"Временные методические указания по определению сикарола в воде, почве и зерне методом газожидкостной хроматографии"
(утв. Минздравом СССР 27.04.1984 N 2992-84)

Действующее вещество - пиракарболид: 2-метил-5,6-дигидро-4-N-пиран-3-карбоксанилид.

Порошок светло-серого цвета. Точка плавления 106 - 107 °C. Растворимость в воде 600 мг/л при 25 °C (pH нейтральная), растворим в большинстве органических растворителей, слабо растворим в бензоле и циклогексане. Препарат стабилен в течение 2-х лет при нормальных условиях хранения.

Сикарол - системный фунгицид, предназначается для борьбы с базидиальными грибами. Рекомендуется для полевых испытаний против полегания сеянцев хвойных пород в питомниках с нормой расхода 5 - 10 г/кг и шютте сосны в концентрации 0,2 - 0,4%. МДУ и ПДК сикарола в воде и почве не установлены.

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на гидролитическом расщеплении сикарола раствором серной кислоты (1:4), ацилировании ангидридом полифторкарбоновой кислоты и определении образующегося производного методом ГЖХ с электронозахватным детектором.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода (n = 5) приведена в таблице.

Ацетон ч, ГОСТ 2603-79.

Хлороформ фарм., ТУ 6-09-4263-76.

Спирт этиловый хч, ТУ 6-09-1710-77.

Серная кислота концентрированная ч, ГОСТ 4203-77.

Натрия гидроокись хч, ГОСТ 4328-77, 15% раствор.

Натрий сернокислый безводный ч, ГОСТ 4166-76.

Кальций хлористый ч, ГОСТ 4460-77, 1% раствор.

3-Трифторметокси-2,2,3,3-тетрафторпропионовый ангидрид <...>

Т кип. = 112 - 114 °C или гептафтормасляный ангидрид <...>

Т кип. = 107 - 108 °C.

Газ для отдувки (воздух, азот, гелий, аргон).

Хроматом N AW DMCS (0,16 - 0,20 мм) С 5% XE-60 (ЧССР) или

Хроматом N Супер (0,16 - 0,20 мм) с 3% OV-17 (ЧССР).

Стандартный раствор N 1 сикарола в этиловом спирте с концентрацией 100 мкг/мл.

Стандартные растворы сикарола с концентрациями 1,0; 2,0; 4,0 мкг/мл готовят разбавлением стандартного раствора N 1 дистиллированной водой.

Хроматограф "Цвет-106" (или любой другой с детектором по захвату электронов).

Колонка стеклянная 1 м x 3 мм.

Ротационный испаритель вакуумный любого типа.

Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-75.

Баня водяная или масляная, ТУ 46-22-608-75.

Термометры электроконтактные до 100 °C и 150 °C, ГОСТ 9871-75.

Воронки делительные емкостью 100 мл, тип УШ, ГОСТ 8613-75.

Колбы круглодонные емкостью 100 мл, тип КККШ, ГОСТ 10394-72.

Колбы плоскодонные конические емкостью 100 мл и 25 мл, тип КН, ГОСТ 10394-72.

Холодильник с водяным охлаждением, тип ХПТ-КШ, ГОСТ 9499-70.

Воронки фильтрующие диаметром 20 мм, тип ВФ, ГОСТ 9775-69.

Воронки, тип 1а, ГОСТ 8613-75.

Пробирки градуированные со шлифом на 10 мл, тип ПГКШ, ГОСТ 10515-75.

Колбы мерные емкостью 50 мл, тип 1а, ГОСТ 1770-74.

Пипетки емкостью 1, 5, 10 мл, ГОСТ 20292-74.

Микрошприцы на 10 мкл МШ-10.

Индикаторная бумага универсальная, ТУ 6-09-1181-71.

Фильтры бумажные.

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб для определения микроколичеств пестицидов в сельскохозяйственной продукции, продуктах питания и объектах окружающей среды", утвержденным Заместителем Главного государственного санитарного врача СССР, N 2051-79.

2.5.1. Экстракция

Вода. Пробу воды объемом 100 мл экстрагируют в делительной воронке хлороформом порциями по 20 мл и два раза по 10 мл при встряхивании в течение двух минут. Экстракты объединяют и отделяют растворитель на ротационном испарителе при температуре бани 50 °C.

Почва. Анализируемую навеску (10 г) помещают в плоскодонную коническую колбу емкостью 100 мл и приливают 30 мл экстрагента (смесь равных объемов ацетона и 1% водного раствора хлористого кальция). Встряхивают колбу на аппарате для встряхивания 30 мин., отфильтровывают экстракт через бумажный фильтр. Операцию повторяют и смывают колбу и фильтрат 10 мл экстрагента. Из объединенного экстракта отгоняют ацетон на ротационном испарителе при 50 °C. Водный остаток переносят в делительную воронку, в колбу для отгонки приливают 10 мл хлороформа, энергично встряхивают несколько раз и переносят хлороформ в делительную воронку. Сикарол экстрагируют в делительной воронке этим хлороформом и еще два раза порциями по 5 мл при встряхивании в течение двух минут. Экстракты объединяют и отгоняют растворитель на ротационном испарителе при температуре бани 50 °C до 1 - 2 капель. Остаток растворителя удаляют в токе воздуха.

Зерно. Анализируемую навеску (10 г) помещают в плоскодонную коническую колбу емкостью 100 мл и приливают 15 мл этанола. Встряхивают колбу на аппарате для встряхивания 30 мин., отфильтровывают экстракт через бумажный фильтр. Промывают осадок на фильтре 5 мл эталона. Экстракт разбавляют дистиллированной водой до объема 100 мл. Водный раствор переносят в делительную воронку, приливают 20 мл хлороформа и энергично встряхивают. Хлороформ пропускают через 0,5 см слой безводного сульфата натрия. Операцию повторяют дважды, используя по 10 мл хлороформа. Экстракты объединяют и отгоняют растворитель на ротационном испарителе при температуре бани 50 °C до 1 - 2 капель. Остаток растворителя удаляют в токе воздуха.

2.5.2. Гидролиз, получение производных для ГЖХ и количественное определение

Приливают в колбы 4,0 мл воды и 1,0 мл концентрированной серной кислоты и выдерживают 0,5 часа при 120 °C с обратным холодильником. Охлаждают, смывают стенки и шлиф холодильника 5 мл воды, приливают в колбу 5 мл бензола, а затем нейтрализуют при охлаждении 15% раствором гидроокиси натрия до pH 10, контролируя по универсальной индикаторной бумаге. Закрывают колбу притертой пробкой и энергично встряхивают в течение минуты, затем переливают содержимое колбы в делительную воронку. Отделяют бензольный слой и фильтруют его через 0,5 см слой безводного сульфата натрия, засыпанного в фильтрующую воронку. Из фильтрата пипеткой отбирают 0,5 мл раствора, переносят в градуированную пробирку и прикапывают микрошприцем 2 мкл реагента - ангидрида 3-трифторметокси-2,2,3,3-тетрафторпропионовой кислоты. Через 5 мин. помещают пробирку в стаканчик с водой комнатной температуры, растворитель и избыток реагента отдувают через стеклянный капилляр в токе воздуха или инертного газа, не допуская сильного вспенивания, до 1 - 2 капель раствора. К остатку приливают 0,5 мл гексана, встряхивают и вводят 5 мкл раствора в хроматограф.

Газ-носитель - аргон ч или азот осч.

При использовании азота осч чувствительность детектирования в 4 - 5 раз выше.

Скорость газа-носителя на продувку детектора - 150 мл/мин.

Скорость газа-носителя через колонку - 45 мл/мин.

Температура испарителя - 250 °C, термостата детектора - 250 °C, колонки (ЖЕ-60) - 140 °C.

Время удерживания: абсолютное - 2 мин. 31 с, относительное (относительно гексахлорбензола) - 0,37.

Линейный динамический диапазон детектирования (по сикаролу) 0,02 - 2,0 нг.

Количественное определение проводят по калибровочному графику. Для построения калибровочного графика вносят по 0,5 мл стандартного раствора сикарола, содержащего 1,0, 2,0, 4,0 мкг сикарола, приливают 3,5 мл воды и 1,0 мл серной кислоты и проводят гидролиз, ацилирование, ГЖХ-анализ так, как описано выше.

Строят график зависимости H = f(C),

где:

H - высота пика, мм;

C - содержание сикарола в стандартном растворе, мкг.

Содержание сикарола в анализируемой пробе рассчитывают по уравнению:

где:

X - содержание препарата в анализируемой пробе, мг/кг (мг/л);

A - количество препарата, найденное по калибровочному графику, мкг;

P - количество анализируемой пробы, г (мл).

Соблюдаются обычные требования по технике безопасности, применяемые при работе с органическими растворителями, кислотами и щелочами. Работа с фторированным ангидридом проводится в вытяжном шкафу.