"Временные методические указания по определению изатрина в растительном материале методом тонкослойной хроматографии"
(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 N 6070-91)

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

Изатрин (ресметрин, бензилфурон).

Действующее начало препарата - (+)-цис,транс(2-бензилфурил-4-метил)хризантемат. Полностью растворяется в 10% спирте этиловом с образованием бесцветной жидкости.

Внешний вид: воскоподобная масса, соломенно-желтого цвета, с резким запахом. Т. пл. 43 - 46 °C, Т. кип. 180 °C. Легко гидролизуется при действии кислот и щелочей. Препарат эффективен в малых дозировках (0,0025 - 0,01% действующего начала) в борьбе с широким рядом вредителей - инсектицид контактного действия.

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на экстракции изатрина органическим растворителем, очистке экстракта и последующем хроматографировании.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Диапазон определяемых концентраций - 0,02 - 0,4% мг/кг.

Предел обнаружения - 1 мкг.

Число параллельных определений - 5.

Стандартное отклонение (S, %) - +/- 8,5%.

Доверительный интервал определения при p = 0,95 и n = 5 87 +/- 10,5%.

Изатрин хч.

Бензол хч, ГОСТ 5955-81.

Гексан ч, ТУ 6-09-3375-78.

Ацетон ч, ГОСТ 2603-79.

Фосфорно-молибденовая кислота, ТУ 6-09-3540-78, 5% водный раствор.

Натрий сернокислый безводный, хч, ГОСТ 4166-76.

Систему подвижных растворителей готовят за 20 минут до хроматографирования: гексан - бензол в соотношении 1:1.

Стандартный раствор изатрина в хлороформе, содержащий 100 мкг/мл, готовили в мерной колбе из рабочего раствора.

Рабочий раствор готовят следующим образом: в мерную колбу (25 или 50 мл) со шлифом наливают 10 - 15 мл хлороформа, взвешивают, добавляют 1 - 2 капли изатрина, взвешивают и доводят объем до метки. По разнице весов между вторым и первым взвешиванием находят навеску пестицида, рассчитывают концентрацию его. Рабочие и стандартные растворы устойчивы в течение месяца при хранении в темном и прохладном месте.

Камера для хроматографирования, ГОСТ 25336-82.

Хроматографические пластинки "Силуфол" (ЧССР).

Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.

Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 25336-82.

Аппарат для встряхивания, ТУ 25-11-917-79.

Посуда лабораторная, ГОСТ 25336-82.

Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 мл.

Сушильный шкаф.

2.4.1. Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР, от 21.08.1979, за N 2051-79.

Навеску 25 - 40 г измельченного растительного материала помещают в коническую колбу емкостью 250 мл, приливают 80 мл смеси ацетон - вода в соотношении 1:1 по объему. Экстрагирование проводят встряхиванием в течение 30 мин. Экстракт отфильтровывают через бумажный фильтр. Экстракцию повторяют еще два раза. Объединяют экстракты и переносят в делительную воронку. Прибавляют 200 мл дистиллированной воды, перемешивают и реэкстрагируют изатрин дважды по 30 мл гексаном. Объединенный гексановый экстракт сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе при температуре водяной бани 40 °C до объема 0,2 - 0,5 мл.

2.5.1. Условия хроматографирования

Сконцентрированную пробу количественно наносят при помощи капиллярной пипетки на хроматографическую пластинку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 2 см от нижнего края пластинки. Справа и слева от пробы наносят стандартные растворы пестицида, содержащие 1, 2, 5, 10 мкг препарата.

Количество препарата в пробе определяют сравнением интенсивности окраски и площади пятен пробы и стандартного раствора.

Измерение площади проводится с помощью миллиметровой бумаги. Строится калибровочный график зависимости препарата в мкг от площади пятен. Прямолинейная зависимость между площадью пятна и содержанием препарата в пробе соблюдается в интервале 1 - 10 мкг. Если содержание препарата в пробе превышает верхнюю границу диапазона (10 мкг), то для нанесения на пластинку необходимо брать аликвотную часть пробы (0,1 - 0,2 мл) параллельной пробы. Содержание препарата в анализируемой пробе рассчитывают по формуле:

Соблюдать все требования безопасности, рекомендованные для работы с летучими органическими растворителями и со среднетоксичными пестицидами.