"ФС.2.1.0662. Фармакопейная статья. Диданозин"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

9-(2,3-Дидезокси--D-глицеро-пентофуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он.

Содержит не менее 98,5% и не более 101,0% диданозина C₂₇H₃₇N₃O₇S в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилсульфоксиде, умеренно растворим в воде, мало растворим в этаноле 96% и метаноле.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца диданозина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика диданозина на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (раздел "Родственные примеси").

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От -24,2 до -28,2 в пересчете на безводное вещество (1,0% раствор субстанции в воде, ОФС "Оптическое вращение").

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС "Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей").

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен быть прозрачным (ОФС "Степень окраски жидкостей", метод 2).

pH раствора. От 4,0 до 7,2 (2% раствор, ОФС "Ионометрия", метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Все растворы готовят непосредственно перед использованием.

Буферный раствор. Растворяют 3,86 г аммония ацетата в 800 мл воды и доводят pH раствора аммиака раствором 25% до 8,0. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол - буферный раствор 80:920.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол - буферный раствор 300:700.

Растворитель. ПФБ - ПФА 80:920.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси A. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси A, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси G. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси G, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца диданозина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси от A до F, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: 1,7-дигидро-6H-пурин-6-он [68-94-0].

Примесь B: 9-(-D-рибофуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он [58-63-9].

Примесь C: 9-(2-дезокси--D-эритро-пентофуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он [890-38-0].

Примесь D: 9-(3-дезокси--D-эритро-пентофуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он [13146-72-0].

Примесь E: 9-(2,3-ангидро--D-рибофуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он [31766-13-9].

Примесь F: 9-(2,3-дидезокси--D-глицеро-пент-2-ен-фуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он [42867-68-5].

Примесь G: 9-(2,3-дидезокси--D-глицеро-пентофуранозил)-9H-пурин-6-амин [4097-22-7].

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси G, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Диданозин - 1 (около 14 мин); примесь A - около 0,3; примесь B - около 0,4; примесь C - около 0,44; примесь D - около 0,48; примесь E - около 0,5; примесь F - около 0,8; примесь G - около 1,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, C, D, E и F используется хроматограмма раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы, хроматограмма, прилагаемая к стандартному образцу диданозина для проверки пригодности системы, и относительное время удерживания соединений. Для идентификации пика примеси G используется хроматограмма раствора стандартного образца примеси G.

Проверка пригодности хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками примесей C и D должно быть не менее 2,5.

Поправочный коэффициент. Для расчета содержания площадь пика примеси A умножают на 0,59.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца примеси A (не более 0,5%);

- площадь пика каждой из примесей B, C, D, E, F, G не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения каждая (не более 0,2%);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0%);

- не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05%).

Вода. Не более 2,0% (ОФС "Определение воды", метод 1). Для определения используют около 0,5 г субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС "Тяжелые металлы" (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании "Сульфатная зола", с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС "Титриметрия (титриметрические методы анализа)").

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС "Потенциометрическое титрование"), используя стеклянный индикаторный электрод.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 23,62 мг диданозина C₁₀H₁₂N₄O₃.

ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке.