"ФС.2.1.0157. Фармакопейная статья. Пилокарпина гидрохлорид. Пилокарпин"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(3S,4R)-4-[(1-Метил-1H-имидазол-5-ил)метил]-3-этилоксолан-2-она гидрохлорид.

Содержит не менее 99,0% и не более 101,0% пилокарпина гидрохлорида C₁₁H₁₆N₂O₂·HCl в пересчете на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

<*> Гигроскопичен.

--------------------------------

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96%.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия хлоридом, в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца пилокарпина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС "Общие реакции на подлинность").

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +89 до +93 в пересчете на сухое вещество (5% раствор субстанции в воде, свободной от углерода диоксида, ОФС "Оптическое вращение").

Прозрачность раствора. Раствор 2,50 г субстанции в 50 мл воды, свободной от углерода диоксида должен быть прозрачным (ОФС "Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей").

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен выдерживать сравнение с эталоном Y₇ (ОФС "Степень окраски жидкостей", метод 2).

pH раствора. От 3,5 до 4,5 (5% раствор, ОФС "Ионометрия", метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Буферный раствор. Растворяют 0,679 г тетрабутиламмония дигидрофосфата в 600 мл воды и доводят значение pH аммиака раствором разведенным 3,4% до 7,7, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол - ацетонитрил - буферный раствор 55:60:885.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца пилокарпина нитрата для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примесь A, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для идентификации примеси B. К 5 мл испытуемого раствора прибавляют 0,1 мл аммиака раствора и нагревают на водяной бане в течение 30 мин. После охлаждения раствор помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят водой до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 3,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки. Образуется в основном пилокарпиновая кислота (примесь B).

Примечание

Примесь A (изопилокарпин): (3R,4R)-4-[(1-метил-1H-имидазол-5-ил)метил]-3-этилоксолан-2-он [531-35-1].

Примесь B (пилокарпиновая кислота): (2S,3R)-4-гидрокси-3-[(1-метил-1H-имидазол-5-ил)метил]-2-этилбутановая кислота [28406-15-7].

Примесь C (изопилокарпиновая кислота): (2R,3R)-4-гидрокси-3-[(1-метил-1H-имидазол-5-ил)метил]-2-этилбутановая кислота [34350-99-7].

Хроматографируют раствор для идентификации примеси B, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Порядок выхода пиков: примесь B, примесь C, примесь A, пилокарпин.

Время удерживания пилокарпина - около 20 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками примеси A и пилокарпина должно быть не менее 1,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна более чем в 2 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0%);

- сумма площадей пиков примесей A и B не должна более чем в 3 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,5%);

- сумма площадей пиков (кроме примесей A и B) не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,4 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,2%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС "Потеря в массе при высушивании", способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Железо. Не более 0,001% (ОФС "Железо", метод 2). Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл воды, используя эталонный раствор из 5 мл железа стандартного раствора 1 мкг/мл и 5 мл воды.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС "Титриметрия (титриметрические методы анализа)").

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 50 мл смеси уксусного ангидрида и безводной уксусной кислоты в соотношении 7:3 и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС "Потенциометрическое титрование") или с индикатором (0,1 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1%) до перехода окраски в сине-зеленую.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 24,47 мг пилокарпина гидрохлорида C₁₁H₁₆N₂O₂·HCl.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке в защищенном от света месте.