"ФС.2.1.0061. Фармакопейная статья. Ацетилцистеин"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

(2R)-2-Ацетамидо-3-сульфанилпропановая кислота.

Содержит не менее 98,0% и не более 101,0% ацетилцистеина C₅H₉NO₃S в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы со специфическим запахом.

Растворимость. Легко растворим в воде и спирте 96%, практически нерастворим в метиленхлориде.

1. ИК-спектрометрия. (ОФС Спектрометрия в средней инфракрасной области). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ацетилцистеина.

2. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 1,0 мл воды, прибавляют 0,1 мл натрия нитропруссида раствора 5% и 0,1 мл раствора аммиака концентрированного 32%; должно появиться темно-фиолетовое окрашивание.

Температура плавления. От 104 до 110 °C (ОФС "Температура плавления", метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС "Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей").

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен быть бесцветным (ОФС "Степень окраски жидкостей", метод 2).

Удельное вращение. От +21 до +27 в пересчете на сухое вещество (ОФС "Оптическое вращение").

Испытуемый раствор. К 1,25 г (точная навеска) субстанции прибавляют 1 мл раствора натрия эдетата 0,01 г/мл и 7,5 мл 1 М раствора натрия гидроксида, перемешивают до растворения и доводят объем раствора фосфатным буферным раствором pH 7,0 до 25,0 мл.

pH раствора. От 2,0 до 2,8 (1% раствор, ОФС "Ионометрия", метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Все растворы используют сразу после приготовления.

Подвижная фаза (ПФ) Ацетонитрил - вода 3:97, доводят значение pH фосфорной кислотой до pH 3,0.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 80 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 1,0 мл хлористоводородной кислоты растворе 1 М и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора, доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 М до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 М до метки и перемешивают.

Стандартный раствор A. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4 мг примеси A, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 1 М и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор B. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 3 мг примеси B, 5 мг примеси C и 2,5 мг примеси D, прибавляют 4,0 мл раствора примеси A, доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 М до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора испытуемым раствором до метки.

Стандартный раствор C. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мг 2-метил-2-тиазолин-4-карбоксилат натрия [15058-19-2], растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 1 М и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 М до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 М до метки.

Примечание

Примесь A (L-цистин): 3,3'-дисульфандиилбис[(2R)-2-аминопропановая кислота] [56-89-3].

Примесь B (L-цистеин): (2R)-2-амино-3-сульфанилпропановая кислота [52-90-4].

Примесь C (N, N'-диацетил-L-цистин): 3,3'-дисульфандиилбис[(2R)-2-ацетамидопропановая кислота] [5545-17-5].

Примесь D (N, S-диацетил-L-цистеин): (2R)-2-ацетамидо-3-(ацетилсульфанил)пропановая кислота [18725-37-6].

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартные растворы A, B и C, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ацетилцистеин - 1 (около 5 мин); примесь A - около 0,48; примесь B - около 0,53; 2-метил-2-тиазолин-4-карбоновая кислота - около 0,8 примесь C - около 2,1; примесь D - около 2,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, C и D используют хроматограмму стандартного раствора B; хроматограмму стандартного раствора C используют для идентификации пика примеси 2-метил-2-тиазолин-4-карбоновой кислоты.

Пригодности хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы: отношение сигнал/шум (S/N) для пика ацетилцистеина должно быть не менее 10.

На хроматограмме стандартного раствора B:

- разрешение (R_S) между пиками примесей A и B должно быть не менее 1,5;

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками 2-метил-2-тиазолин-4-карбоновая кислоты и ацетилцистеина должно быть не менее 5;

- фактор асимметрии пика (A_S) ацетилцистеина, должен быть не более 2,2.

Поправочные коэффициенты. Для расчета содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь B - 3,4; примесь C - 0,7; примесь D - 0,3.

- примесь C - не более 0,3%;

- примесь B - не более 0,2%;

- примесь D - не более 0,15%;

- любая другая примесь - не более 0,10%;

- сумма примесей - не более 0,5%.

Содержание любой примеси в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S_i - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика ацетилцистеина на хроматограмме раствора сравнения;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска стандартного образца примеси, мг;

k - поправочный коэффициент.

Не учитывают пик примеси 2-метил-2-тиазолин-4-карбоновой кислоты, который образуется в результате разложения ацетилцистеина в кислых растворах, таких как раствор хлористоводородной кислоты 1 М и пики, площадь которых менее площади пика ацетилцистеина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (не более 0,05%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0% (ОФС "Потеря в массе при высушивании", способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 70 °C в течение 3 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,2% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС "Тяжелые металлы" (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции (ОФС "Сульфатная зола") с использованием эталонного раствора 1.

Цинк. Не более 0,001%. Определение проводят методом ААС (ОФС "Атомно-абсорбционная спектрометрия").

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 г субстанции, растворяют в 0,001 М хлористоводородной кислоте и доводят объем тем же растворителем до метки.

Калибровочные растворы. Готовят разведения с использованием стандартного раствора цинка 5 мг/мл и 0,001 М хлористоводородной кислоты.

Определяют эффективные значения атомной абсорбции испытуемого раствора и калибровочных растворов. Учитывают величину неспецифической абсорбции. По калибровочной прямой рассчитывают концентрацию цинка в субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

<*> Бактериальные эндотоксины. Не более 0,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС "Бактериальные эндотоксины").

--------------------------------

<*> Контроль по показателю "Бактериальные эндотоксины" проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

Определение проводят методом титриметрии (ОФС "Титриметрия (титриметрические методы анализа)").

Растворяют 0,14 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды, прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты разведенной 7,3% и перемешивают. После охлаждения на ледяной бане прибавляют 10 мл калия йодида раствора 1 М и титруют 0,05 М раствором йода (индикатор - крахмала раствор 1%).

1 мл 0,05 М раствора йода соответствует 16,32 мг C₅H₉NO₃S.

В плотно укупоренной упаковке, в защищенном от света месте.