"ФС.2.1.0671. Фармакопейная статья. Бупивакаина гидрохлорид моногидрат. Бупивакаин"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 N 120)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2RS)-1-Бутил-N-(2,6-диметилфенил)пиперидин-2-карбоксамида гидрохлорид моногидрат.

Содержит не менее 98,5% и не более 101,0% бупивакаина гидрохлорида C₁₈H₂₈N₂O·HCl в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96%, растворим в воде, мало растворим в хлороформе.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца бупивакаина гидрохлорида.

2. Тонкослойная хроматография. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции бупивакаина на хроматограмме раствора стандартного образца бупивакаина.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25% - метанол 0,1:100.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца бупивакаина. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца бупивакаина, растворяют в метаноле и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Реактив для детектирования. Калия йодовисмутата раствор разведенный.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца бупивакаина. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования и просматривают в видимом свете.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС "Общие реакции на подлинность").

ИСПЫТАНИЯ

Угол вращения. От -0,10° до +0,10° в пересчете на сухое вещество (5% раствор субстанции в метаноле, ОФС "Оптическое вращение").

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС "Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей").

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен быть бесцветным (ОФС "Степень окраски жидкостей").

Кислотность или щелочность. К 10 мл раствора, полученного в испытании "Прозрачность раствора", прибавляют 0,2 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М; pH полученного раствора должен быть не менее 4,7.

К полученному раствору прибавляют 0,4 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М; pH полученного раствора должен быть не более 4,7.

1. Примесь F. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 0,23 г натрия дигидрофосфата моногидрата и 3,626 г динатрия гидрофосфата дигидрата в 900 мл воды, доводят значение pH раствора фосфорной кислотой концентрированной или натрия гидроксида раствором 10% до 8,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки. Смешивают равные объемы полученного раствора и ацетонитрила.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФА и доводят объем раствора ПФА до метки.

Раствор стандартного образца примеси F. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси F, растворяют в ПФА и доводят объем раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца примеси F и 20 мг метилбензоата, растворяют в ПФА и доводят объем раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 3,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь F: 2,6-Диметиланилин [87-62-7].

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси F и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Бупивакаин - 1 (около 20 мин); примесь F - около 0,3; метилбензоат - около 0,4.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками примеси F и метилбензоата должно быть не менее 4,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца примеси F:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси F должно быть не менее 40.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси F не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца примеси F (не более 0,001%).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС "Газовая хроматография").

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают около 25 мг метилбегената, растворяют в метиленхлориде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. Растворяют около 50 мг субстанции в 2,5 мл воды, прибавляют 2,5 мл натрия гидроксида раствора 2 М и дважды экстрагируют порциями раствора внутреннего стандарта по 5 мл; нижний слой отделяют и фильтруют.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора раствором внутреннего стандарта до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения А и доводят объем раствора раствором внутреннего стандарта до метки.

Раствор сравнения В. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения А и доводят объем раствора раствором внутреннего стандарта до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 10 мг субстанции, 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси B и 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси E в 2,5 мл воды, прибавляют 2,5 мл раствора натрия гидроксида 10% и дважды экстрагируют порциями раствора внутреннего стандарта по 5 мл; нижний слой отделяют и фильтруют. Полученный фильтрат помещают в мерную колбу вместимостью 20 мл и доводят объем раствора раствором внутреннего стандарта до метки.

Примечание

Примесь B: (2RS)-N-(2,6-Диметилфенил)пиперидин-2-карбоксамид [15883-20-2].

Примесь E: 6-(Бутиламино)-N-(2,6-диметилфенил)гексанамид [1330172-81-0].

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, растворы сравнения А, Б, В и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Бупивакаин - 1 (около 10 мин); примесь B - около 0,7; примесь E - около 1,1; внутренний стандарт - около 1,4.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (R_S) между пиками бупивакаина и примеси E должно быть не менее 3,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- отношение площадей пиков примеси B и внутреннего стандарта должно быть не более отношения площадей пиков бупивакаина и внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,5%);

- отношение площадей пиков любой другой примеси и внутреннего стандарта должно быть не более отношения площадей пиков бупивакаина и внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения В (не более 0,1%);

- отношение суммы площадей пиков примесей и внутреннего стандарта должно быть не более отношения площадей пиков бупивакаина и внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения А (не более 1,0%).

Не учитывают примеси, для которых отношение площади пика к площади внутреннего стандарта меньше отношения площадей пиков бупивакаина и внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения А (менее 0,05%).

Вода. Не менее 4,0% и не более 6,0% (ОФС "Определение воды", метод 1).

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС "Тяжелые металлы" (метод 5) в зольном остатке, полученном в испытании "Сульфатная зола".

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,4 ЕЭ на 1 мг бупивакаина гидрохлорида (ОФС "Бактериальные эндотоксины").

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС "Титриметрия (титриметрические методы анализа)").

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в смеси 20 мл воды и 25 мл спирта 96%, прибавляют 5,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида этанольным.

Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС "Потенциометрическое титрование"). Учитывают расход титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида этанольного соответствует 32,49 мг бупивакаина гидрохлорида C₁₈H₂₈N₂O·HCl.

ХРАНЕНИЕ

В хорошо укупоренной упаковке, в защищенном от света месте.