"ФС.2.1.0448. Фармакопейная статья. Линкомицина гидрохлорид моногидрат. Линкомицин"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2S,4R)-1-Метил-4-пропил-N-[1,6,8-тридезокси-1-(метилсульфанил)-D-эритро--D-галакто-октопираноз-6-ил]пирролидин-2-карбоксамида гидрохлорид моногидрат.

Представляет собой смесь антибиотиков, продуцируемых штаммами Streptomyces lincolnensis var. lincolnensis или полученных другим способом.

Содержит не менее 96,0% и не более 102,0% линкомицина гидрохлорида C₁₈H₃₄N₂O₆S·HCl в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%, очень мало растворим в ацетоне.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца линкомицина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС "Общие реакции на подлинность").

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +135° до +150° в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (4% раствор субстанции в воде, ОФС "Оптическое вращение").

Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 20 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС "Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей").

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен выдержать сравнение с эталоном Y₆ (ОФС "Степень окраски жидкостей", метод 2).

pH раствора. От 3,5 до 5,5 (раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", ОФС "Ионометрия", метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Буферный раствор. Растворяют 34 г фосфорной кислоты концентрированной в 900 мл воды и доводят значение pH аммиака раствором концентрированным 25% до 6,10. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол - ацетонитрил - буферный раствор 80:170:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца линкомицина гидрохлорида (А). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца линкомицина гидрохлорида, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца линкомицина гидрохлорида (Б). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (А) и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (Б) и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца линкомицина гидрохлорида для проверки пригодности системы (содержит примеси A, B и C) в 2 мл ПФ.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (Б) и доводят объем раствора ПФ до метки.

Примечание

Линкомицин B: (2S,4R)-1-метил-N-[1,6,8-тридезокси-1-(метилсульфанил)-D-эритро--D-галакто-октопираноз-6-ил]-4-этилпирролидин-2-карбоксамид [2520-24-3].

Примесь A: (2R,4R)-1-метил-4-пропил-N-[1,6,8-тридезокси-1-(метилсульфанил)-D-эритро--D-галакто-октопираноз-6-ил]пирролидин-2-карбоксамид.

Примесь B: (2S,4EZ)-1-метил-4-пропилиден-N-[1,6,8-тридезокси-1-(метилсульфанил)-D-эритро--D-галакто-октопираноз-6-ил]пирролидин-2-карбоксамид [37744-65-3].

Примесь C: (2S,4R)-4-пропил-N-[1,6,8-тридезокси-1-(метилсульфанил)-D-эритро--D-галакто-октопираноз-6-ил]пирролидин-2-карбоксамид [2256-16-8].

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В), раствор стандартного образца линкомицина гидрохлорида (Б) и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Линкомицин - 1 (около 10 мин); примесь C - около 0,4; линкомицин B - около 0,5; примесь A - около 0,7; примесь B - около 1,2 (первый пик) и около 1,3 (второй пик).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиком линкомицина и первым пиком примеси B должно быть не менее 1,8.

На хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В):

- фактор асимметрии пика (A_S) линкомицина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика линкомицина должно быть не более 5,0% (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику линкомицина, должна составлять не менее 2500 теоретических тарелок.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика линкомицина должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна превышать пятикратную площадь пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В) (не более 0,5%);

- сумма площадей пиков примеси B не должна превышать пятикратную площадь пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В) (не более 0,5%);

- площадь пика примеси C не должна превышать двукратную площадь пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В) (не более 0,2%);

- площадь пика единичной неидентифицированной примеси не должна превышать площадь пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В) (не более 0,10%);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать площадь пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (Б) (не более 2,0%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В) (менее 0,05%).

Линкомицин В. Не более 5,0%. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания "Родственные примеси".

Содержание линкомицина В в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика линкомицина В на хроматограмме испытуемого раствора;

S₂ - площадь пика линкомицина на хроматограмме испытуемого раствора.

Вода. От 3,1% до 4,6% (ОФС "Определение воды", метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,5% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,0005%. ОФС "Тяжелые металлы" (метод 6) в зольном остатке, полученном после сжигания 2,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

<*> Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС "Аномальная токсичность"). Тест-доза - 2 мг линкомицина в 0,5 мл натрия хлорида раствора 0,9% на мышь, внутривенно. Срок наблюдения - 48 ч.

<*> Бактериальные эндотоксины. Не более 0,50 ЕЭ на 1 мг линкомицина гидрохлорида (ОФС "Бактериальные эндотоксины").

--------------------------------

<*> Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания "Родственные примеси".

Хроматографируют раствор стандартного образца линкомицина гидрохлорида (А) и испытуемый раствор.

Содержание линкомицина гидрохлорида C₁₈H₃₄N₂O₆S·HCl в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика линкомицина на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (А);

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска фармакопейного стандартного образца линкомицина гидрохлорида, мг;

P - содержание линкомицина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце линкомицина гидрохлорида, %;

W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке.