"ФС.2.1.0314. Фармакопейная статья. Цефепима дигидрохлорид моногидрат. Цефепим"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

(6R,7R)-7-[(2Z)-2-(2-Амино-1,3-тиазол-4-ил)-2-(метоксиимино)ацетамидо]-3-[(1-метилпирролидин-1-ий-1-ил)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилата дигидрохлорид моногидрат.

Содержит не менее 97,0% и не более 102,0% цефепима дигидрохлорида C₁₉H₂₄N₆O₅S₂·2HCl в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде и метаноле, практически нерастворим в метиленхлориде.

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика цефепима на хроматограмме раствора стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата (раздел "Количественное определение").

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС "Общие реакции на подлинность").

Удельное вращение. От +40 до +45 в пересчете на безводное вещество (1% раствор субстанции в воде, ОФС "Оптическое вращение").

Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС "Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей").

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен выдерживать сравнение с эталоном Y₃ (ОФС "Степень окраски жидкостей", метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

1. Примесь G. Не более 0,5%.

Все растворы готовят непосредственно перед использованием.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил - азотной кислоты 0,01 М раствор 10:1000. Фильтруют через фильтр с размером пор 0,2 мкм.

Растворитель. Азотной кислоты 0,01 М раствор.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор N-метилпирролидина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,25 г (точная навеска) N-метилпирролидина (примесь G, 1-метилпирролидин [120-94-5]) и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,25 г пирролидина, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки. Смешивают 5,0 мл полученного раствора и 5,0 мл раствора N-метилпирролидина.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор N-метилпирролидина и испытуемый раствор.

Время удерживания цефепима - около 50 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками пирролидина и примеси G должно быть не менее 3.

На хроматограмме раствора N-метилпирролидина:

- фактор асимметрии пика (A_S) примеси G должен быть не более 2,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика примеси G должно быть не более 5,0% (6 введений).

Содержание примеси G в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика примеси G на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика N-метилпирролидина на хроматограмме раствора N-метилпирролидина;

a₁ - навеска субстанции, г;

a₀ - навеска N-метилпирролидина, г;

P - содержание основного вещества в N-метилпирролидине, %.

Все растворы готовят непосредственно перед использованием или хранят при температуре 4 - 8 °C не более 12 ч.

Буферный раствор. Растворяют 0,68 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят pH раствора калия гидроксида раствором 0,5 М до 5,00. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил - буферный раствор 100:900.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил - буферный раствор 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 70 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объем раствора тем же растворителем до метки, обрабатывают ультразвуком в течение 30 с и перемешивают в течение 5 мин.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФА до метки.

Раствор стандартного образца примеси E. В мерную колбу вместимость 25 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси E, растворяют в ПФА и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 7 мг фармакопейного стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата для проверки пригодности системы, содержащего примеси A, B, F, растворяют в ПФА и доводят объем раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь A: (6R,7R)-7-[(2E)-2-(2-амино-1,3-тиазол-4-ил)-2-(метоксиимино)ацетамидо]-3-[(1-метилпирролидин-1-ий-1-ил)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат [149261-27-8].

Примесь B: (6R,7R)-7-[(2Z)-2-[(2Z)-2-(2-амино-1,3-тиазол-4-ил)-2-(метоксиимино)ацетамидо]-1,3-тиазол-4-ил]-2-(метоксиимино)ацетамидо]-3-[(1-метилпирролидин-1-ий-1-ил)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат.

Примесь E: (6R,7R)-7-амино-3-[(1-метилпирролидин-1-ий-1-ил)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат [103296-32-8].

Примесь F: (6R,7R)-7-[(6R,7R)-7-[(2Z)-2-(2-амино-1,3-тиазол-4-ил)-2-(метоксиимино)ацетамидо]-3-[(1-метилпирролидин-1-ий-1-ил)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксамидо]-3-[(1-метилпирролидин-1-ий-1-ил)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат (катион).

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси E, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Цефепим - 1 (около 7 мин); примесь E - около 0,4; примесь F - около 0,8; примесь A - около 2,5; примесь B - около 4,1.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, F используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу цефепима дигидрохлорида моногидрата для проверки пригодности системы. Для идентификации пика примеси E используют хроматограмму раствора стандартного образца примеси E.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками примеси F и цефепима должно быть не менее 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчета содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь A - 1,4, примесь B - 1,4; примесь E - 1,8.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика цефепима на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3%);

- площадь пика каждой из примесей B и F не должна превышать площадь пика цефепима на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%);

- площадь пика примеси E не должна превышать 0,5 площади пика цефепима на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика цефепима на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика цефепима на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0%).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,25 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05%).

Вода. От 3,0 до 4,5% (ОФС "Определение воды", метод 1). Для определения используют 0,4 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,002% Определение проводят в соответствии с ОФС "Тяжелые металлы" (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании "Сульфатная зола", с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

<*> Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС "Аномальная токсичность"). Тест-доза - 20 мг цефепима в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Скорость введения 0,1 мл/с. Срок наблюдения - 48 ч.

<*> Бактериальные эндотоксины. Не более 0,04 ЕЭ на 1 мг цефепима (ОФС "Бактериальные эндотоксины").

<*> Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС "Стерильность").

--------------------------------

<*> Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания "Родственные примеси. Другие примеси" со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). ПФА.

Раствор стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 70 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата, растворяют в ПФА и доводят объем раствора тем же растворителем до метки, обрабатывают ультразвуком в течение 30 с и перемешивают в течение 5 мин.

Хроматографируют раствор стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата и испытуемый раствор.

Содержание цефепима дигидрохлорида C₁₉H₂₄N₆O₅S₂·2HCl в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика цефепима на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика цефепима на хроматограмме раствора стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска фармакопейного стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата, мг;

W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;

P - содержание цефепима дигидрохлорида в фармакопейном стандартном образце цефепима дигидрохлорида моногидрата, %.

В герметично укупоренной стерильной упаковке, в защищенном от света месте.