"ЦВ 3.04.53-2004. ФР.1.31.2004.01231. Методика выполнения измерений массовой концентрации общего фосфора и фосфора фосфатов в пробах питьевых, природных и сточных вод фотометрическим методом"
(утв. ЗАО "ЦИКВ" 02.11.2005)

Настоящий документ устанавливает методику выполнения измерений массовой концентрации общего фосфора и фосфора фосфатов в пробах сточных вод в диапазоне концентраций от 0,1 до 1000 мг/дм³, и общего фосфора в пробах питьевых и природных вод в диапазоне от 0,013 до 1000 мг/дм³.

Методика выполнения измерений обеспечивает с вероятностью P = 0,95 получение результатов измерений с погрешностью, не превышающей значений, приведенных в таблицах 1 и 2.

3.1 Метод измерений содержания общего фосфора и фосфора фосфатов заключается во взаимодействии ионов ортофосфатов с ионами молибдата и сурьмы с образованием комплекса фосфорно-молибденовой гетерополикислоты и восстановлении его аскорбиновой кислотой с последующим фотометрическим определением полученного окрашенного соединения при длине волны излучения (690 +/- 20) нм. Для определения общего фосфора пробы подвергаются предварительной минерализации всех фосфорсодержащих веществ надсернокислым аммонием в среде серной кислоты.

3.2 Мешающие влияния и способы их устранения

Сильнокислые или сильнощелочные пробы предварительно нейтрализуют до pH = 4 - 11.

Определению мешают сульфиды и сероводород в концентрациях, превышающих 3 мг/дм³. Их мешающее влияние устраняют добавлением нескольких миллиграммов твердого марганцевокислого калия на 100 см³ пробы. После встряхивания в течение 1 - 2 минут раствор должен оставаться слаборозовым.

На определение оказывает влияние присутствие соединений мышьяка, который образует с молибдатом аналогичную фосфору гетерополикислоту. Если в пробе предполагается или известно присутствие соединений мышьяка, то за 10 минут до добавления смешанного реактива к пробе по 9.2 добавляют 1 см³ раствора серноватистокислого натрия массовой концентрации 12 г/дм³. Измерение оптической плотности такой пробы по 9.3 следует провести через 10 - 11 минут, не более.

Определению фосфат-ионов мешают нитриты в концентрации 0,3 мг/дм³ и более. Их мешающее влияние устраняют прибавлением 1,5 см³ раствора мочевины с массовой долей 40% после минерализации по 9.1

Определению мешает железо в концентрации больше 5 мг/дм³. Его мешающее влияние устраняют прибавлением в анализируемую пробу эквивалентного количества ЭДТА (трилона "Б").

4.1 Средства измерений.

4.1.1 Спектрофотометр или фотоэлектроколориметр, обеспечивающий измерение оптической плотности при длине волны , кюветы с рабочей длиной 2,5; 3 или 5 см.

4.1.2 Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104-2001 с ценой деления не более 0,1 мг, погрешностью не более 0,75 мг, наибольшим пределом взвешивания не более 210 г.

4.1.3 Цилиндры мерные или мензурки по ГОСТ 1770-74.

4.1.4 Колбы мерные по ГОСТ 1770-74, 2 класса точности.

4.1.5 Пипетки градуированные по ГОСТ 29227-91, 2 класса точности.

4.1.6 Государственный стандартный образец состава водных растворов фосфат-ионов, например, ГСО 7018-93 - 7020-93.

4.1.7 Секундомер механический или песочные часы.

4.2 Вспомогательные устройства.

4.2.1 Автоклав-стерилизатор, обеспечивающий давление (0,20 +/- 0,02) МПа и температуру (132 +/- 2) °C, например, типа ГК-10-1, или электроплитка с закрытой спиралью по ГОСТ 14919-83, или деструкционная установка типа "turboterm" фирмы "Gerhard".

4.2.2 Бутылочки из боросиликатного стекла фирмы SHOTT GL 32 вместимостью 50 см³ с крышками PBT и прокладками PTFE.

4.2.3 Колбы конические плоскодонные термостойкие или стаканы термостойкие по ГОСТ 25336-82.

4.2.4 Стаканчики для взвешивания (бюксы) по ГОСТ 25336-82.

4.2.5 Воронки лабораторные по ГОСТ 25336-82.

4.2.6 Стаканы термостойкие по ГОСТ 25336-82.

4.2.7 Фильтры обеззоленные "синяя лента" по ТУ 6-09-1678-86.

4.3 Реактивы и материалы.

4.3.1 Кислота серная по ГОСТ 4204-77, ч.д.а.

4.3.2 Аммоний надсернокислый по ГОСТ 20478-75, ч.д.а.

4.3.3 Аммоний молибденовокислый, 4-х водный по ГОСТ 3765-78, ч.д.а.

4.3.4 Калий антимонилвиннокислый по ТУ 6-09-803-76.

4.3.5 Карбамид (мочевина) по ГОСТ 6691-77, ч.д.а.

4.3.6 Гидроокись натрия по ГОСТ 4328-77, ч.д.а.

4.3.7 Кислота аскорбиновая (фарм.).

4.3.8 Фенолфталеин (индикатор) по ТУ 6-09-5360-87, спиртовой раствор с массовой долей 0,1%.

4.3.9 Соль динатриевая этилендиаминтетрауксусной кислоты 2-водная (трилон Б) по ГОСТ 10652-73.

4.3.10 Калий марганцовокислый по ГОСТ 20490-75, ч.д.а.

4.3.11 Натрий серноватистокислый 5-водный по ГОСТ 27068-86.

4.3.12 Универсальная индикаторная бумага для измерения pH по ТУ 6-09-1181-71.

4.3.13 Дистиллированная вода по ГОСТ 6709-72.

4.3.14 Хлороформ по ГОСТ 20015-88.

Допускается применять другие средства измерений, вспомогательное оборудование и реактивы с метрологическими и техническими характеристиками не хуже указанных.

При выполнении анализов необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76 и ГОСТ 12.4.021-75.

Требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-79.

Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83.

Исполнители должны быть проинструктированы о мерах безопасности при работе с нагревательными приборами в соответствии с инструкциями, прилагаемыми к прибору. Организация обучения работающих безопасности труда должна производиться по ГОСТ 12.0.004-90.

К выполнению измерений допускаются лица со средним специальным образованием, имеющие стаж работы в химической лаборатории не менее 6 месяцев и освоившие методику выполнения измерений.

При подготовке к выполнению измерений и при их проведении необходимо соблюдать следующие условия:

8.1 Приготовление растворов

8.1.1 Раствор серной кислоты для минерализации с массовой долей 38%

Для приготовления 1 дм³ раствора 278 см³ концентрированной серной кислоты осторожно, при перемешивании приливают к 500 см³ дистиллированной воды. После охлаждения объем раствора доводят до 1000 см³ дистиллированной водой. Срок хранения не ограничен.

8.1.2 Раствор серной кислоты с массовой долей 23%

Для приготовления 1 дм³ раствора 153 см³ концентрированной серной кислоты осторожно, при перемешивании приливают к 500 см³ дистиллированной воды. После охлаждения объем раствора доводят до 1000 см³ дистиллированной водой. Срок хранения не ограничен.

8.1.3 Серная кислота молярной концентрации 0,5 моль/дм³

Для приготовления 1 дм³ раствора 28 см³ концентрированной серной кислоты осторожно, при перемешивании приливают к 500 см³ дистиллированной воды. После охлаждения объем раствора доводят до 1000 см³ дистиллированной водой.

8.1.4 Раствор аммония молибденовокислого с массовой долей 3%

Для приготовления 100 см³ раствора 3 г молибденовокислого аммония растворяют в 97 см³ горячей дистиллированной воды. Раствор хранят в бутыли из полиэтилена при температуре 4 - 8 °C в темноте. Срок хранения раствора - 3 месяца (если выпадет осадок молибдата, то реактив не применяется). Пользоваться раствором можно не ранее чем через 2 суток после приготовления.

8.1.5 Раствор аскорбиновой кислоты с массовой долей 2,2%

Для приготовления 100 см³ раствора 2,2 г аскорбиновой кислоты растворяют в 97,8 см³ дистиллированной воды.

Раствор хранят в холодильнике при температуре 4 - 8 °C. Срок хранения 3 недели.

8.1.6 Раствор калия антимонилвиннокислого с массовой долей 0,068%

Для приготовления 0,5 дм³ раствора 0,34 г калия антимонилвиннокислого помещают в колбу вместимостью 500 см³ и доводят до метки дистиллированной водой.

8.1.7 Смешанный реактив.

Смешивают 5 частей раствора серной кислоты с массовой долей 23% с 2 частями раствора аммония молибденовокислого, 2 частями раствора аскорбиновой кислоты и 1 частью раствора антимонилвиннокислого калия. Смешанный раствор готовят непосредственно перед использованием.

8.1.8 Раствор натрия гидроокиси массовой долей 8%

80 г гидроокиси натрия растворяют в 920 см³ дистиллированной воды. Раствор хранят в полиэтиленовой посуде в течение 6 месяцев.

8.1.9 Растворы для устранения мешающих влияний

При необходимости для устранения мешающих влияний соединений мышьяка или нитрит-иона готовят следующие растворы:

8.1.9.1 Раствор серноватистокислого натрия массовой концентрации 12 г/дм³

Для приготовления 100 см³ раствора 1,2 г серноватистокислого натрия растворяют в мерной колбе вместимостью 100 см³ в дистиллированной воде. Срок хранения раствора в темной бутылке не более 3 месяцев.

8.1.9.2 Приготовление раствора мочевины с массовой долей 40%

Для приготовления раствора 40 г мочевины растворяют в 60 г дистиллированной воды. Срок хранения 3 месяца.

8.1.10 Рабочий градуировочный раствор с номинальной массовой концентрацией фосфора 2,5 мг/дм³.

Пример приготовления рабочего раствора из ГСО состава растворов фосфат-ионов с номинальной массовой концентрацией фосфат-иона равной 0,1 г/дм³.

Для приготовления 100 см³ рабочего раствора с массовой концентрацией фосфора 2,5 мг/дм³ в мерную колбу номинальной вместимостью 100 см³ пипеткой вносят 7,7 см³ раствора ГСО и доводят объем раствора в колбе до метки дистиллированной водой.

8.1.11 Градуировочные растворы

Для приготовления 50 см³ градуировочных растворов в мерные колбы вместимостью 50 см³ с внесенными порядка 20 см³ дистиллированной воды, пипеткой добавляют 0,0; 0,5; 1,0; 2,0; 4,0; 6,0; 8,0; см³ рабочего градуировочного раствора, прибавляют по 5 см³ смешанного реактива, перемешивают и доводят объем раствора в каждой колбе дистиллированной водой до метки. Получают растворы с массовой концентрацией фосфора 0; 0,025; 0,05; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; мг/дм³. Первый градуировочный раствор с массовой концентрацией фосфора равной нулю является холостой пробой. Растворы готовят в день использования.

8.2 Определение градуировочной зависимости

Спустя 15 минут после приготовления измеряют оптическую плотность полученных растворов на спектрофотометре или фотоэлектроколориметре при в кювете с рабочей длиной 2,5; 3 или 5 см относительно дистиллированной воды. Измерение оптической плотности повторяют 2 - 3 раза, вычисляют среднее значение оптической плотности для каждого раствора. Определяют градуировочную зависимость оптической плотности (D) от массовой концентрации фосфора в градуировочных растворах (C).

Рассчитывают коэффициент градуировочной зависимости (K):

где: 

D_i - оптическая плотность градуировочных растворов

D_хол - оптическая плотность холостой пробы

Контроль правильности определения градуировочной зависимости проводят по максимальному отклонению от K.

Результаты контроля признаются удовлетворительными, если выполняется условие:

|Ki - K|/K <= 0,25, в диапазоне от 0,025 до 0,1 мг/дм³;

|Ki - K|/K <= (0,015 + 0,1·Ci)/Ci, в диапазоне св. 0,1 до 0,4 мг/дм³.

Контроль стабильности градуировочной зависимости проводят не реже 1 раза в квартал, по трем градуировочным растворам с различной массовой концентрацией фосфора. Норматив контроля стабильности градуировочной зависимости (G) равен . В случае смены реактивов и превышения норматива G проводят новое определение градуировочной зависимости.

8.3 Отбор проб

Общие требования к отбору проб по ГОСТ Р 51592-2000, или другой нормативной документацией, утвержденной в установленном порядке. Объем пробы сточной воды для определения составляет 100 - 300 см³ в зависимости от концентрации общего фосфора. Пробы отбирают и хранят в стеклянной или полиэтиленовой посуде. Анализ проводят как можно быстрее, не позднее 6 часов после отбора пробы. Пробу, отобранную для определения общего фосфора допускается хранить при температуре 2 - 5 °C в течение 2 суток. Пробу, отобранную для определения фосфатов, при необходимости консервируют 3 - 4 см³ хлороформа на 1 дм³ воды и хранят при температуре 2 - 5 °C не более 2-х суток. Пробу, отобранную для определения общего фосфора, не фильтруют. Перед проведением анализа пробы энергично взбалтывают.

9.1 В термостойкую колбу или стакан помещают аликвоту пробы сточной воды. (При использовании автоклава аликвоту пробы помещают в бутылочку из боросиликатного стекла, при использовании деструкционной установки типа "turboterm" аликвоту пробы помещают в пробирку установки).

Добавляют дистиллированную воду так, чтобы общий объем аликвоты пробы сточной воды и дистиллированной воды составил ~ 50 см³ (пробы питьевой и природной воды ~ 100 см³) в колбе или стакане, или пробирке установки (~ 30 см³ в бутылочке из боросиликатного стекла), а содержание фосфора в ней было от 0,025 до 0,4 мг/дм³. Прибавляют 1 см³ раствора серной кислоты с массовой долей 38% и 0,4 г аммония надсернокислого. Раствор кипятят до тех пор, пока в колбе или стакане, или пробирке установки не останется около 10 см³ раствора.

При использовании установки типа "turboterm" термическую обработку проб проводят в соответствии с Приложением 1.

При использовании автоклава бутылочки из боросиликатного стекла помещают в автоклав и выдерживают при температуре 132 °C и давлении 0,2 МПа в течение 30 минут.

После охлаждения в пробу прибавляют одну - две капли раствора фенолфталеина и раствор гидроокиси натрия до появления слаборозовой окраски. Затем раствор обесцвечивают прибавлением раствора серной кислоты молярной концентрации 0,5 моль/дм³.

9.2 Реакционную смесь фильтруют в мерную колбу вместимостью 50 см³, ополаскивая реакционную колбу или стакан (бутылочку при использовании автоклава) и фильтр небольшим количеством дистиллированной воды, затем добавляют 5 см³ смешанного реактива и доводят объем раствора в колбе до метки дистиллированной водой.

9.3 Через 15 минут измеряют оптическую плотность окрашенного раствора и холостой пробы на спектрофотометре или фотоэлектроколориметре при длине волны .

9.4 Определение фосфора фосфатов проводят по 9.2, поместив в колбу аликвоту профильтрованной пробы, в зависимости от предполагаемого содержания фосфатов.

10.1 Расчет массовой концентрации общего фосфора или фосфора фосфатов, Cр, мг/дм³, проводят по формуле:

где: K_гр - коэффициент градуировочной зависимости;

- оптическая плотность анализируемой пробы за вычетом холостой пробы;

V - объем аликвоты пробы, взятой для анализа, см³.

10.2 При необходимости выражения результата анализа содержания фосфора фосфатов в виде фосфат-ионов, полученный результат необходимо умножить на коэффициент пересчета равный 3,07.

10.3 Оформление результатов измерений

Результаты измерений массовой концентрации общего фосфора или фосфора фосфатов в документах, предусматривающих их использование, представляют в виде:

где: - абсолютная погрешность измерения массовой концентрации общего фосфора или фосфора фосфатов, мг/дм³, при доверительной вероятности P = 0,95, таблицы 1 и 2.

11.1 Контроль стабильности результатов измерений

Контроль стабильности результатов измерений в лаборатории осуществляют по ГОСТ Р ИСО 5725-6, раздел 6, используя методы контроля стабильности стандартного отклонения промежуточной прецизионности и контроля стабильности показателя правильности рутинного анализа. Средство контроля готовят из ГСО состава водных растворов фосфат-ионов, аналогично пункту 8.1.11. и анализируют согласно разделу 9. При построении контрольных карт для расчета пределов действия и предупреждения используют значения стандартного отклонения промежуточной прецизионности при различиях по факторам "время", "оператор", "оборудование" , приведенные в таблице 3.

Периодичность проведения контроля стабильности результатов измерений устанавливают индивидуально для каждой лаборатории в соответствии с документами по внутрилабораторному контролю качества результатов анализа.

При неудовлетворительных результатах контроля, например, превышение предела действия или регулярное превышение предела предупреждения, выясняют причины этих отклонений, в том числе повторяют градуировку прибора, проводят смену реактивов, проверяют работу оператора.

11.2. Контроль точности измерений при внедрении МВИ

При внедрении МВИ в практику работы лаборатории необходимо провести контроль точности результатов измерений массовой концентрации общего фосфора и фосфора фосфатов, используя метод добавок в пробы вод.

Для контроля берут не менее пяти проб разного состава, анализируемых в лаборатории. Каждую пробу делят на две части. Первую часть пробы анализируют в соответствии с разделом 9, получая результат измерений массовой концентрации общего фосфора или фосфора фосфатов (C). Во вторую часть пробы вводят добавку. Добавку готовят из ГСО состава водных растворов фосфат-ионов. Численное значение добавки рассчитывается таким образом, чтобы полученное после введения добавки значение массовой концентрации общего фосфора или фосфора фосфатов в пробе воды (C_к) удовлетворяло условию:

где C - экспериментально установленное значение массовой концентрации общего фосфора или фосфора фосфатов в пробе до введения добавки.

Измерение содержания общего фосфора и фосфора фосфатов в пробе воды с добавкой производят в тех же условиях, что и исходной пробы воды.

Результаты контроля признаются удовлетворительными, если выполняется условие:

где - действительное значение массовой концентрации общего фосфора или фосфора фосфатов в добавке;

и - абсолютная погрешность определения массовой концентрации общего фосфора или фосфора фосфатов в пробе с добавкой и в пробе без добавки (при P = 0,95).

Значения и рассчитываются по формулам:

где - значения границ интервала, в котором относительная погрешность находится с доверительной вероятностью P = 0,95, % (таблицы 1 и 2).

После внедрения МВИ в практику работы лаборатории при необходимости проверки приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости, проводят межлабораторные сравнительные испытания с использованием данной методики для оценки стандартного отклонения воспроизводимости. В случае невозможности организации межлабораторных сравнительных испытаний допускается, согласно МИ 2336-2002, оценить значение стандартного отклонения воспроизводимости, , по формуле: . Проверку приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости осуществляют по ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002, пункт 5.3.

Сопоставление альтернативных методов измерений проводят по ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002, раздел 8.

Инструкция для работы на деструкционной установке "TURBOTERM" фирмы "GERHARD" при выполнении измерений массовой концентрации фосфора общего в пробах питьевых, природных и сточных вод.

1. Поместите заполненный штатив с пробами в нижнее отделение двухуровневой стойки.

2. Удалите поддон и поместите узел удаления паров на штатив с пробирками TURBOTERM. Отгонка выходящих продуктов сгорания осуществляется через перевернутые стеклянные воронки с фторопластовыми уплотнениями. Убедитесь, что воронки плотно насажены на пробирки TURBOTERM.

3. Включите водоструйный насос (откройте водопроводный кран).

4. Включите прибор в сеть (розетка) и включите сетевой выключатель на панели прибора.

На лицевой панели дисплея должны появиться следующие надписи:

Дисплей режимов показывает номер программы (от 1 до 9).

На дисплее таймера отображено количество стадий нагревания (от H 0 до H 9).

5. Выберете нужную программу термической обработки проб нажатием клавишей "+" или "-".

Запустите работу прибора по выбранной программе нажатием клавиши RUN, после чего должно наблюдаться периодическое изменение яркости дисплея (мигание).

На дисплее режимов будет высвечиваться значение мощности нагревателя проб, на дисплее таймера - время, остающееся до окончания данной стадии нагревания.

Для ввода или корректировки программы необходимо произвести следующие действия:

А) Нажатием клавиши Prog, на дисплее кратковременно должна появиться надпись:

Б) Затем должен высветиться установленный режим первой стадии нагревания:

Параметры режима нагревания проб можно изменить, для этого необходимо нажать клавиши "+" или "-". Мигающая точка на дисплее означает, что прибор готов к изменению мощности нагревателя проб. С помощью клавиш "+" или "-" необходимо установить нужное значение мощности нагревателя проб.

После этого, если необходимо, изменить время нагревания, для этого следует нажать клавишу Time и аналогичным образом изменить число на дисплее таймера.

В) Нажатием клавиши Prog переходим ко второй стадии нагревания.

На дисплее должна появиться надпись:

Затем должен высветиться установленный режим второй стадии нагревания:

На второй стадии нагревания следует понизить мощность нагревателя до 50% - 70%, в зависимости от интенсивности кипения. Для изменения мощности и времени нагревания поступают в соответствии с п. 4 (Б).

Г) Если изменять установленные параметры не надо, то нажимаем клавишу "+", на дисплее должно высветиться:

Затем высвечивается установленный режим 3-й стадии нагревания

Д) Нажмите клавишу Stop. Должна высветиться первоначальная надпись:

Е) Для запуска откорректированной программы нажмите клавишу Run, при эта высвечивается режим первой стадии нагревания:

Экран дисплея будет мигать.

6. По окончании работы прибора по программе раздастся короткий звуковой сигнал и на дисплее таймера появится надпись End:

7. Для охлаждения нагретых пробирок с пробами следует удалить штатив с пробирками из нагревателя и поставить его на нижний упор. Во время охлаждения проб водоструйный насос должен оставаться включенным.

8. Выключить прибор из сети.

9. Выключить водоструйный насос.