"ФС.2.1.0596. Фармакопейная статья. Зидовудин"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

1-(3-Азидо-2,3-дидезокси--D-эритро-пентофуранозил)-5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион.

Содержит не менее 97,0% и не более 102,0% зидовудина C₁₀H₁₃N₅O₄ в пересчете на безводное и свободное от остаточных растворителей вещество.

Описание. Белый или почти белый с коричневатым оттенком кристаллический порошок.

<*> Проявляет полиморфизм.

--------------------------------

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Легко растворим в метаноле, растворим в спирте 96%, умеренно растворим в воде.

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца зидовудина.

Если спектры различаются, субстанцию и фармакопейный стандартный образец зидовудина по отдельности растворяют в минимальном количестве воды, упаривают в вакууме, высушивают в вакуумном эксикаторе над фосфора(V) оксидом и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика зидовудина на хроматограмме стандартного раствора (раздел "Количественное определение").

Удельное вращение. От +60,5 до +63,0 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (1% раствор субстанции в спирте 96%, ОФС "Оптическое вращение").

Прозрачность раствора. Раствор 0,25 г субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным (ОФС "Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей"). При необходимости раствор подогревают.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен выдерживать сравнение с эталоном BY₅ (ОФС "Степень окраски жидкостей", метод 2).

pH раствора. От 5,0 до 7,0 (1% раствор, ОФС "Ионометрия", метод 3).

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Сумма примесей, определенная методами 1 и 2, - не более 1,0%.

Буферный раствор. Растворяют 2,0 г ацетата аммония в 850 мл воды, доводят pH до 6,80 уксусной кислотой разведенной 12%. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Ацетонитрил - метанол - буферный раствор 4:20:76.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси B. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси B, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца зидовудина для проверки пригодности системы, содержащего примесь G, растворяют в растворе стандартного образца примеси B и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси D. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 мг фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в смеси растворителей (ацетонитрил - метанол - буферный раствор 4:40:56) и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора той же смесью растворителей до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: 1-(2,3-дидезокси--D-глицеро-пент-2-ен-фуранозил)-5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион [3056-17-5].

Примесь B: 3'-хлор-3'-дезокситимидин [25526-94-7].

Примесь C: 5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион [65-71-4].

Примесь D: трифенилметанол [76-84-6].

Примесь E: 1-(2-дезокси--D-эритро-пентофуранозил)-5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион [50-89-5].

Примесь F: 1-(2-Дезокси--D-трео-пентофуранозил)-5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион [16053-52-4].

Примесь G: 3'-(3'-азидо-3'-дезокситимидин-3-ил)-3'-дезокситимидин [148665-49-0].

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси D, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Зидовудин - 1 (около 16 мин); примесь B - около 1,05; примесь G - около 1,5; примесь D - около 2,0.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей B и G используют хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу зидовудина для пригодности системы. Для идентификации пика примеси D используют хроматограмму раствора стандартного образца примеси трифенилметанола.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками зидовудина и примеси B должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси G не должна превышать двукратную площадь пика зидовудина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика зидовудина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%).

Не учитывают пики, обусловленные примесью D, пики, элюирующиеся после пика примеси D, и пики, площадь которых менее 0,5 площади пика зидовудина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Подвижная фаза (ПФ). Вода - ацетонитрил 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 10 мл ацетонитрила и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси D. В мерную колбу вместимостью 10 мл добавляют 5,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D и доводят объем раствора ацетонитрилом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл добавляют 1,0 мл раствора стандартного образца примеси D и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл добавляют 1,0 мл раствора стандартного образца примеси D и доводят объем раствора испытуемым раствором до метки.

Примечание

Примесь D: трифенилметанол [76-84-6].

Примесь J: 1-[3-азидо-5-O-(трифенилметил)-2,3-дидезокси--D-эритро-пентофуранозил]-5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион [29706-84-1].

Примесь K: 1,1',1"-(метоксиметантриил)трибензол [596-31-6].

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Зидовудин - 1 (около 1,5 мин); примесь D - около 2,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси D используют хроматограмму раствора сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками зидовудина и примеси D должно быть не менее 5,0.

Содержание примеси D в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика примеси D на хроматограмме раствора стандартного образца примеси D;

a₁ - навеска субстанции, мг.

- любая примесь - не более 0,10%.

Не учитывают пики, элюирующиеся до пика примеси D, и пики, содержание каждой из которых менее 0,05%.

Вода. Не более 1,0% (ОФС "Определение воды", метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,25% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС "Тяжелые металлы" (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

<**> Бактериальные эндотоксины. Не более 0,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС "Бактериальные эндотоксины"). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 1 мг зидовудина в 1 мл воды для БЭТ.

--------------------------------

<**> Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания "Родственные примеси. Примеси A, B, C, E, F, G" со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл добавляют 10,0 мл испытуемого раствора из раздела "Родственные примеси" и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца зидовудина. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца зидовудина, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца зидовудина и испытуемый раствор.

Содержание зидовудина C₁₀H₁₃N₅O₄ в субстанции в процентах в пересчете на безводное и свободное от остаточных растворителей вещество (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика зидовудина на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика зидовудина на хроматограмме стандартного раствора;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска фармакопейного стандартного образца зидовудина, мг;

W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;

P - содержание зидовудина в фармакопейном стандартном образце зидовудина, %.

В защищенном от света месте.