"ФС.2.1.0609. Фармакопейная статья. Ифосфамид"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

(2RS)-3-(2-Хлорэтил)-2-[(2-хлорэтил)амино]-1,3,2-оксазафосфинан-2-он.

Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% ифосфамида C₇H₁₅Cl₂N₂O₂P в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Описание. Белый или почти белый мелкокристаллический порошок.

<*> Гигроскопичен.

--------------------------------

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Растворим в воде, легко растворим в метиленхлориде.

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ифосфамида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика ифосфамида на хроматограмме раствора стандартного образца ифосфамида (раздел "Количественное определение").

Угол вращения. От -0,10° до +0,10° (10% раствор субстанции, ОФС "Оптическое вращение").

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 10 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен выдерживать сравнение с эталоном 1 (ОФС "Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей").

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен выдерживать сравнение с эталоном Y₇ (ОФС "Степень окраски жидкостей", метод 2).

Кислотность или щелочность. Готовят раствор 0,5 г субстанции в 50 мл воды, свободной от углерода диоксида. К 10 мл раствора прибавляют 0,1 мл метилового красного раствор 0,05%. Для изменения окраски раствора на красную должно потребоваться не более 0,1 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М. К 10 мл раствора прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствор 0,1%. Для изменения окраски раствора на розовую должно потребоваться не более 0,3 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М.

pH раствора. От 4,0 до 7,0 (10% раствор субстанции в воде, ОФС "Ионометрия", метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС "Тонкослойная хроматография").

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Растворитель. Метанол - метиленхлорид 1:1.

Подвижная фаза (ПФ). Метиленхлорид - ацетон 1:10.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,200 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси E ифосфамида и 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси F ифосфамида, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси E ифосфамида и 10 мг фармакопейного стандартного образца ифосфамида, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь E: 3-хлор-N-(2-хлорэтил)пропан-1-амин [42453-19-0].

Примесь F: (2RS)-2-хлор-3-(2-хлорэтил)-1,3,2-оксазафосфинан-2-он [40722-73-4].

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (100 мкг), стандартного раствора (по 0,25 мкг примеси E и примеси F) и раствора для проверки пригодности хроматографической системы (по 0,5 мкг примеси E и фармакопейного стандартного образца ифосфамида). Пластинку с нанесенными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителей и нагревают при температуре 115 °C в течение 45 мин.

Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы четко видны две зоны адсорбции.

Зона адсорбции каждой из примесей E и F на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать соответствующую зону адсорбции на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,25%).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Растворитель. Метанол - вода 1:1.

Подвижная фаза (ПФ). Вода - метанол - уксусная кислота безводная - метиленхлорид 10:15:25:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,00 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси A ифосфамида и 25 мг 2-хлорэтиламина гидрохлорида (примесь C в форме гидрохлорида), растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси B ифосфамида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси B ифосфамида, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг этаноламина (примесь D), 20 мг фармакопейного стандартного образца примеси A ифосфамида, 80 мг 2-хлорэтиламина гидрохлорида (примесь C в форме гидрохлорида), растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: (3-{[(2-хлорэтил)амино]пропокси})дигидрофосфат [22608-58-8].

Примесь B: 1,3-бис(3-{[(2-хлорэтил)амино]пропокси})дигидродифосфат [241482-18-8].

Примесь C: (2-хлорэтиламин), 2-хлорэтан-1-амин [689-98-5].

Примесь D: (этаноламин), 2-аминоэтан-1-ол [141-43-5].

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (1000 мкг), стандартного раствора (по 2,5 мкг примеси A и примеси C), раствора стандартного образца примеси B ифосфамида (1,5 мкг) и раствора для проверки пригодности хроматографической системы (по 0,5 мкг примеси D, 2 мкг примеси A, 8 мкг примеси C в форме гидрохлорида). Пластинку с нанесенными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителей и нагревают при температуре 115 °C в течение 45 мин.

На дно другой камеры помещают выпарительную чашу с калия перманганата раствором 0,02 М, добавляют равный объем хлористоводородной кислоты разведенной 7,3%, камеру закрывают и оставляют на 10 мин. Горячую пластинку помещают в эту камеру, избегая контакта пластинки с раствором, закрывают камеру и выдерживают в течение 20 мин. Затем пластинку вынимают из камеры и сушат в токе холодного воздуха до удаления избытка хлора (около 20 мин) и пока поверхность пластинки ниже линии старта не будет давать синего окрашивания при нанесении 0,05 мл крахмала раствора с калия йодидом. Опрыскивают пластинку тетраметилбензидина спиртовым раствором 0,1% в течение 5 с, дают пластинке высохнуть и просматривают.

Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы четко видны три зоны адсорбции.

Зона адсорбции каждой из примесей A и C на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать соответствующую зону адсорбции на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,25%).

Зона адсорбции примеси B на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать соответствующую зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца примеси B ифосфамида (не более 0,15%).

Любая другая зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбцию на хроматограмме раствора стандартного образца примеси B ифосфамида (не более 0,15%).

Хлориды. Не более 0,01% (ОФС "Хлориды"). Растворяют 0,2 г субстанции в 10 мл воды.

Вода. Не более 0,5% (ОФС "Определение воды", метод 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,002% (ОФС "Тяжелые металлы", метод 2). Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл воды.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,0625 ЕЭ на 1 мг ифосфамида (ОФС "Бактериальные эндотоксины").

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС "Стерильность").

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Срок годности растворов 24 ч.

Этилпарагидроксибензоата раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50,0 мг этилпарагидроксибензоата, растворяют в 25 мл спирта 96%, доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил - вода 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 0,15 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 10,0 мл этилпарагидроксибензоата раствора, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 15 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ифосфамида и 1,0 мл этилпарагидроксибензоата раствора, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.

Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (R_S) между пиками ифосфамида и этилпарагидроксибензоата должно быть не менее 6,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика ифосфамида должно быть не более 2,0% (6 введений).

Содержание ифосфамида C₇H₁₅Cl₂N₂O₂P в субстанции в пересчете на безводное и свободное от органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика ифосфамида на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика ифосфамида на хроматограмме стандартного раствора;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска фармакопейного стандартного образца ифосфамида, мг;

W - содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;

P - содержание ифосфамида в фармакопейном стандартном образце ифосфамида, %.

В герметично укупоренной упаковке.