"ФС.2.1.0513. Фармакопейная статья. Налоксона гидрохлорид дигидрат. Налоксон"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

3,14-Дигидрокси-17-(проп-2-ен-1-ил)-4,5-эпоксиморфинан-6-она гидрохлорид дигидрат).

Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% налоксона гидрохлорида C₁₉H₂₁NO₄-HCl в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

<*> Гигроскопичен.

--------------------------------

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно или мало растворим в спирте 96%.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца налоксона гидрохлорида дигидрата.

2. ТСХ (ОФС "Тонкослойная хроматография").

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол - смесь растворителей 5:95.

Растворитель. Аммиака раствор 2 М - бутанол 36:60; используют верхний слой.

Испытуемый раствор. Растворяют 8 мг субстанции в 0,5 мл воды и доводят объем раствора метанолом до 1 мл.

Раствор стандартного образца налоксона гидрохлорида дигидрата. Растворяют 8 мг фармакопейного стандартного образца налоксона гидрохлорида дигидрата в 0,5 мл воды и доводят объем раствора метанолом до 1 мл.

Реактив для детектирования. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г калия феррицианида, растворяют в железа (III) хлорида растворе 10,5% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца налоксона гидрохлорида дигидрата. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования и просматривают в видимом свете.

Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции налоксона на хроматограмме раствора стандартного образца налоксона гидрохлорида дигидрата.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС "Общие реакции на подлинность").

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От -170 до -181 в пересчете на безводное вещество (2% раствор субстанции в воде, свободной от углерода диоксида, ОФС "Оптическое вращение").

Прозрачность раствора. Раствор субстанции 2% в воде должен быть прозрачным (ОФС "Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей").

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен выдерживать сравнение с эталоном B₉ (ОФС "Степень окраски жидкостей", метод 2).

Кислотность или щелочность. К 10 мл раствора, полученного в испытании "Прозрачность раствора", прибавляют 50 мкл метилового красного раствора 0,05%. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 0,2 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида или 0,2 мл 0,02 М раствора хлористоводородной кислоты.

1. Примесь D. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Буферный раствор. Растворяют 1,58 г аммония гидрокарбоната в 950 мл воды и доводят значение pH аммиака раствором концентрированным 25% до 9,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил - буферный раствор 200:800.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил - буферный раствор 400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 1% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси D. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 1% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 1% до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца примеси D и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 1% до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 4,0 мл испытуемого раствора, 2,0 мл раствора стандартного образца примеси D и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 1% до метки.

Примечание

Примесь D: 3,14-Дигидрокси-7,8-дидегидро-17-(проп-2-ен-1-ил)-4,5-эпоксиморфинан-6-он [26451-92-3].

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Налоксон - 1 (около 50 мин), примесь D - около 0,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси D используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (R_S) между пиками примеси D и налоксона должно быть не менее 5;

- фактор асимметрии пика (A_S) примеси D должен быть не более 1,8.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси D не должна превышать 1,5 площади пика примеси D на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,0075%).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Буферный раствор. Растворяют 1,1 г натрия октансульфоната в 950 мл воды и доводят значение pH фосфорной кислотой разведенной 42,5% до 2,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил - тетрагидрофуран - буферный раствор 20:40:940.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Тетрагидрофуран - ацетонитрил - буферный раствор 40:170:790.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,125 г субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 1% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 1% до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 1% до метки.

Раствор для идентификации. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца налоксона для идентификации пиков, содержащего примеси A, B, C, D, E и F в 1,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 1%.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл раствора сравнения и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 1% до метки.

Примечание

Примесь A: 3,14-дигидрокси-4,5-эпоксиморфинан-6-он [33522-95-1].

Примесь B: 14-дигидрокси-17-(проп-2-ен-1-ил)-3-[(проп-2-ен-1-ил) окси]-4,5-эпоксиморфинан-6-он [1352085-46-1].

Примесь C: 3,10,14-тригидрокси-17-(проп-2-ен-1-ил)-4,5-эпоксиморфинан-6-он [2139253-68-0].

Примесь E: 3,3',14,14'-тетрагидрокси-17,17'-бис(проп-2-ен-1-ил)-4,5:4',5'-диэпокси[2,2'-биморфинан]-6,6'-дион [211738-08-8].

Примесь F: 3,10,14-тригидрокси-17-(проп-2-ен-1-ил)-4,5-эпоксиморфинан-6-он [2139253-69-1].

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для идентификации, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Налоксон - 1 (около 11 мин); примесь C - около 0,6; примесь A - около 0,8; примесь F - около 0,9; примесь D - около 1,1; примесь E - около 3,0; примесь B - около 3,2.

Идентификация примеси. Для идентификации пиков примесей A, B, C, D, E и F относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для идентификации.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика налоксона должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для идентификации пиков отношение максимум/минимум (p/v) между высотой пика примеси D над нулевой линией и расстоянием от наиболее низко расположенной точки кривой, отделяющей пик примеси D от пика налоксона, над нулевой линией должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (A_S) налоксона должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика налоксона должно быть не более 5,0%.

Поправочный коэффициент. Для расчета содержания площадь пика примеси E умножают на 0,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A, B, C, E и F не должна превышать площадь пика налоксона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика налоксона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать четырехкратную площадь пика налоксона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,8%).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).

Вода. От 7,5% до 11,0% (ОФС "Определение воды", метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Бактериальные эндотоксины. Не более 35 ЕЭ на 1 мг налоксона гидрохлорида (ОФС "Бактериальные эндотоксины").

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС "Титриметрия (титриметрические методы анализа)").

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 50 мл спирта 96%, прибавляют 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида, приготовленном в этаноле. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС "Потенциометрическое титрование"). Учитывают объем титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида этанольного соответствует 36,38 мг налоксона гидрохлорида C₁₉H₂₁NO₄-HCl.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке, в защищенном от света месте.