку с винтовой резьбой типа БВ-100, БВ-500 и БВ-1000 вместимостью 100, 500 и 1000 см³ по ГОСТ Р 51477-90;

- бутылка стеклянная с притертой пробкой типа БП-100 вместимостью 100 см³ по ГОСТ Р 51477-90;

- воронка типа В диаметром 56 мм, высотой 80 мм по ГОСТ 25336-82;

- воронка типа ВД исполнения 3 вместимостью 2000 см³ по ГОСТ 25336-82;

- дистиллятор по ТУ 61-1-721-79;

- орбитальный встряхиватель типа HS 260 или аппарат универсальный для встряхивания проб жидкостей АВУ-1 по ТУ 64-1-2451-72;

- печь муфельная (электропечь сопротивления лабораторная камерная) типа СНОЛ 3/11 с максимальной температурой нагрева 1150 °C и размерами рабочей камеры 150x200x100 мм;

- стаканы типа В исполнения 1 номинальной вместимостью 100 и 1000 см³ по ГОСТ 25336-82;

- устройство для перегонки растворителей с основными размерами, приведенными на рисунке 1;

- фильтр мембранный ФМНЦ - 0,45 мкм по ТУ 9471-001-00212038-00;

- флаконы стеклянные вместимостью 1,5; 2 и 5 см³ с завинчивающимися крышками, снабженными прокладками с тефлоновым покрытием;

- холодильник бытовой;

- чашка выпарительная N 1 номинальной вместимостью 25 см³ по ГОСТ 9147-80;

- шкаф сушильный типа CNOL 67/350 по ТУ 16-681.032;

Примечание - Допускается использование других вспомогательных устройств и оборудования, обеспечивающего точность измерений, указанную в таблице 1.

5.3 При выполнении измерений применяют следующие реактивы и материалы:

- СОП ПАУ в запаянных стеклянных ампулах по 1 см³. Массовая концентрация ПАУ в ацетонитриле, мкг/см³, и относительная погрешность аттестованного значения при P = 0,95 приведены в таблице 2.

- азот газообразный особой чистоты, 1-й сорт по ГОСТ 9293-74;

- ацетонитрил для жидкостной хроматографии о.с.ч. по ТУ 6-09-14-2167-84;

- вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72;

- натрий сернокислый х.ч. по ГОСТ 4166-76;

- натрия гидроокись х.ч. по ГОСТ 4328-77;

- кислота соляная х.ч. по ГОСТ 3118-77;

- кислота серная х.ч. по ГОСТ 4204-77;

- н-гексан о.с.ч. по СТП ТУ СОМР 2-046-07;

- универсальная индикаторная бумага с диапазоном определения pH от 0 до 12, производство "Лахема".

Примечание - Допускается использование реактивов и материалов, изготовленных по другой нормативной и технической документации, в том числе импортных, имеющих метрологические характеристики, обеспечивающие погрешность измерений, указанную в таблице 1.

6.1 Метод измерений основан на извлечении ПАУ из проб воды, идентификации ПАУ и определении их массовой концентрации в пробе воды методом ВЭЖХ.

6.1.1 Извлечение ПАУ из проб воды производят путем экстракции н-гексаном (далее - гексан).

6.1.2 Обезвоживание экстракта ПАУ проводят с применением прокаленного натрия сернокислого.

6.1.3 Концентрирование экстракта ПАУ производят путем высушивания его в токе инертного газа (азот).

6.1.4 Определение массовой концентрации ПАУ в полученном экстракте проводят методом ВЭЖХ на колонке Диасфер-110 с использованием в качестве подвижной фазы смеси ацетонитрила и воды.

6.1.5 Идентификацию ПАУ осуществляют по совпадению времени удерживания ПАУ на хроматограммах пробы воды и градуировочного раствора при длинах волн 254, 260, 280 и 290 нм (при четырехволновом детектировании).

6.1.6 Определение массовой концентрации ПАУ проводят путем сравнения площадей пиков анализируемых и градуировочных растворов при длинах волн, указанных в 6.1.5.

6.2 Минимально детектируемые массовые концентрации ПАУ (равные границам нижних диапазонов измерения) приведены в таблице 1.

7.1 Помещение для выполнения работ должно соответствовать требованиям пожарной безопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004 и быть оснащено средствами пожаротушения по ГОСТ 12.4.009.

7.2 Лабораторное помещение должно быть оборудовано вытяжной вентиляцией.

7.3 По степени воздействия на организм вредные вещества, используемые при выполнении измерений, относятся к 1-, 2- и 3-му классам опасности по ГОСТ 12.1.007. Содержание используемых вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать установленных предельно допустимых концентраций в соответствии с ГОСТ 12.1.005.

7.4 Оператор должен пройти инструктаж в соответствии с ПНД Ф 12.13.1 и соблюдать меры предосторожности при работе с канцерогенными углеводородами, с пожароопасными растворителями, кислотами и щелочами.

7.5 Работы с органическими растворителями (гексаном и ацетонитрилом), приготовление градуировочных растворов ПАУ, подготовку проб воды для анализа (экстракцию, обезвоживание, концентрирование проб) производят в вытяжном шкафу.

7.6 После окончания работы, а также в случае попадания раствора на кожу или на стол, загрязнение смывают проточной водой с моющим средством, а затем обрабатывают участок кожи и рабочий стол техническим этиловым спиртом.

7.7 Оператор, выполняющий измерения на хроматографе, должен знать правила безопасности при работе с электрооборудованием, соблюдать требования электробезопасности по ГОСТ Р 12.1.019, а также соблюдать правила работы с сжатыми газами согласно ПНД Ф 12.13.1.

7.8 Градуировочные растворы, экстракты, а также сливы органических растворителей собирают в герметично закрывающуюся посуду и утилизируют согласно установленным правилам.

К выполнению измерений допускаются лица, имеющие квалификацию не ниже инженера-химика, владеющие техникой пробоподготовки, приготовления растворителей, градуировочных растворов, освоившие метод установления градуировочной характеристики, обработки результатов, процедуры внутреннего контроля качества и допущенные к работе на жидкостном хроматографе.

Выполнение измерений проводят при условиях:

- заземление согласно руководству по эксплуатации на хроматограф;

- отсутствие вблизи хроматографа источников радиочастотного излучения, сильной вибрации, электрических и магнитных полей;

- отсутствие в лабораторном помещении агрессивных паров и ПАУ, указанных в таблице 1.

10.1.1 Отбор проб воды производят в соответствии с ГОСТ 17.1.5.05 и ГОСТ Р 51592. Оборудование для отбора проб должно соответствовать ГОСТ 17.1.5.04 и ГОСТ Р 51592.

10.1.2 На бутылке из темного стекла вместимостью 1 дм³ предварительно делают отметку, соответствующую объему 1 дм³. Бутылку заполняют пробой воды до отмеченного уровня.

Примечание - Для определения коэффициента извлечения ПАУ из воды по 11.4.1 необходимо отобрать 6 дм³ пробы воды.

10.1.3 При отборе проб воды составляют сопроводительный талон по форме, рекомендуемой в приложении А.

10.1.4 Хранение проб воды производят в бутылках из темного стекла вместимостью 1 дм³. Срок хранения проб при температуре от +4 °C до +8 °C составляет не более 3 суток.

10.2.1 Вновь полученную посуду промывают в мыльном растворе и кипятят в течение 1 ч в 1%-ном растворе соляной кислоты. Затем ополаскивают дистиллированной водой до нейтральной реакции воды (pH от 6,5 до 7,0). Далее посуду промывают три раза небольшим количеством гексана, перегнанного в соответствии с 10.3.3 (объемом от 0,5 до 10 см³ в зависимости от объема посуды). Посуду высушивают в вытяжном шкафу и хранят в закрытом состоянии.

10.2.2 Бутылки для отбора проб воды промывают концентрированной серной кислотой, затем дистиллированной водой до нейтральной реакции и ополаскивают небольшим количеством перегнанного гексана.

10.3.1 Элюент А приготавливают добавлением к 70 см³ перегнанного ацетонитрила 30 см³ бидистиллированной воды.

10.3.2 Элюент Б приготавливают добавлением к 90 см³ перегнанного ацетонитрила 10 см³ бидистиллированной воды.

10.3.3 Гексан перегнанный приготавливают перегонкой гексана с отбором фракции, кипящей при температуре от 68,5 °C до 68,7 °C.

10.3.4 Натрий сернокислый безводный приготавливают прокаливанием натрия сернокислого в муфельной печи при температуре 400 °C в течение 4 ч. Натрий сернокислый безводный хранят в герметично закрывающейся склянке не более 1 мес.

10.3.5 Раствор натрия сернокислого 10%-ный приготавливают следующим образом:

- растворяют 100 г натрия сернокислого в 0,9 дм³ бидистиллированной воды;

- раствор очищают экстракцией с 20 см³ перегнанного гексана;

- после расслоения фаз раствор натрия сернокислого сливают в приготовленную бутылку с завинчивающей пробкой. Срок хранения раствора составляет не более 1 мес.

10.3.6 Раствор соляной кислоты 10%-ный приготавливают из 37%-ной концентрированной соляной кислоты плотностью 1,19 г/см³ следующим образом:

- в мерную колбу вместимостью 100 см³ наливают 50 см³ бидистиллированной воды и приливают 23,7 см³ концентрированной соляной кислоты;

- после охлаждения раствора до температуры лабораторного помещения объем раствора доводят бидистиллированной водой до 100 см³;

- раствор переливают в стеклянную бутылку с притертой пробкой. Срок хранения раствора составляет не более 1 мес.

10.3.7 Раствор гидроокиси натрия 10%-ный приготавливают растворением 10 г гидроокиси натрия в 90 см³ бидистиллированной воды. Срок хранения раствора составляет не более 1 мес.

10.3.8 Ацетонитрил перегнанный получают перегонкой ацетонитрила и отбором фракции, кипящей при температуре от 81,4 °C до 81,6 °C.

Подготовку хроматографа к работе и включение компьютера проводят в соответствии с руководством по эксплуатации. На компьютере в программе управления создают метод анализа с использованием абсолютной градуировки согласно описанию программного обеспечения.

Включают хроматограф и вводят в хроматограф элюент А до получения стабильной базовой линии.

10.5.1 Для приготовления основного раствора смеси ПАУ (градуировочного раствора N 1) используют СОП бенз(g,h,i)перилена, дибенз(a,h)антрацена с массовой концентрацией 100 мкг/см³ и антрацена, аценафтена, аценафтилена, бенз(a)антрацена, бенз(a)пирена, бифенила, бенз(b)флуорантена, бенз(k)флуорантена, 2-метилнафталина, нафталина, пирена, фенантрена, флуорена, флуорантена, хризена с массовой концентрацией 200 мкг/см³ (таблица 2).

10.5.1.1 В градуированную пробирку вместимостью 5 см³ дозатором вносят следующее:

- 0,2 см³ СОП нафталина, аценафтилена, аценафтена, 2-метилнафталина;

- 0,05 см³ СОП антрацена, бенз(a)антрацена, бенз(a)пирена, бенз(b)флуорантена, бенз(k)флуорантена, бифенила, пирена, фенантрена, флуорантена, флуорена, хризена;

- 0,1 см³ СОП дибенз(a,h)антрацена, бенз(g,h,i)перилена.

10.5.1.2 После внесения СОП объем раствора доводят до метки 3 см³ ацетонитрилом.

10.5.2 Для приготовления градуировочного раствора N 2 в градуированную пробирку вместимостью 5 см³ вносят пипеткой 1,5 см³ основного градуировочного раствора N 1 и доводят объем до 3 см³ ацетонитрилом.

10.5.3 Для приготовления градуировочного раствора N 3 в градуированную пробирку вместимостью 5 см³ вносят пипеткой 0,3 см³ основного градуировочного раствора N 1 и доводят объем до 3 см³ ацетонитрилом.

10.5.4 Для приготовления градуировочного раствора N 4 в градуированную пробирку вместимостью 5 см³ вносят пипеткой 0,3 см³ градуировочного раствора N 2 и доводят объем до 3 см³ ацетонитрилом.

10.5.5 Для приготовления градуировочного раствора N 5 в градуированную пробирку вместимостью 5 см³ вносят пипеткой 0,3 см³ градуировочного раствора N 3 и доводят объем до 3 см³ ацетонитрилом.

10.5.6 Для приготовления градуировочного раствора N 6 в градуированную пробирку вместимостью 5 см³ вносят пипеткой 0,3 см³ градуировочного раствора N 4 и доводят объем до 3 см³ ацетонитрилом.

10.5.7 Масса ПАУ, мкг, в градуировочных растворах (в 0,3 см³ раствора) приведена в таблице 3. При соблюдении процедуры выполнения измерений (извлечение ПАУ из 1 дм³ и концентрирование экстракта до объема 0,3 см³) это значение будет совпадать с массовой концентрацией определяемого ПАУ в пробе воды, мкг/дм³.

10.5.8 Градуировочные растворы хранят при температуре от +4 °C до +8 °C не более 3 мес.

10.6.1. Градуировочную характеристику (зависимость площади пика на хроматограмме от массовой концентрации ПАУ в градуировочном растворе) устанавливают на серии, состоящей из 6 градуировочных растворов, приготовленных по 10.5.

Градуировочные растворы вводят в хроматограф и анализируют при следующих условиях:

- объем раствора составляет 20 мм³;

- температура колонки +25 °C.

Рекомендуемый режим градиентного элюирования:

- 100% элюента А со скоростью 0,4 см³/мин в течение 30 мин;

- увеличение скорости потока 100% элюента А от 0,4 см³/мин до 1,0 см³/мин;

- линейный градиент от 100% элюента А до 100% элюента Б в течение 28 мин, скорость потока 1,0 см³/мин;

- 100% элюента Б со скоростью 1,0 см³/мин в течение 2 мин;

- линейный градиент от 100% элюента Б до 100% элюента А в течение 25 мин, скорость потока 1,0 см³/мин.

Аналитический сигнал регистрируют при четырехволновом детектировании по поглощению при длинах волн 254, 260, 280, 290 нм.

Пример хроматограммы градуировочного раствора приведен в приложении Б.

10.6.2. С помощью программного модуля градуировки управляющей программы, используя метод наименьших квадратов, строят градуировочный график, откладывая по оси абсцисс X площадь пика, а по оси ординат Y - массу определяемого ПАУ в 0,3 см³ раствора (массовую концентрацию в анализируемой пробе воды, мкг/дм³).

Градуировочный график признается удовлетворительным, если значение коэффициента линейной корреляции не менее 0,98.

10.6.3 Устанавливают градуировочный коэффициент b, получаемый из отношения значений массовой концентрации ПАУ в анализируемой пробе воды C_cm, мкг/дм³, (таблица 3) к площади пика ПАУ S_cm, по формуле

10.6.4 Градуировочный график проверяют не реже одного раза в 6 мес., а также при замене колонки, используемых реактивов и стандартных образцов, после проведения ремонтно-профилактических работ хроматографа и/или его детектора.

10.7.1 Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят перед анализом серии проб по результатам хроматографирования одного из градуировочных растворов указанных в таблице 3.

Градуировочную характеристику считают стабильной, если отклонение времени удерживания от первоначального значения не превышает 5%, а измеренное значение массовой концентрации ПАУ отличается от аттестованного значения не более чем на 15%.

10.7.2 Если условие стабильности градуировочной характеристики не выполняется, проводят повторное измерение этого градуировочного раствора с целью исключения результата измерения, содержащего погрешность.

10.7.3 При повторном получении неудовлетворительного результата выясняют и устраняют причины его появления, после чего повторяют контроль с использованием другого градуировочного раствора.

10.7.4 При дальнейшем превышении допустимого отклонения устанавливают новую градуировочную характеристику по 10.6.

11.1.1 Пробу воды объемом 1 дм³ переносят в делительную воронку вместимостью 2 дм³. При помощи 10%-ного раствора соляной кислоты или 10%-ного раствора гидроокиси натрия, приготовленных по 10.3.6 и 10.3.7, доводят pH воды до величины от 6 до 7 при контроле с помощью индикаторной бумаги. Приливают 100 см³ 10%-ного раствора натрия сернокислого, приготовленного по 10.3.5. Бутылку, в которой находилась проба, ополаскивают 10 см³ перегнанного гексана, предназначенного для экстракции, объединяют гексан с пробой воды в делительной воронке.

11.1.2 Выполняют экстракцию на встряхивающем устройстве в течение 20 мин. Выдерживают пробу для расслаивания фаз в течение приблизительно 30 мин. Нижний водный слой сливают и отбрасывают. Верхний слой - гексановый экстракт - собирают в стеклянный стакан вместимостью 100 см³. Делительную воронку ополаскивают от 1 до 2 см³ гексана, объединяют этот объем с экстрактом в стакане.

11.1.3 Для обезвоживания гексанового экстракта в стакан добавляют прокаленный по 10.3.4 натрий сернокислый безводный при перемешивании стеклянной палочкой. Добавление натрия сернокислого безводного прекращают после полного исчезновения пены или эмульсии.

11.1.4 Обезвоженный гексановый экстракт сливают из стакана во флакон из темного стекла с притертой или завинчивающейся пробкой, не допуская попадания воды во флакон, а натрий сернокислый промывают небольшим количеством перегнанного гексана, который объединяют с экстрактом.

11.1.5 Экстракты проб воды хранят в герметично закрытых флаконах из темного стекла в холодильнике при температуре от +5 °C до +10 °C. Срок хранения составляет не более 6 мес. Допускается хранить экстракты проб воды при комнатной температуре от 6 до 8 ч.

11.2.1 Гексановый экстракт пробы воды концентрируют в выпарительной чашке, удаляя гексан при комнатной температуре в слабом токе инертного газа (азот), избегая полного выпаривания.

После концентрирования гексанового экстракта до объема от 0,1 до 0,2 см³ в выпарительную чашку добавляют 0,5 см³ ацетонитрила и продолжают выпаривание до полного отсутствия гексана.

11.2.2 Грушей-дозатором с помощью градуированной пипетки вместимостью 1 см³ измеряют объем остатка, доводят в пипетке объем концентрата до 0,3 см³ ацетонитрилом и переносят его во флакон с завинчивающейся крышкой.

11.2.3 Полученный раствор фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.

11.3.1 Аликвоту 20 мм³ полученного по 11.2 концентрированного экстракта пробы воды вводят в хроматограф и анализируют методом ВЭЖХ при условиях элюирования, изложенных в 10.6.1.

11.3.2 При превышении верхнего предела аттестованного диапазона измеряемого значения массовой концентрации ПАУ экстракт пробы разбавляют ацетонитрилом.

11.4.1 При проведении анализа пробы воды происходят потери ПАУ. Во избежание получения заниженных результатов определений в формулу для расчета результата анализа вводят коэффициент извлечения ПАУ К_i. Для определения К_i в две делительные воронки вносят по 1,0 дм³ пробы воды. В одну из воронок пипеткой вместимостью 1,0 см³ добавляют 0,3 см³ одного из градуировочных растворов ПАУ. Содержимое воронки перемешивают. Пробы воды анализируют согласно 11.1. - 11.3.

Повторяют процедуру не менее трех раз с новыми порциями пробы воды.

11.4.2 Рассчитывают разницу между площадью пика ПАУ в пробе воды с добавкой ПАУ и площадью пика, совпадающего по времени удерживания с данным ПАУ, в исходной пробе воды. Расчет производят при рекомендуемой длине волны, где площадь пика имеет максимальное значение (таблица 4).

Ориентировочные значения К_i, приведены в таблице 4.

Рассчитывают значение массовой концентрации ПАУ в пробе воды с добавкой C_gi, мкг/дм³, по формуле

где S_gi - площадь пика ПАУ в пробе с добавкой;

S_0i - площадь пика в пробе воды без добавки.

11.4.3. По градуировочной зависимости определяют массовую концентрацию ПАУ в пробе воды с добавкой.

Рассчитывают К_i по формуле

где - среднее значение массовой концентрации ПАУ в пробах воды с добавкой, мкг/дм³;

- величина внесенной добавки, мкг/дм³.

11.5.1 Холостое измерение проводят перед проведением анализа проб воды с целью проверки чистоты применяемых реактивов и посуды.

11.5.2 Для выполнения холостого измерения берут 1,0 дм³ дистиллированной воды и проводят операции по 11.1 - 11.3.

11.5.2 Если на хроматограмме экстракта, полученного при холостом измерении, регистрируются пики, совпадающие по времени удерживания с пиками определяемых ПАУ, путем постадийного исследования устанавливают, какой из реактивов загрязнен, и проводят его очистку или замену на аналогичный из другой партии.

12.1 Идентификацию определяемых ПАУ осуществляют:

- по совпадению времени удерживания пика со временем удерживания аналогичного ПАУ на хроматограмме градуировочного раствора, полученного перед проведением серии анализов. Отклонение времени удерживания не должно превышать 5%;

- путем сравнения соотношений интенсивности поглощения ПАУ при различных длинах волн на хроматограммах анализируемых проб и градуировочных растворов. Отношения площадей пиков при различных длинах волн для ПАУ приведены в таблице В.1 (приложение В).

Если приведенные в таблице В.1 (приложение В) отношения площадей пиков на определенных длинах волн не соблюдаются, то приписывать данный пик конкретному ПАУ нельзя.

12.2. При расчете массовой концентрации ПАУ в пробе воды в качестве расчетного параметра при обработке хроматограмм используют площадь пика, величина которой не должна выходить за пределы диапазона линейности детектирования.

Массовую концентрацию ПАУ в пробе воды X_i, мкг/дм³, рассчитывают по формуле

где C_i - массовая концентрация, полученная при расчете по градуировочной зависимости, равная значению массовой концентрации ПАУ в пробе воды, мкг/дм³.

12.3 Для расчета массовой концентрации ПАУ используют градуировочную зависимость на длине волны, при которой поглощение определяемого ПАУ максимально (таблица 4).

12.4 Массовые концентрации определяемых ПАУ X_i, мкг/дм³, в пробе воды при разбавлении экстракта рассчитывают по формуле

где V₁ - объем экстракта, взятый для разбавления, см³;

V₂ - объем экстракта, полученный после разбавления, см³.

13.1 Конечный результат A, мкг/дм³, представляют в соответствии с МИ 1317 по формуле

где X_i - массовая концентрация ПАУ в пробе воды, рассчитанная по формуле (4), мкг/дм³;

- границы характеристики погрешности результата измерений, мкг/дм³.

13.2 Значения приписанных характеристик погрешности измерений приведены в таблице 1.

13.3 Числовое значение результата измерений должно оканчиваться цифрой того же разряда, что и значение характеристики погрешности измерений.

13.4 В соответствии с РМГ 61 характеристики погрешности измерений выражают числом, содержащим не более двух значащих цифр.

13.5 Результаты измерений оформляют записью в рабочем журнале по установленной в лаборатории форме.

Если массовая концентрация ПАУ ниже нижней границы диапазона измерений, производят следующую запись в журнале: "массовая концентрация ПАУ менее...".

Минимально определяемые массовые концентрации приведены в таблице 1.

14.1.1 Контроль качества результатов измерений проводят в соответствии с РМГ 76.

14.1.2 Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории предусматривает:

- оперативный контроль процедуры выполнения измерений (на основе оценки погрешности при проведении отдельно взятой контрольной процедуры);

- контроль стабильности результатов измерений (на основе контроля стабильности погрешности).

14.1.3 Периодичность оперативного контроля процедуры выполнения измерений и процедуры контроля стабильности результатов измерений указывают в регламенте выполнения работ лаборатории.

14.2.1 Контроль повторяемости проводят при анализе контрольных проб.

14.2.2 Для приготовления контрольных проб в две делительные воронки вместимостью 2 дм³ помещают по 1 дм³ одной и той же воды. В каждую из проб вносят равные объемы основного градуировочного раствора N 1.

14.2.3 При контроле повторяемости за результат анализа принимают среднее арифметическое значение результатов измерения массовых концентраций ПАУ в двух пробах воды с одинаковой добавкой X_i, если выполняется условие приемлемости результатов в условиях повторяемости

где X₁, X₂ - результаты параллельных определений, мкг/дм³;

r - значения пределов повторяемости.

При превышении пределов повторяемости, указанных в таблице 5, эксперимент повторяют.

При повторном превышении пределов повторяемости выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.

14.3.1 Оперативный контроль погрешности выполнения измерений проводят с использованием метода добавок путем сравнения результатов контрольной процедуры К_к с нормативом контроля К.

14.3.2 Для проведения оперативного контроля погрешности в две делительные воронки вместимостью 2 дм³ помещают по 1 дм³ одной и той же пробы воды. В одну из воронок вносят добавку ПАУ.

14.3.3 Величина добавки выбирается таким образом, чтобы массовая концентрация определяемых ПАУ увеличилась по сравнению с исходной на величину от 50% до 150% и массовая концентрация в пробе воды с добавкой не выходила за верхний диапазон измерений настоящей методики.

При реализации контрольной процедуры получают результаты контрольных измерений массовой концентрации определяемого ПАУ в пробе воды X и в пробе воды с внесенной известной добавкой X_д.

14.3.4 Результат оперативного контроля погрешности выполнения измерений К_к признают удовлетворительным, если выполняется условие

где X_д - массовая концентрация определяемого ПАУ в пробе воды с внесенной известной добавкой, мкг/дм³;

X - массовая концентрация определяемого ПАУ в пробе воды, мкг/дм³;

A_д - добавка, внесенная в контрольную пробу воды, мкг/дм³;

К - норматив оперативного контроля погрешности измерений.

14.3.5 Норматив контроля погрешности К, мкг/дм³, рассчитывают по формуле

где - значения характеристики погрешности результатов измерений, соответствующие массовой концентрации ПАУ в пробе с добавкой, мкг/дм³;

- значения характеристики погрешности результатов измерений, соответствующие массовой концентрации ПАУ в пробе, мкг/дм³.

14.3.6 Если результат контрольной процедуры удовлетворяет условию (8), то процедуру анализа признают удовлетворительной.

14.3.7 При невыполнении условия (8) контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении условия (8) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

Расхождение между результатами измерений, полученными в двух лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости R_m (таблица 5). При выполнении этого условия приемлемы оба результата измерений и в качестве окончательного может быть использовано их общее среднее значение. При превышении предела воспроизводимости могут быть использованы методы оценки приемлемости результатов измерений согласно ГОСТ Р ИСО 5725-6 или МИ 2881.

Ориентировочные величины затрат рабочего времени, затрачиваемого одним оператором на проведение анализа одной пробы и серии из 8 проб воды представлены в таблице 6.