"ФС.2.1.0355. Фармакопейная статья. Фосфазид"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

[-D-3-Азидо-1-(5-метил-2,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидропиримидин-1-ил)-1,2,3-тридезоксирибофуранозил-5]фосфонат натрия.

Содержит не менее 96,0% и не более 102,0% фосфазида C₁₀H₁₃N₅NaO₆P в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком порошок с характерным запахом.

<*> Гигроскопичен.

--------------------------------

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96%, практически нерастворим в хлороформе и гексане.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Спектрофотометрия (ОФС "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях").

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 5 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 нм до 350 нм должен иметь максимум поглощения при 266 нм и минимум поглощения при 234 нм. В качестве раствора сравнения используют воду.

2. Качественная реакция. Растворяют 150 мг субстанции в 2 мл воды. Полученный раствор должен давать характерную реакцию А на натрий (ОФС "Общие реакции на подлинность").

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +22 до +28 в пересчете на безводное вещество (1% раствор субстанции в воде, ОФС "Оптическое вращение").

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС "Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей").

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен выдерживать сравнение с эталоном Y₇ (ОФС "Степень окраски жидкостей", метод 2).

pH раствора. От 6,5 до 8,5 (1% раствор, ОФС "Ионометрия", метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография"). Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол - аммония ацетата раствор 0,05 М 50:950.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде, при необходимости выдерживают на ультразвуковой бане в течение 5 мин, не допуская нагревания, и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца фосфазида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца фосфазида, растворяют в воде, при необходимости выдерживают на ультразвуковой бане в течение 5 мин, не допуская нагревания, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца фосфазида и доводят объем раствора водой до метки.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца фосфазида и испытуемый раствор.

<**> Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика фосфазида должно быть не менее 10.

--------------------------------

<**> Перед проведением испытания должна быть проверена разделительная способность хроматографической системы.

На хроматограмме раствора стандартного образца фосфазида:

- фактор асимметрии пика (A_S) фосфазида должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика фосфазида должно быть не более 2,0% (6 введений).

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика фосфазида на хроматограмме раствора стандартного образца фосфазида;

a₀ - навеска фармакопейного стандартного образца фосфазида, мг;

a₁ - навеска субстанции, мг;

P - содержание фосфазида в фармакопейном стандартном образце фосфазида, %.

- любая примесь - не более 1,0%;

- сумма всех примесей - не более 3,0%.

Вода. Не более 2,0% (ОФС "Определение воды", метод 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС "Тяжелые металлы" (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании "Сульфатная зола", с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания "Родственные примеси" со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца фосфазида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца фосфазида, растворяют в воде, при необходимости выдерживают на ультразвуковой бане в течение 5 мин, не допуская нагревания, и доводят объем раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

На хроматограмме раствора стандартного образца фосфазида относительное стандартное отклонение площади пика фосфазида должно быть не более 2,0% (6 введений).

Содержание фосфазида C₁₀H₁₃N₅NaO₆P в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика фосфазида на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика фосфазида на хроматограмме раствора стандартного образца фосфазида;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска фармакопейного стандартного образца фосфазида, мг;

P - содержание фосфазида в фармакопейном стандартном образце фосфазида, %;

W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

В сухом, защищенном от света месте.