"ФС.2.1.0190. Фармакопейная статья. Тимолола малеат. Тимолол"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2S)-1-(трет-Бутиламино)-3-{[4-(морфолин-4-ил)-1,2,5-тиадиазол-3-ил]окси}пропан-2-ола(2Z)-бут-2-ендиоат(1:1).

Содержит не менее 98,5% и не более 101,0% тимолола малеата C₁₃H₂₄N₄O₃S·C₄H₄O₄ в пересчете на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Растворим в воде и спирте 96%.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тимолола малеата.

2. Качественная реакция. Растирают 0,1 г субстанции со смесью 1 мл натрия гидроксида раствора 8,5% и 3 мл воды и встряхивают с 3 порциями по 5 мл эфира. Добавляют к 0,1 мл водного слоя раствор, содержащий 10 мг резорцина в 3 мл серной кислоты концентрированной, нагревают на водяной бане в течение 15 мин; не должно появляться фиолетово-красного окрашивания. Остаток водного слоя нейтрализуют серной кислотой раствором 9,8% и прибавляют 1 мл бромной воды. Нагревают на водяной бане в течение 15 мин, затем доводят до кипения и охлаждают. К 0,2 мл полученного раствора прибавляют раствор, содержащий 10 мг резорцина в 3 мл серной кислоты концентрированной и нагревают на водяной бане в течение 15 мин. Должно появиться фиолетово-красное окрашивание. Прибавляют 0,2 мл калия бромида раствора 10% и нагревают на водяной бане в течение 5 мин. Окрашивание раствора должно измениться на фиолетово-синее.

ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 25 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I (ОФС "Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей").

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен быть бесцветным или его окраска должна выдерживать сравнение с эталоном B₈ (ОФС "Степень окраски жидкостей").

pH раствора. От 3,8 до 4,3 (2% раствор, ОФС "Ионометрия", метод 3). Испытание проводят с раствором, полученным в испытании "Прозрачность раствора".

Удельное вращение. От -5,7 до -6,2 в пересчете на сухое вещество (10% раствор субстанции в хлористоводородной кислоты растворе 1 М, ОФС "Оптическое вращение").

Энантиомерная чистота. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Испытание проводят в защищенном от электромагнитного излучения месте.

Смесь растворителей. Метиленхлорид - 2-пропанол 10:30.

Подвижная фаза (ПФ). Диэтиламин - 2-пропанол - гексан 2:40:960.

Испытуемый раствор. В мерной колбе вместимостью 10 мл растворяют в смеси растворителей 30 мг (точная навеска) субстанции и доводят объем раствора до метки.

Раствор стандартного образца тимолола малеата. В мерной колбе вместимостью 10 мл растворяют в смеси растворителей 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тимолола малеата и доводят объем раствора до метки.

Раствор стандартного образца примеси A. В мерной колбе вместимостью 10 мл растворяют в смеси растворителей 3 мг фармакопейного стандартного образца примеси A и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят смесью растворителей до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца тимолола малеата и доводят объем раствора смесью растворителей до метки. Смешивают 1,0 мл полученного раствора с 1,0 мл раствора стандартного образца примеси A.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора смесью растворителей до метки.

Примечание

Примесь A: ((2R)-1-(трет-бутиламино)-3-{[4-(морфолин-4-ил)-1,2,5-тиадиазол-3-ил]окси}пропан-2-ол [26839-76-9]).

Хроматографируют раствор сравнения, стандартный раствор, раствор стандартного образца тимолола малеата и испытуемый раствор. Примесь A элюируется первой.

Пригодность хроматографической системы:

- на хроматограмме стандартного раствора разрешение (R) между пиками примеси A и тимолола малеата должно быть не менее 4,0;

- на хроматограммах испытуемого раствора и раствора стандартного образца тимолола малеата время удерживания тимолола должно быть идентичным.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси A должна быть не более площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0%).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС "Тонкослойная хроматография").

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF₂₅₄, толщина слоя 0,25 мм.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный - метанол - хлороформ 1:20:80.

Растворитель. Метанол.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,50 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 5,0 мл метанола, доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца тимолола малеата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,02 г фармакопейного стандартного образца тимолола малеата, растворяют в 30,0 мл метанола и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мл раствора стандартного образца тимолола малеата и доводят объем раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мл раствора стандартного образца тимолола малеата и доводят объем раствора растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл раствора стандартного образца тимолола малеата (2 мкг), стандартного раствора А (1 мкг), стандартного раствора Б (0,5 мкг) и испытуемого раствора (500 мкг). Пластинку с нанесенными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт подвижной фазы пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при 254 нм, помещают на 2 ч в камеру с парами йода, после чего определяют расположение зон адсорбции в дневном свете. Сравнивают посторонние зоны адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора с зонами адсорбции растворов стандартного образца тимолола малеата, стандартного раствора А и стандартного раствора Б.

Пригодность хроматографической системы. Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограммах стандартных растворов А и Б четко видна зона адсорбции тимолола малеата.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора допускается наличие только одной дополнительной зоны адсорбции, не превышающей по совокупности величины и интенсивности окраски зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца тимолола малеата (не более 0,4%). Сумма интенсивностей всех посторонних зон адсорбции не должна превышать 1,0%.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС "Потеря в массе при высушивании", способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС "Тяжелые металлы" (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании "Сульфатная зола", с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС "Титриметрия (титриметрические методы анализа)").

Растворяют 0,35 г (точная навеска) субстанции в 60 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты.

Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС "Потенциометрическое титрование").

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 43,25 мг тимолола малеата C₁₃H₂₄N₄O₃S·C₄H₄O₄.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.